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一种慢病毒转染增强纳米颗粒及其制备方法与应用: 本发明公开了一种慢病毒转染增强纳米颗粒及其制备方法与应用，属于生物医学工程领域。本发明使用具有表面活性剂作用的带阴离子的大分子聚乙二醇和具有诱导细胞吞噬增强作用的带阳离子的小分子亚精胺作为制备慢病毒转染增强纳米颗粒的原材...; 王亚楠刘世岳葛少华张东姣于璐王婷

重组慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞与脱钙骨基质构建转基因组织工程材料: 2025年; 背景:缺损组织的修复重建受限于自体或异体可替代移植材料的来源问题而导致临床应用受限,转基因干细胞和组织工程材料研究开辟了新的治疗思路。目的:探究增强型绿色荧光蛋白重组慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞在体外的生物学特性以及与脱钙骨基质体外构建转基因组织工程材料的生物矿化特性。方法:细胞贴壁及密度离心法获得兔骨髓间充质干细胞,增强型绿色荧光蛋白重组慢病毒以感染复数为100转染第5代兔骨髓间充质干细胞,体外观察转染细胞与未转染细胞的增殖能力、细胞表型、细胞周期以及成骨诱导后碱性磷酸酶、Runx2、骨钙素表达的差异;增强型绿色荧光蛋白重组慢病毒转染骨髓间充质干细胞与脱钙骨基质在体外构建转基因组织工程材料,对其进行扫描电镜观察及元素能谱分析。结果与结论:增强型绿色荧光蛋白重组慢病毒成功转染骨髓间充质干细胞后,在转染24,48 h细胞增殖较未转染细胞缓慢(P <0.05);在转染72 h后,细胞表型未发生变异,细胞周期、细胞增殖能力以及成骨诱导后碱性磷酸酶、Runx2、骨钙素表达量与未转染细胞无明显差异(P> 0.05);增强型绿色荧光蛋白标记的骨髓间充质干细胞在脱钙骨基质支架上有较好的生物相容性,根据荧光表达强度推测目的基因在2周左右发挥最大生物学功能,且出现了钙磷矿化物沉积,体现出优越的生物矿化特性。; 宁寅宽刘林志周次腊隆宇斌; 关键词：重组慢病毒载体骨髓间充质干细胞基因治疗生物学特性

一种提高免疫细胞慢病毒转染效率的转染试剂及转染方法: 本发明公开了一种提高免疫细胞慢病毒转染效率的转染试剂及转染方法，涉及生物医药技术领域，所述转染试剂包括Vi rusHancer组合物，所述Vi rusHancer组合物包括鱼精蛋白和聚醚型非离子表面活性剂，所述鱼精蛋白和...; 陈正亮张照黄庭晖

Smad4慢病毒转染对万古霉素诱导的肾小管上皮细胞EMT的影响: 2024年; 目的:探究慢病毒介导过表达Smad4或沉默Smad4对万古霉素诱导的肾小管上皮细胞HK-2上皮间质转化(EMT)的影响。方法:设计并包装Smad4沉默或过表达的慢病毒,之后利用所获得的慢病毒瞬时转染HK-2,将HK-2细胞分为万古霉素组、空载体组(转染HBLV-GFP-PURO)、过表达Smad4组(转染HBLV-h-Smad4-GFP-PURO)、沉默Smad4组(转染HBLV-h-Smad4-shRNA-GFP-PURO),另取正常HK-2细胞作为对照组。比较五组细胞迁移能力、上清液中氧化应激指标(TGF-β_(1)、SOD、GSH、MDA)及Smad4、E-cadherin、FN、Vimentin蛋白表达水平。结果:与对照组相比,万古霉素组和空载体组HK-2细胞迁移能力、上清液TGF-β_(1)和MDA含量、Smad4、FN、Vimentin蛋白表达水平升高(P<0.05),SOD、GSH含量、E-cadherin蛋白表达水平降低(P<0.05)。过表达Smad4可提高HK-2细胞迁移能力和氧化应激反应,促进EMT(P<0.05);沉默Smad4可降低HK-2细胞迁移能力和氧化应激反应,抑制EMT(P<0.05)。结论:Smad4调控万古霉素诱导的HK-2细胞氧化应激反应和EMT。; 孟令强吴汉利; 关键词：SMAD4 万古霉素肾小管上皮细胞上皮间质转化

体外慢病毒转染甲状旁腺组织块的方法: 本发明涉及一种体外慢病毒转染甲状旁腺组织块的方法，是将分离出的大鼠甲状旁腺组织置于含有10%FBS的DMEM/F12培养基中，在培养基中加入慢病毒，先在32℃下200rpm平行旋转60min，再在37℃旋转培养箱中以60...; 申嫒文张倩陈靖

