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纳米级WS2-PEG在制备治疗皮肤成纤维细胞增生性疾病药物中的应用: 本发明公开了纳米级WS2‑PEG在制备治疗皮肤成纤维细胞增生性疾病药物中的应用，所述纳米级WS2‑PEG是通过硫辛酸修饰的聚乙二醇乳化纳米级WS2得到的产...; 曾庆海陈静刘松黄进华赵小娇徐妍妍雷厉蒋玲鲁建云康健夏芳康丽阳

氯化锂对人Tenon囊成纤维细胞增生抑制作用的机制研究: 2021年; 目的探讨氯化锂对人Tenon囊成纤维细胞(HTFs)缝隙连接细胞间通讯(GJIC)的影响及其可能的作用机制。方法收集2019年4月于德州市人民医院眼科行斜视手术的1例患者的Tenon囊组织,剪成1 mmxl mmX1 mm的组织块,进行原代培养并传代,取第4代HTFs进行实验。将HTFs分为对照组和氯化锂处理组,对照组加入不含氯化锂的细胞培养基,氯化锂处理组加入含80 mmol/L氯化锂的细胞培养基,继续培养48 h。采用细胞划痕染料标记示踪法标记偶联指数,评估GJIC功能;采用细胞免疫荧光法检测HTFs中Cx43的表达和定位;采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测HTFs中Cx43 mRNA及蛋白的表达水平。结果培养的细胞呈长梭形并呈单层放射状或涡旋状贴壁生长,细胞质vimentin染色呈阳性。细胞划痕染料示踪实验结果显示,氯化锂处理组细胞偶联指数为9.04±0,53,明显高于对照组的4.94±0,39,差异有统计学意义(t=-18.79,P<0.01)。免疫荧光染色结果显示,对照组可见Cx43荧光呈点状分布于细胞相连处的细胞膜上,氯化锂处理组Cx43染色明显增强。实时荧光定量PCR结果显示,对照组Cx43 mRNA相对表达量设为1,氯化锂处理组Cx43 mRNA相对表达量明显升高,为1.97±0,23,差异有统计学意义(t=-14.426,P<0.01)。Western blot检测结果显示,氯化锂处理组Cx43蛋白相对表达量为0.871±0,057,明显高于对照组的0.446±0.028,差异有统计学意义(t=-11.682,P<0.01)o结论氯化锂可上调HTFs中Cx43 mRNA及蛋白表达并增强HTFs间GJIC功能,提示氯化锂增强GJIC的功能可能是其抑制HTFs增生的机制之一。; 邹会会刘姗姗梁玲范晓军王继兵; 关键词：氯化锂青光眼

LncRNA在结膜囊成纤维细胞增生机制中的作用: 2021年; 目前,青光眼滤过术后滤过区域瘢痕形成机制尚未被完全了解。现认为术后伤口愈合期间细胞因子和生长因子的刺激使结膜囊内成纤维细胞过度活化,导致细胞外基质沉积,瘢痕形成。长链非编码RNA(lncRNA)是一类不编码蛋白质的RNA序列,可调控细胞的增生、凋亡及作为微小RNA的前体等,已被证实其在多种纤维化组织内特异性表达并发挥重要的调控功能。随着研究的不断深入,lncRNA也被发现还可参与青光眼滤过术后滤过泡瘢痕化的形成和发展。已有研究结果显示,lncRNA在青光眼滤过术后结膜囊组织内有特定表达,且不同的lncRNA可通过不同途径影响结膜囊内成纤维细胞的增生或细胞外基质的合成,对滤过泡瘢痕化的形成产生影响。本文对不同lncRNA在结膜囊成纤维细胞增生机制中的作用及潜在滤过泡瘢痕化的治疗前景进行综述,以期为滤过术后瘢痕化的治疗提供新的方向。; 程悦(综述)王峰苏颖; 关键词：青光眼青光眼滤过术长链非编码RNA 纤维化细胞增生

