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搜索到248篇“ 排泄分泌抗原“的相关文章

日本血吸虫成虫和虫卵排泄分泌抗原对Ⅰ型糖尿病模型小鼠的影响: 2024年; 目的观察日本血吸虫成虫排泄分泌抗原(adult-worm excretory-secretory protein,AES)和虫卵排泄分泌抗原(excretory-secretory antigen of eggs,ESA)对Ⅰ型糖尿病小鼠的影响,并初步探讨其作用机制。方法将24只雄性昆明鼠随机分为空白对照组、PBS组、AES组和ESA组,每组6只。空白对照组不作任何处理,后3组给予链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)溶液注射制备Ⅰ型糖尿病模型,建模成功后分别用PBS、AES、ESA腹部皮下多点免疫,1周免疫1次,持续免疫4周。免疫干预1周后开始检测小鼠血糖,持续检测4周;免疫干预4周后采用ELISA法测定小鼠血清中IL-4和IFN-γ水平变化,采用HE染色法检测小鼠胰腺组织病理变化。结果与PBS组相比,AES组和ESA组小鼠血糖水平从免疫后第2周起出现下降趋势,且ESA组小鼠血糖水平低于AES组,免疫后第2、3、4周小鼠血糖水平组间差异有统计学意义(F=1214.00、1055.00、683.64,P均<0.05)。各组小鼠血清IL-4和IFN-γ水平组间差异有统计学意义(F=146.84、21.11,P均<0.05),ESA组小鼠血清中IL-4水平[(61.45±6.14)pg/mL]高于PBS组[(21.96±3.98)pg/mL]和AES组[(49.31±3.19)pg/mL],IFN-γ水平[(129.48±36.75)pg/mL]低于PBS组[(316.43±66.38)pg/mL]和AES组[(212.09±70.89)pg/mL],差异均有统计学意义(P均<0.05)。PBS组小鼠的胰岛萎缩,数量减少,空泡样变性;ESA组小鼠有轻微胰岛萎缩;AES组介于PBS组和ESA组之间。结论日本血吸虫ESA对Ⅰ型糖尿病小鼠有一定保护作用,其机制可能是ESA刺激机体导致Th1反应抑制和Th2反应增强,表现为IL-4升高和IFN-γ下降,在一定程度上减轻小鼠胰腺组织的病理损伤。; 王旗章乐生汪峰峰汪敏王毓洁马晓荷李清越操治国; 关键词：日本血吸虫