慢病毒转染类器官的方法与用途: 本申请提供了一种慢病毒转染类器官的方法与用途，通过改变培养条件，使用慢病毒转染前先通过孔径不小于70μm滤网控制类器官球大小尽量均一化，然后将细胞均匀铺于超低吸附培养板中，超低吸附细胞培养板可以让细胞自发形成均匀大小和形...; 余磊陈洁琳傅超群余建辉黄奕锟吴万军

BMP2重组慢病毒转染兔BMSCs后细胞矿化的实验研究: 2023年; 目的探讨骨形态发生蛋白2(BMP2)重组慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化后细胞矿化的能力。方法密度梯度离心及贴壁培养法获取第5代兔BMSCs,流式细胞仪检测细胞表面标记。将BMSCs分为空白对照组(未转染)、Lv-EGFP组[转染仅携带增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因的慢病毒]和Lv-BMP2/EGFP组(转染携带BMP2和EGFP基因的慢病毒)。免疫组织化学染色、RT-PCR、Western blot检测BMP2蛋白和基因表达情况;SP法检测Ⅰ型胶原蛋白表达;茜素红染色法检测矿化结节形成;于转染第7、14、21天检测细胞碱性磷酸酶(ALP)水平;通过扫描电镜和能谱分析进一步观测矿化结节表面微观形貌及其主要元素构成。结果流式细胞仪检测显示第5代BMSCs的细胞表面CD44、CD29表达呈阳性,CD45表达呈阴性;免疫组织化学染色、RT-PCR、Western blot显示Lv-BMP2/EGFP组较Lv-EGFP组及空白对照组能高效表达BMP2目的蛋白和基因,转染第7、14、21天ALP水平较其余2组升高,Ⅰ型胶原染色及茜素红染色均呈阳性,扫描电镜下见矿化结节散布于成骨方向分化的细胞中,细胞叠加生长,基质分泌旺盛,能谱分析显示其表面为钙、磷沉积物,其钙磷比值为1.52±0.13,发生了细胞矿化。结论BMP2重组慢病毒转染兔BMSCs能成功诱导其向成骨方向分化并发生细胞矿化。; 宁寅宽刘林志陈贤平; 关键词：转染生物矿化

BMP2重组慢病毒转染兔BMSCs黏附DBM支架的生物矿化研究被引量：1: 2023年; 目的探究BMP2重组慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)黏附脱钙骨(DBM)支架体外构建转基因组织工程骨的生物矿化能力。方法密度梯度离心及贴壁培养法获取第5代兔BMSCs,用BMP2重组慢病毒转染细胞,通过RT-PCR检测目的基因的表达,利用倒置荧光显微镜观察细胞在DBM支架上的生长情况,借助扫描电镜和能谱分析观测细胞在DBM支架上的表面微观形貌及生物矿化能力。结果BMP2重组慢病毒成功转染兔BMSCs,RT-PCR显示转染后细胞能高效表达BMP2目的基因,在倒置荧光显微镜下观察见转染后细胞黏附在DBM支架上呈满天星样,并沿DBM支架孔隙内壁贴壁叠加生长、分裂增殖,扫描电镜下见细胞填满整个DBM支架孔隙,分泌大量细胞外基质,并在DBM支架表面形成凹凸不平的光泽结晶矿化物,能谱分析显示其钙磷比(Ca/P)为1.89±0.31,与正常骨组织成分相近(P>0.05)。结论BMP2重组慢病毒转染兔BMSCs黏附DBM支架构建的转基因组织工程骨成功完成了生物矿化过程,体现出较好的生物矿化能力。; 宁寅宽刘林志陈贤平周次腊; 关键词：重组慢病毒载体骨形态发生蛋白生物矿化

一种辅助带有CAR的慢病毒转染原代NK细胞的试剂盒及其应用: 本发明提供一种辅助带有CAR的慢病毒转染原代NK细胞的试剂盒及其应用。该试剂盒包括第一助感染剂、第二助感染剂、第三助感染剂、第四助感染剂；第一助感染剂为：聚凝胺终浓度为8～100mg/mL的水溶液；第二助感染剂为：白介素...; 曾皓宇沈振波蒋碧愉卫佳琦杜越

一种慢病毒转染技术构建CD226分子高表达的THP-1细胞系的方法: 一种慢病毒转染技术构建高水平表达CD226分子的THP‑1细胞系的方法。CD226分子已经被证明在巨噬细胞功能调控中发挥重要作用，为了更好地观测CD226分子在人单核/巨噬细胞发挥功能中的作用，本发明采用慢病毒转染技术构...; 陈丽华唐康侯永利秦琪李娟姜媛刘睿言王亚珍郭紫婵

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