橙皮苷对人翼状胬肉成纤维细胞增生的抑制作用被引量：4: 2020年; 目的评价橙皮苷对体外培养人翼状胬肉成纤维细胞(human pterygium fibroblasts,HPF)增生的抑制作用,对照观察丝裂霉素C(mitomycin C,MMC)对HPF的影响,寻找治疗及预防翼状胬肉复发的中医中药方法。方法将人翼状胬肉新鲜组织剪碎后进行体外贴壁细胞常规培养及传代,并采用波形蛋白(Vimentin)免疫细胞化学染色及DAPI染色对HPF进行鉴定。用24μmol·L^-1、48μmol·L^-1、64μmol·L^-1、72μmol·L^-1、96μmol·L^-1、120μmol·L^-1橙皮苷及1.5μmol·L^-1、7.5μmol·L^-1、30.0μmol·L^-1 MMC作用于第3代HPF,24 h、48 h、72 h后采用MTT法检测细胞的增生抑制率,并筛选合适的浓度梯度及时间进行细胞凋亡检测,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果根据MTT法检测细胞增生抑制率的结果,选用72μmol·L^-1及48μmol·L^-1的橙皮苷作为实验组,将7.5μmol·L^-1 MMC作为MMC标准对照组,无处理细胞作为空白对照组,培养48 h后流式细胞仪检测HPF的凋亡率。结果显示,72μmol·L^-1橙皮苷组、48μmol·L^-1橙皮苷组、7.5μmol·L^-1 MMC标准对照组及空白对照组的细胞凋亡率分别为(41.10±1.04)%、(24.97±3.70)%、(48.60±6.94)%及(9.20±4.67)%,各组间HPF凋亡率整体存在差异(F=43.581,P<0.001),两两比较结果显示,除72μmol·L^-1橙皮苷组与MMC标准对照组间差异无统计学意义(P>0.05)外,其余组间两两相比差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论72μmol·L^-1橙皮苷在抑制HPF生长方面有着与MMC等同的效果,主要是通过促进HPF凋亡进而抑制HPF的增生。; 刘琳琳王辉吴晶刘锦荣吴维霖蒋贻平胡成全; 关键词：橙皮苷丝裂霉素C 细胞增生

纳米级WS2-PEG在制备治疗皮肤成纤维细胞增生性疾病药物中的应用: 本发明公开了纳米级WS2‑PEG在制备治疗皮肤成纤维细胞增生性疾病药物中的应用，所述纳米级WS2‑PEG是通过硫辛酸修饰的聚乙二醇乳化纳米级WS2得到的产...; 曾庆海陈静刘松黄进华赵小娇徐妍妍雷厉蒋玲鲁建云康健夏芳康丽阳

虹膜后表面色素颗粒对Tenon囊成纤维细胞增生的影响被引量：1: 2019年; 青光眼是目前最主要的不可逆性致盲眼病之一,以病理性高眼压和视野缺损为主要特点。滤过性手术在青光眼的治疗中具有重要地位,Tenon囊成纤维细胞(Tenon′s capsule fibroblasts,TCF)过度增生导致滤过通道瘢痕化降低了手术的成功率,是滤过性手术失败的根本原因。近年来,有研究提示,虹膜后表面色素颗粒在眼前段的存在有助于抑制TCF增生,为青光眼术中、术后抗瘢痕化处理提供新的思路和研究方向。; 唐琪卿国平; 关键词：青光眼滤过性手术 TENON囊成纤维细胞