旋毛虫肌幼虫排泄分泌抗原诱导的肠道免疫保护作用研究: 2023年; 目的研究旋毛虫肌幼虫排泄分泌抗原(Trichinella spiralis muscle larvae excretory-secretory, Ts-Es)诱导小鼠肠道保护性免疫能力以及免疫调节作用。方法 54只BALB/c小鼠随机分为3组,空白对照组、旋毛虫感染组(Ts)、旋毛虫Ts-Es抗原免疫组(Ts-Es)。空白组小鼠腹腔注射PBS;抗原免疫组小鼠腹腔注射0.1 mL的Ts-Es抗原与等量弗氏完全佐剂;旋毛虫感染组腹腔注射PBS和弗氏完全佐剂,每隔7 d注射1次,共3次,末次注射后7 d旋毛虫感染组和Ts-Es抗原免疫组用400条/mL旋毛虫感染性幼虫灌胃攻击感染。解剖取材,检查肠道成虫及肌肉幼虫减虫率,用HE染色法观察肠道病理变化,RT-qPCR法检测小肠中目的基因mRNA表达水平。结果与旋毛虫感染组相比Ts-Es抗原免疫组成虫和肌幼虫减虫率分别为49%(t=8.109,P<0.05)和67%(t=8.090,P<0.05);与空白对照组相比旋毛虫感染组小肠T-bet(t=5.25,P<0.05)、GATA3(t=2.50,P<0.05)、RORγ-t(t=4.71,P<0.05)、IFN-γ(t=3.17,P<0.05)、IL-4(t=2.60,P<0.05)、IL-5(t=3.05,P<0.05)、IL-17A(t=4.88,P<0.05) mRNA表达量升高,Foxp3表达量没有统计学差异(t=1.55,P>0.05);与旋毛虫感染组相比Ts-Es抗原免疫组T-bet(t=4.23,P<0.05)、RORγ-t(t=4.30,P<0.05)、IFN-γ(t=3.02,P<0.05)、IL-17A(t=3.17,P<0.05) mRNA表达量下降;GATA3(t=3.96,P<0.05)、Foxp3(t=2.76,P<0.05)、IL-4(t=5.16,P<0.05)、IL-5(t=3.69,P<0.05)、IL-10(t=2.61,P<0.05) mRNA表达量升高;与空白对照组相比Ts-Es抗原免疫组GATA3(t=6.4,P<0.05)、Foxp3(t=4.32,P<0.05)、IL-10(t=2.6,P<0.05)、IL-4(t=7.26,P<0.05)、IL-5(t=6.3,P<0.05) mRNA表达量升高均有统计学差异;RORγ-t(t=0.41,P>0.05)、T-bet(t=1.02,P>0.05)、IFN-γ(t=0.09,P>0.05)、IL-17A(t=1.80,P>0.05) mRNA表达量无统计学差异;肠道HE染色结果显示,与旋毛虫感染组相比抗原免疫组炎症好转,肠道HE染色结果显示,与旋毛虫感染组相比抗原免疫组炎症好转。结论 Ts-Es抗原免疫小鼠后可诱发转录因子GATA3,Foxp3相关的混合型免疫应答,; 那皮沙·居热提何灵艾尼瓦尔·吾买尔白杰; 关键词：旋毛虫肌幼虫排泄分泌抗原肠道免疫免疫保护作用

猪囊尾蚴排泄分泌抗原TPx蛋白的筛选验证、T细胞抗原表位预测及真核表达被引量：1: 2023年; 目的在对猪囊尾蚴及其排泄分泌抗原(excretory secretory antigen, ESA)非标定量(label-free quantification, LFQ)蛋白质组学分析的基础上,筛选并验证具有调控T细胞免疫应答功能的硫氧还蛋白过氧化物酶(thioredoxin peroxidase, TPx)蛋白,预测TPx蛋白的亲水性和T细胞抗原表位并进行真核表达。方法对猪囊尾蚴ESA差异蛋白进行基因本体论(gene ontology, GO)富集和生物学功能注释,筛选TPx蛋白。运用平行反应监测技术(parallel reaction monitoring, PRM)验证TPx蛋白。运用Kyte&Doolittle法预测TPx蛋白的亲水性,运用Propred软件预测TPx蛋白T细胞抗原表位。采用基于PCR准确合成(PCR-based accurate synthesis, PAS)方法,全基因合成TPx抗原编码基因并克隆至pcDNA3.4载体,构建重组质粒pcDNA3.4-TPx,转染至HEK293细胞,表达和纯化TPx蛋白。结果根据GO富集和生物学功能注释,筛选出差异表达量最大的TPx蛋白。TPx蛋白经PRM验证,LFQ蛋白质组学与靶向蛋白质组学对TPx蛋白表达量的趋势一致。预测该蛋白为亲水性蛋白,且含有多个可能的优势T淋巴细胞抗原表位。重组质粒pcDNA3.4-TPx构建正确,经SDS-PAGE电泳分析和Western blot鉴定,在细胞培养上清获得相对分子质量约为26×10^(3)的TPx蛋白,且纯化后带有His标签的TPx重组蛋白能被抗His单克隆抗体识别。结论成功实现了对猪囊尾蚴ESA中TPx蛋白的筛选、验证、T细胞抗原表位预测和真核表达,且表达的TPx蛋白具有反应原性,为该蛋白的进一步研究奠定了基础。; 何威李丽竹孙晓晴罗波周必英; 关键词：猪囊尾蚴排泄分泌抗原抗原表位预测真核表达

