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LAMP技术用于感染性钉螺检测的价值及不足分析: 目的：研究和分析LAMP技术用于感染性钉螺检测的价值及不足.方法：于2023年5月-2024年4年使用系统抽样法、环境抽查法在我市采集60只活钉螺,以流行类型分类,其中山区A自然村、坝区B自然村各30只.先予以压碎镜检法...; 占王园; 关键词：感染性钉螺

基于重组酶聚合酶扩增技术的日本血吸虫感染性钉螺检测体系的建立与应用被引量：2: 2023年; 确定日本血吸虫感染性钉螺是进行日本血吸虫病疫情预警的重要依据.现有日本血吸虫感染性钉螺的检测方法存在费时费力、设备昂贵、操作复杂等局限,因此研发一种易于推广和使用的日本血吸虫感染性钉螺检测方法十分必要.设计和开发一套基于重组酶聚合酶扩增(RPA)技术的日本血吸虫感染性钉螺检测体系.该检测体系可以在恒温(39℃)条件下、快速(20 min内)检测出浓度仅为10^(3)copies/μL的目标基因;结合简单的钉螺基因组DNA提取方法,该体系可以方便、快捷地检测出1/20的日本血吸虫感染性钉螺(即20只阴性钉螺中混有1只日本血吸虫感染性钉螺).; 冯惊涛聂东宋周松辉柳勇波李广平; 关键词：日本血吸虫钉螺

武汉市汉南区血吸虫病传播阻断后检出感染性钉螺的应急处置被引量：7: 2023年; 目的分析武汉市汉南区通过环介导恒温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检出感染性钉螺疫情后的应急处置及远期干预效果,探讨LAMP技术在血吸虫病传播阻断区早期监测预警中的应用。方法对汉南区风险监测捡获钉螺进行解剖镜检和LAMP技术双检,鉴定钉螺血吸虫感染情况,对出现阳性钉螺的环境启动应急响应及强化干预,评估远期效果。结果2018年5月武汉市汉南区LAMP技术检出1管感染性钉螺,定位阳性螺点东庄村朱家汊,对其进行机械除障、杂物深坑填埋等工程灭螺,药物灭螺1.27万m^(2),钉螺死亡率80%以上;阳性螺点500 m内应急性查病未发现新发血检阳性人员,年底再对东庄村查病506人,间接红细胞凝集试验血吸虫感染筛查显示阳性人员30例,血阳率5.93%,未发现粪检阳性人员,血检阳性人员全部预防性服药;哨鼠、野粪监测结果均为阴性;开展健康教育,部署、刷新警示牌7份,发放宣传折页500份。针对阳性环境所在村进行了近3年强化干预与监测,阳性螺点钉螺密度由0.094只/框降至0.027只/框,东庄村人群血检阳性率由5.93%稳步降至3.74%。结论武汉市汉南区通过LAMP技术快速侦测到了镜检漏检的感染性钉螺,为阳性螺点的快速应急处置和消除创造了条件,提高了传播阻断区监测预警系统的敏感性。; 左玉婷徐明星罗华堂宋秀兰陈秋琴王浩周水茂; 关键词：血吸虫监测预警

一种感染性钉螺移动镜检查箱: 本实用新型涉及医用器具技术领域，特别涉及一种感染性钉螺移动镜检查箱，包括箱盖、箱体、拉杆和万向轮；所述箱盖铰接在箱体上，箱盖与箱体之间设置有锁扣，所述拉杆固定安装在箱体的内部的底部，且拉杆有穿出箱体的右侧的穿出部，所述箱...; 熊春蓉董萱姚韵怡

重组酶介导的核酸等温扩增荧光法检测日本血吸虫感染性钉螺的效能评价被引量：2: 2021年; 目的评价重组酶介导的核酸等温扩增(recombinase-aided amplification,RAA)荧光法检测日本血吸虫感染性钉螺的效能。方法采用群体法检测。每50只钉螺作为1个检测样本,阴性样本不含感染性钉螺,阳性样本含不同数量感染性钉螺。设置阴性样本10个和分别含有1、2、3只感染性钉螺的阳性样本各10个,40个样本随机分组后,以盲法经荧光RAA法检测,并以逸蚴法检测结果为金标准,计算荧光RAA法检测灵敏度、特异度、正确指数及符合率。设置阴性钉螺样本5个和分别含有1、2、3只感染性钉螺的阳性样本各5个,20个样本随机分组后,采用配对设计法对同一个样本以盲法分别经压碎镜检法和荧光RAA法进行检测并比较检测结果。结果荧光RAA法检测30个阳性样本,29个检测结果为阳性,灵敏度为96.67%;检测10个阴性样本,其中8个检测结果为阴性,特异度为80.00%;约登指数为0.77,同一样本重复检测10次符合率为100%。荧光RAA法与压碎镜检法检测感染性钉螺结果差异无统计学意义(χ^(2)=0,P>0.05),检测结果与实际符合率分别为95.00%(19/20)和90.00%(18/20)。结论荧光RAA法对日本血吸虫感染性钉螺具有良好检测效能,在日本血吸虫感染性钉螺筛查中具有一定应用前景。; 叶钰滢赵松刘燕红毕念念董萱熊春蓉朱宏儒唐凤王鑫瑶张键锋应清界杨坤; 关键词：日本血吸虫钉螺

血吸虫感染性钉螺检测方法及该方法所用的试剂盒和引物: 本发明涉及寄生虫病传播媒介检测领域，具体而言，涉及一种血吸虫感染性钉螺检测方法及该方法所用的试剂盒和引物。所述试剂盒包括权利要求2所述的LAMP引物组、反应混合液以及DNA聚合酶；所述反应混合液中含有羟基萘酚蓝作为指示剂...; 张洪英谢国祥杨佩才