雷帕霉素对体外培养人翼状胬肉成纤维细胞增生、移行和纤维化的抑制作用被引量：7: 2018年; 目的观察哺乳动物雷帕霉素靶点(mTOR)通路抑制剂雷帕霉素对人翼状胬肉成纤维细胞增生和移行的抑制作用.方法收集2015年5—7月沈阳市第四人民医院初发翼状胬肉患者术中切除的胬肉组织,利用组织块贴壁法原代培养翼状胬肉组织成纤维细胞(PFBs),波形蛋白细胞免疫荧光法进行细胞鉴定,取第3~5代细胞进行后续实验.利用甲基偶氮四唑(MTT)法检测不同摩尔浓度雷帕霉素处理条件下的细胞活力.将细胞分为正常对照组和雷帕霉素组,划痕试验观察各组细胞的迁移情况,实时定量PCR法检测各组细胞培养24 h MKI67、α.平滑肌肌动蛋白(α.SMA)、fibronectin、caspase3、mTOR及LC3B mRNA表达情况.结果体外培养的PFBs为长梭形,波形蛋白表达阳性.MTT检测显示,雷帕霉素处理的PFBs细胞活力呈剂量依赖性.30μmol/L雷帕霉素组细胞活力为0μmol/L雷帕霉素组的(76.67±8.84)%,差异有统计学意义(P<0.001),30μmol/L被选择为后续实验工作浓度.划痕后48 h,正常对照组细胞相对划痕宽度为(2.45±0.76)%,明显低于雷帕霉素组的(35.40±11.62)%,差异有统计学意义(P<0.05).实时荧光定量PCR结果显示,雷帕霉素组细胞增生标志物MKI67、细胞成肌纤维化标志物 α.SMA和细胞骨架蛋白fibronection、mTOR mRNA相对表达量均明显低于正常对照组,自噬标志物LC3B mRNA相对表达量明显高于正常对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05).2个组凋亡相关基因caspase3 mRNA的相对表达量比较,差异无统计学意义(P=0.861).结论雷帕霉素可能通过阻断mTOR通路抑制翼状胬肉成纤维细胞的增生、移行和纤维化,其具体作用机制仍有待进一步研究.雷帕霉素可能成为预防翼状胬肉进展及术后复发的有效药物.; 吴迪孙晓楠杜林张晓宇柳姗姗孙晶许林张绍丹; 关键词：翼状胬肉成纤维细胞雷帕霉素抗纤维化

肝细胞生长因子对转化生长因子-β1诱导的人Tenon囊成纤维细胞增生及转分化的抑制作用: 2018年; 目的研究肝细胞生长因子(HGF)对转化生长因子.β1(TGF.β1)诱导的人Tenon囊成纤维细胞增生和转分化的影响.方法人Tenon囊成纤维细胞进行常规培养后分为空白对照组、TGF.β1处理组及不同质量浓度HGF+TGF.β1组.TGF.β1处理组在细胞培养液中添加10μg/L TGF.β1,不同质量浓度HGF+TGF.β1组在细胞培养液中分别添加10μg/L TGF.β1,然后分别添加不同质量浓度的HGF(25、50、100、200μg/L),采用甲基偶氮四唑(MTT)法检测波长560 nm处各组细胞的吸光度(A560);然后选用100μg/L的HGF进行干预,采用细胞免疫荧光染色技术检测人Tenon囊成纤维细胞中α.平滑肌肌动蛋白(α.SMA)的表达分布;采用Western blot法检测细胞中α.SMA蛋白的相对表达量.结果体外培养的人Tenon囊成纤维细胞呈长梭形,边界清楚,细胞中波形蛋白表达阳性并定位于细胞质.MTT检测显示空白对照组、TGF.β1处理组及HGF25μg/L+TGF.β1组、HGF50μg/L+TGF.β1组、HGF100μg/L+TGF.β1组、HGF200μg/L+TGF.β1组细胞的增生值分别为0.203±0.025、0.497±0.101、0.426±0.062、0.354±0.040、0.272±0.084和0.241±0.011,组间比较差异有统计学意义(F=9.210,P=0.003),TGF.β1处理组细胞增生值明显高于空白对照组,不同质量浓度HGF+TGF.β1组细胞增生值均明显低于TGF.β1处理组,差异均有统计学意义(均P<0.05).免疫荧光染色结果显示空白对照组细胞中未见α.SMA的表达,TGF.β1处理组及HGF100μg/L+TGF.β1组细胞的胞质中均可见α.SMA的表达,呈红色荧光,HGF100μg/L+TGF.β1组细胞中α.SMA表达荧光减弱,α.SMA表达细胞明显减少.TGF.β1处理组和HGF100μg/L+TGF.β1组细胞中α.SMA染色阳性细胞百分比分别为(60.0±4.7)%和(14.3±3.1)%,差异有统计学意义(t=19.856,P<0.001).Western blot检测显示空白对照组、TGF.β1处理组和HGF100μg/L+TGF.β1组细胞中α.SMA蛋白相对表达量分别为0.642±0.032、1.330±0.069和0.884±0.040,总体比较差异有统计学意义(F=13.370; 陈静王泳李东豪; 关键词：Α-平滑肌肌动蛋白培养细胞