抗旋毛虫排泄分泌抗原的卵黄抗体及制备方法和用途: 本发明提供了一种抗旋毛虫排泄分泌抗原（ESA）鸡卵黄抗体，同时还公开了卵黄抗体在抗肿瘤中的医用用途；具有增强动物免疫力、无毒等特点，可作为口服制剂用于肺癌等肿瘤的治疗，同时也可制成口服液等做为食品用于预防肿瘤；鸡等禽类卵...; 张西臣岳涛涛张楠李建华宫鹏涛王瑜

猪囊尾蚴排泄分泌抗原TPx对仔猪树突状细胞活化的影响被引量：1: 2023年; 目的探讨猪囊尾蚴排泄分泌抗原(ESA)硫氧还蛋白过氧化物酶(TPx)对仔猪树突状细胞(DC)活化的影响。方法体外诱导培养健康仔猪髓源DC,培养7 d后,加入终浓度为100 ng/ml的脂多糖(LPS)刺激,继续孵育2 d,分别收集培养未成熟DC(imDC)和成熟DC(mDC),光学显微镜和扫描电镜下观察其培养1~9 d的形态学变化,流式细胞术检测其表面标志物CD1和主要组织相容性复合体Ⅱ(MHC⁃Ⅱ)的表达情况。另收集培养后7 d的imDC,设阴性对照组、TPx组、排泄分泌抗原(ESA)组、LPS阳性对照组,分别加入RPMI 1640培养基、TPx(50μg/ml)、ESA(50μg/ml)、LPS(100 ng/ml)刺激48 h后,流式细胞术检测DC表面标志物MHC⁃Ⅱ、CD80、CD86的表达情况;ELISA检测DC细胞培养上清中肿瘤坏死因子⁃α(TNF⁃α)、白细胞介素6(IL⁃6)、IL⁃10、IL⁃12的分泌水平。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD⁃t检验。结果光学显微镜下可见,培养第1天,imDC呈卵圆形,形态单一;随着培养时间延长,DC体积逐渐增大,出现伪足和刺突等,并从卵圆形变为不规则状。扫描电镜下可见,与imDC相比,mDC形态不规则,大致呈长梭形,从胞体辐射出众多长短不一的突起,呈树枝状分布,为典型的树突状结构。流式细胞术检测结果显示,imDC中表达CD1、MHC⁃Ⅱ的DC占比分别为(0.113±0.005)%、(0.430±0.016)%,低于mDC的(21.400±0.327)%、(21.333±0.450)%(t=130.341、92.906,均P<0.05)。TPx组表达MHC⁃Ⅱ、CD80、CD86的DC占比分别为(15.300±0.245)%、(22.900±0.374)%、(13.033±0.249)%,均低于LPS阳性对照组的(19.000±0.374)%、(31.600±0.082)%、(21.300±0.245)%(t=11.53、46.32、43.84,均P<0.05)和ESA组的(18.365±0.618)%、(40.400±0.356)%、(30.300±0.283)%](t=9.55、93.17、91.57,均P<0.05);TPx组表达MHC⁃Ⅱ的DC占比高于阴性对照组的(12.133±0.492)%(t=9.87,P<0.05)。ELISA检测结果显示,培养上清中,TPx组DC分泌IL⁃6水平为15.682±0.660,低于阴性对照组; 叶井明何威刘慧媛鱼潇罗波刘美辰周必英; 关键词：猪囊尾蚴排泄分泌抗原树突状细胞