浙江开化县应用LAMP技术检测感染性钉螺的效果分析: 2019年; 目的对环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术检测感染性钉螺的条件进行优化,并评估其在浙江开化县感染性钉螺检测的应用。方法优化LAMP反应条件,建立基于LAMP方法的血吸虫感染性钉螺的检测方法,并用于开化县的钉螺监测。对传统压碎镜检法与LAMP法进行比较。结果引物02-SjR28为最优引物、65℃为最优反应温度、7.8 mM为最优Mg2+浓度。LAMP技术检测结果与压碎镜检法鉴定结果完全相符;LAMP法与压碎镜检法相比,结果观察方便,定性可靠,大规模筛查快速,但存在费用高,少量钉螺检测试验耗时长,设备携带不方便,专业要求高,定量有缺陷等不足。结论开化县建立LAMP方法用于感染性钉螺的检测,是一种有效、能切实在防治工作中应用的血吸虫病防治检测手段,目前适用于大规模实验室筛查。; 卢美邹翔万圣杨瑞军杜海娟张剑锋; 关键词：日本血吸虫环介导等温扩增技术感染性钉螺

重组酶介导的核酸等温扩增荧光法快速检测日本血吸虫感染性钉螺被引量：24: 2019年; 目的建立重组酶介导的核酸等温扩增荧光(Recombinase aided amplification,RAA)法快速检测日本血吸虫感染性钉螺技术,并探索钉螺样品的最佳处理方式。方法将钉螺样本分成3组,每组均含7个亚组,其中6个亚组分别为50只阴性钉螺中混合1、2、3、4、5、10只日本血吸虫感染性钉螺,1个亚组为100只阴性钉螺中混合1只感染性钉螺。3组钉螺分别采用压碎去壳核酸试剂盒提取法、压碎去壳核酸粗提法和直接压碎带壳核酸粗提法进行处理,并分别进行荧光RAA与PCR法检测,对检测结果进行比较。结果建立了荧光RAA检测技术,工作温度为39℃,30 min内即可完成日本血吸虫感染性钉螺检测。钉螺群体样本采用压碎去壳核酸试剂盒提取法处理后,荧光RAA法最低可检测到100只阴性钉螺中混合1只感染性钉螺,PCR法最低可检测到50只阴性钉螺中混合1只感染性钉螺;采用压碎去壳核酸粗提法处理后,荧光RAA法最低可检测到100只阴性钉螺中混合1只感染性钉螺,PCR法最低可检测到50只阴性钉螺中混合3只感染性钉螺;采用直接压碎带壳核酸粗提法处理后,荧光RAA法最低可检出50只阴性钉螺中混合10只感染性钉螺,PCR法仅可检测出50只阴性钉螺中混合10只感染性钉螺。结论成功建立了钉螺群体样本中日本血吸虫感染性钉螺快速检测的荧光RAA法,该方法具有快速、灵敏、操作简便等特点;压碎去壳核酸粗提法为钉螺样品的最优处理方式。; 李婷刘燕红赵松熊春蓉董萱张键锋李伟应清界杨坤; 关键词：日本血吸虫钉螺荧光检测

重组酶介导核酸等温扩增荧光法用于日本血吸虫感染性钉螺早期检测的研究被引量：4: 2019年; 目的探索重组酶介导的核酸等温扩增(recombinase aided amplification,RAA)荧光法用于日本血吸虫感染性钉螺早期检测的可行性。方法用日本血吸虫毛蚴人工感染200只湖北钉螺,随机分为阳性对照组和实验组各100只,另取100只未感染钉螺作为阴性对照组。将阳性对照组钉螺饲养至70 d,通过逸蚴法观察感染情况并计算阳性率。实验组钉螺分别在3 h以及5、20、40、70 d随机取20只,压碎镜检,同时提取钉螺软体DNA,进行荧光RAA法检测,获得不同时间点的阳性率,并与阳性对照组相比较。通过二代测序法对RAA检测阳性的特异性扩增产物进行测序鉴定。结果毛蚴感染后3 h、5 d、20 d、40 d、70 d实验组钉螺RAA法检测阳性率分别为60%、60%、65%、60%、70%,压碎镜检的阳性率分别为0、0、0、15%、65%,除70 d外其余时间点两种检测方法的阳性率差异均有统计学(χ^2=17.14,χ^2=17.14,χ^220 d=19.26,χ^2=8.64,均P<0.01);各时间点间阳性率差异无统计学意义(χ^2=0.68,P>0.05),各时间点阳性率与阳性对照组阳性率64.6%比较差异均无统计学意义。RAA扩增产物经二代测序后与数据库比对,确认为血吸虫特异性基因片段。结论 RAA荧光法敏感、特异,可用于日本血吸虫感染性钉螺的早期检测。; 董萱熊春蓉李婷赵松张键锋李伟杨坤; 关键词：感染性钉螺核酸检测

血吸虫感染性钉螺检测方法及该方法所用的试剂盒和引物: 本发明涉及寄生虫病传播媒介检测领域，具体而言，涉及一种血吸虫感染性钉螺检测方法及该方法所用的试剂盒和引物。所述试剂盒包括权利要求2所述的LAMP引物组、反应混合液以及DNA聚合酶；所述反应混合液中含有羟基萘酚蓝作为指示剂...; 张洪英谢国祥杨佩才

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