A型肉毒素预防人瘢痕成纤维细胞增生机制的初步研究被引量：8: 2017年; 目的探究不同浓度A型肉毒素(BTX-A)对瘢痕成纤维细胞的影响,初步阐释BTX-A治疗瘢痕及预防术后瘢痕增生的相关分子作用机制。方法选取人瘢痕成纤维细胞,以不同浓度的BTX-A(0.01、0.10、1.00U/L及10.00U/L)作用24h后,激光共聚焦显微镜观察细胞黏附及骨架变化,并采用MTT及流式技术检测其增殖、凋亡及周期变化,同时采用实时荧光定量PCR(qRCR)及蛋白免疫印迹(Western blot)方法,探究TGF-β、基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-2及MMP-9基因及蛋白的表达变化。结果随着BTX-A剂量的升高,其细胞黏附数量及骨架荧光强度逐渐减弱;细胞增殖能力减弱且主要阻断在细胞G0/G1期;此外其凋亡也随着BTX-A剂量增大而逐渐增强。qPCR及Western blot结果显示,随着BTX-A剂量增大,MMP-1及MMP-2基因及蛋白均呈现高表达,而TGF-β及MMP-9呈现出低表达。结论 BTX-A通过阻断瘢痕细胞G0/G1期抑制其增殖,同时提高MMP-1及MMP-2的表达来减轻瘢痕形成,对瘢痕的治疗起着积极的作用。; 郝荣涛李宗超陈兴叶伟; 关键词：成纤维细胞分子机制

地塞米松对特发性眼眶炎性假瘤体外培养成纤维细胞增生的抑制及其机制被引量：5: 2015年; 背景特发性眼眶炎性假瘤（IOIP）是一种常见的眼眶疾病，病因和发病机制尚未完全阐明，以糖皮质激素为主的治疗效果欠佳。目的观察地塞米松对IOIP组织体外培养成纤维细胞的作用，探讨糖皮质激素在IOIP治疗中可能的作用机制。方法收集2011年11月至2012年1月在北京同仁医院眼科中心切取的6例6眼IOIP组织（IOIP组）和3例因泪腺脱垂行泪腺复位术患者的眶部结缔组织（对照组），采用组织块培养法对2种组织进行体外培养以获取眼眶成纤维细胞，对培养的细胞进行组织形态学观察，采用免疫组织化学法检测培养细胞表面生物标志物的表达；采用WST-8法观察2个组培养的成纤维细胞的增生情况，并绘制生长曲线。将培养的细胞接种至96孔板，将不同浓度地塞米松（O、1×10-3、1×10-4、1×10-5和1×10-6mol／L）加入培养板分别作用24、48和72h，采用WST-8法观察地塞米松对细胞增生的影响；采用ELISA法检测各组成纤维细胞中ICAM-1的相对表达量。结果IOIP组织和正常眼眶体外培养的成纤维细胞均呈长梭形，两端有较长突起；免疫细胞化学染色可见2种组织中培养的细胞中vimentin呈阳性表达，而desmin、S-100、细胞角蛋白（CK）均呈阴性表达。与正常眼眶组织培养的成纤维细胞相比，IOIP组织培养的细胞生长速度较快。随着地塞米松浓度的增加，成纤维细胞的增生值（A值）逐渐下降，0、1×10-3、1×10-4、1×10-6和1×10-6mol／L地塞米松组成纤维细胞增生值的总体比较差异有统计学意义（F浓度=36．27，P=0．00），随着地塞米松作用时间的延长，成纤维细胞增生值逐渐下降，总体比较差异有统计学意义（F时间=3．69，P=0．00）。无地塞米松培养组培养24、48和72h，成纤维细胞中比较ICAM-1表达量分别为0．298±0．008、0．312±0．003和0．319±0．011，表现为逐渐升高的趋势，而不同浓; 李静葛心马建民崔忆辛李金茹王霄娜; 关键词：地塞米松细胞间黏附分子-1

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