猪囊尾蚴排泄分泌抗原LRRC15蛋白的原核表达及多克隆抗体制备: 2023年; 目的构建猪带绦虫重组质粒pET30a-富含亮氨酸重复序列(LRR)结构域15(LRRC15),原核表达纯化的LRRC15重组蛋白,制备兔多克隆抗体。方法采用全基因合成方法,获得猪带绦虫LRRC15蛋白编码基因;将其克隆至pET30a载体,构建重组质粒pET30a-LRRC15,并进行双酶切PCR鉴定;将重组质粒转化至大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达LRRC15重组蛋白,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析鉴定表达产物;用Ni-IDA亲和层析柱纯化LRRC15重组蛋白,SDS-PAGE进行分析鉴定;蛋白质印迹法(Western blot,WB)鉴定纯化重组蛋白特异性;用纯化的LRRC15重组蛋白免疫新西兰兔,制备LRRC15多克隆抗体,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)测定纯化多克隆抗体的效价。结果经PCR鉴定,扩增出长度为1506 bp的条带,与LRRC15基因相符;经SDS-PAGE和WB鉴定,获得相对分子质量(Mr)约为55.36×10^(3)的LRRC15目的蛋白;用LRRC15重组蛋白免疫新西兰兔,获得LRRC15多克隆抗体,其效价为1∶1587200。结论成功构建重组质粒pET30a-LRRC15,制备出猪带绦虫LRRC15重组蛋白,并获得了高纯度、高效价的LRRC15重组蛋白兔抗多克隆抗体。; 汪倩倩王世敏王乾飞袁凤玲何威李丽竹周必英; 关键词：猪带绦虫猪囊尾蚴排泄分泌抗原原核表达多克隆抗体

猪囊尾蚴排泄分泌抗原TPx蛋白的表达、纯化及其多克隆抗体制备: 2023年; 目的原核表达猪囊尾蚴排泄分泌抗原(Excretory secretory antigen,ESA)硫氧还蛋白过氧化物酶(Thioredoxin peroxidase,TPx),并纯化TPx蛋白及制备兔多克隆抗体。方法通过全基因合成的方法PCR扩增TPx基因。将扩增的TPx基因克隆至原核表达质粒pET30a载体中,构建重组质粒pET30a-TPx并转化至大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞,通过异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,12%SDS-PAGE电泳分析蛋白表达情况。用Ni-IDA亲和层析柱进行纯化,Western blot鉴定TPx重组蛋白的纯化效果。用纯化的TPx重组蛋白免疫新西兰兔,制备TPx多克隆抗体,ELISA测定纯化抗体的效价。结果成功构建重组质粒pET30a-TPx,经IPTG诱导表达,获得以可溶性形式高效表达的TPx重组蛋白,相对分子质量约为22.43×103,纯化后的带有His标签的TPx重组蛋白能被兔抗血清识别。用纯化的TPx重组蛋白免疫新西兰兔,获得TPx多克隆抗体,其ELISA效价为1∶1126400,抗体纯度为85%。结论成功制备猪囊尾蚴排泄分泌抗原TPx重组蛋白,并获得了高纯度、高效价的兔多克隆抗体。; 王乾飞袁凤玲王世敏汪倩倩何威罗波周必英; 关键词：猪囊尾蚴排泄分泌抗原原核表达多克隆抗体

猪囊尾蚴排泄分泌抗原LRRC15蛋白对仔猪T细胞免疫应答的影响: 2023年; 目的观察猪囊尾蚴排泄分泌抗原LRRC15蛋白对仔猪T细胞免疫应答的影响方法用LRRC15蛋白刺激健康仔猪外周血PBMC和脾脏CD4^(+)T细胞,分析T细胞免疫应答水平:①在PHA处理下,以RPMI 1640、ESA、ConA为对照组,用LRRC15蛋白刺激PBMC,流式检测CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞数量比例变化,以及CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)、CD8^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞表达水平;②在有和无LPS存在下,用LRRC15蛋白刺激PBMC,ELISA检测培养上清中IL-10含量;③分别于加入LRRC15蛋白后24、48、72 h检测初始CD4^(+)Th细胞分化情况。分离仔猪脾脏CD4^(+)T细胞并与未成熟髓源性DC共培养,采用ELISA方法检测加入LRRC15蛋白24、48、72 h培养上清中的IL-4、IL-5、IL-10、IL-17、IFN-γ水平。结果LRRC15蛋白刺激PBMC后,CD4^(+)T淋巴细胞数量比例显著增加(P<0.05),并诱导CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)、CD8^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg表达(均P<0.05),但不能诱导IL-10的分泌。LRRC15蛋白分别作用于CD4^(+)T细胞24、48、72 h,PBMC细胞IL-4、IL-17分泌水平显著降低(均P<0.05);LRRC15蛋白诱导24与48 h相比,PBMC细胞分泌IL-5水平升高(P<0.05);诱导72 h的IL-5水平与48 h时比较差异无统计学意义(P<0.05);LRRC15蛋白诱导IFN-γ水平升高(P<0.05),诱导24、48、72 h时的分泌水平差异无统计学意义(P>0.05);LRRC15蛋白于CD4^(+)T细胞24、48、72 h均不能诱导IL-10分泌(均P>0.05)。结论LRRC15蛋白可诱导仔猪PBMC中CD4^(+)/CD8^(+)T细胞免疫失衡,诱导Treg细胞表达,通过非依赖性IL-10途径发挥免疫抑制作用,并诱导早期Th1型免疫应答和后期Th1/Th2混合型免疫应答。; 李丽竹何威周必英; 关键词：猪囊尾蚴排泄分泌抗原 T细胞免疫应答

猪囊尾蚴排泄分泌抗原LRRC15蛋白对仔猪树突状细胞活化的影响: 2023年; 目的探讨猪囊尾蚴排泄分泌抗原(Excretory secretory antigen, ESA)富含亮氨酸重复序列结构域(Leucine-rich repeat containing 15, LRRC15)蛋白对仔猪树突状细胞(Dendritic cell, DC)成熟活化的影响。方法收集正常仔猪DC体外诱导、培养,获得成熟与未成熟DC(immature DC, imDC)。在正常仔猪未成熟DC中,分别加入LRRC15蛋白、ESA刺激,将LRRC15组作为实验组;同时建立ESA对照组、LPS阳性对照组、LRRC15+LPS阳性对照组、LPS+ESA阳性对照组和培养基阴性对照组。流式细胞术检测DC表面标志物MHC-Ⅱ、CD80、CD86的表达量;ELISA检测DC细胞培养上清TNF-α、IL-6、IL-10、IL-12的分泌水平。结果与未刺激DC组相比,LRRC15蛋白组诱导DC表面标志物CD80、CD86、MHC-Ⅱ表达均增加。在LPS存在情况下,LRRC15蛋白也能诱导CD80、CD86、MHC-Ⅱ分子上调;ELISA检测结果显示,与1640培养基组、LPS组和ESA组相比,LRRC15蛋白组均诱导IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α分泌降低,LRRC15蛋白组与1640培养基组相比IL-6(t=7.529,P<0.05),IL-10(t=2.780,P<0.05),IL-12(t=4.673,P<0.05),TNF-α(t=2.894,P<0.05);LRRC15蛋白组与LPS组相比IL-6(t=26.663,P<0.05),IL-10(t=12.038,P<0.05),IL-12(t=27.594,P<0.05),TNF-α(t=29.540,P<0.05);LRRC15蛋白组与ESA组相比IL-6(t=6.343,P<0.05),IL-10(t=2.579,P<0.05),IL-12(t=8.102,P<0.05),TNF-α(t=3.890,P<0.05)。ESA组与1640培养基组相比能诱导IL-12分泌(t=3.430,P<0.05),其他细胞分子分泌水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 LRRC15蛋白能诱导DC成熟活化,并抑制DC相关细胞因子的分泌,但能否通过其他途径诱导Th细胞分化还需进一步分析。; 王怡李丽竹肖世玉周必英; 关键词：猪囊尾蚴排泄分泌抗原树突状细胞

猪囊尾蚴排泄分泌抗原重组TPx蛋白参与调控仔猪T细胞免疫应答的研究: 目的：　　基于猪囊尾蚴及其排泄分泌抗原（Excretory-secretoryantigens,ESAs）非标定量（Label-freequantification,LFQ）蛋白质组学分析的前期工作，筛选并验证差异表达显...; 何威; 关键词：猪囊尾蚴排泄分泌抗原蛋白质组学分析 T细胞免疫应答

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