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牛肠道病毒的分离鉴定及HLJ-3531株感染性分子克隆的建立: 牛肠道病毒属于小RNA病毒科肠道病毒属成员，为单股正链RNA病毒。病毒粒子无囊膜，为二十面体球形结构，粒子直径约为25～30nm，基因组长度约为7500bp。2011年第9次国际病毒分类委员会分类报告将牛肠道病毒分类为E...; 张海丽; 关键词：感染性克隆

鸭圆环病毒四川毒株的进化分析及感染性分子克隆的构建: 鸭圆环病毒(Duck circovirus,DuCV)是近年来新发现的水禽感染性病原，造成鸭生长迟缓，体重下降等症状。病毒主要侵染鸭淋巴器官，患鸭后会引发免疫抑制及可能的二次感染，对养殖业造成了较大的经济损失。因此，分析...; 张志龙; 关键词：鸭圆环病毒基因重组进化分析分子克隆

一种构建鸡贫血病毒感染性分子克隆的方法: 本发明公开了一种构建鸡贫血病毒感染性分子克隆的方法，包括以下步骤：用PCR法扩增鸡贫血病毒(chicken anemia virus，CAV)全长基因组DNA，将2个全长基因组顺向连接插入到pBluescript ∏ S...; 李秀梅

我国MSM人群HIV-1急性感染者中主要流行的CRF01-AE亚型毒株感染性分子克隆的构建及其生物学特性研究: 目的:　　男男性接触者(men who have sex with men，MSM)指与其他男性进行性行为的男性，包括同性恋，双性恋，异性恋和易性者。1981年，艾滋病首先在美国一组男同性恋者中被确认。MSM成为世界上第...; 代娣; 关键词：分子克隆急性感染男男性接触者致病机理

鸽源新城疫病毒JS/07/04/Pi株感染性分子克隆的构建及病毒拯救: 2012年; 参照GenBank上公布的鸽源Ⅵb亚型新城疫病毒JS/07/04/Pi株基因组全序列设计9对引物,RT-PCR扩增目的片段后,依次亚克隆至TVT7/R转录载体,成功构建出含JS/07/04/Pi株基因组全长cDNA的转录载体TVT/071204。然后将其与三个辅助表达质粒pCI-NP、pCI-P和pCI-L共转染BSR-T7/5细胞,60h后将转染细胞及其上清接种鸡胚,收集死亡鸡胚尿囊液进行HA与HI试验。结果显示死亡鸡胚尿囊液HA呈阳性,并能被ND阳性血清所抑制,表明该病毒已成功拯救,且拯救病毒rNDV/071204在细胞上的生长增殖能力同母本病毒相似。该病毒的成功拯救为鸽源Ⅵb亚型NDV感染的宿主特异性及鸽用ND新型疫苗的研究提供了理想的生物材料。; 朱艳梅胡增垒宋庆庆段志强顾敏胡顺林王晓泉刘秀梵; 关键词：新城疫病毒共转染

网状内皮组织增生症病毒LAMP检测方法及感染性分子克隆的建立: 网状内皮组织增生症(RE)是禽类一种重要的免疫抑制性和致瘤性疾病。近年来,国内外鸡群中REV流行逐渐严重。REV与马立克氏病病毒(MDV)、鸡贫血病毒(CAV)和J-亚群禽白血病病毒(ALV-J)几种免疫抑制性病毒的混合...; 邓小芸; 关键词：网状内皮组织增生症病毒多克隆抗体

猪源TTV:分子流行病学,全长序列分析及感染性分子克隆的构建: 输血传播病毒(Torque teno virus，TTV)是一种小的，无囊膜的，单股环状负链的DNA病毒，目前该病毒被归于圆环病毒科的指环病毒属。TTV是继甲、乙、丙、戊型肝炎病毒之后又发现的一种新型肝炎病毒。该病毒最早...; 王礞礞; 关键词：感染性克隆

鸡贫血病毒全长基因感染性分子克隆的构建: 2011年; PCR法扩增鸡贫血病毒全长基因组,将2个全长基因组顺向连接插入到pBluescriptΠSK(+)质粒载体中,获得Psk2CAV质粒并转染MDCC-MSB1细胞,盲传4代后,用间接免疫荧光抗体试验(IFA)能检测到特异性荧光。将Psk2CAV质粒DNA于腿部肌肉接种10羽1日龄CAV阴性SPF鸡。剖检结果显示,阳性对照组和Psk2CAV质粒组均有鸡只出现腿肌、胸肌轻微出血,胸腺出现萎缩或出血。组织病理学结果显示,阳性对照组和Psk2CAV质粒组胸腺小叶萎缩,出血、淤血,髓质部萎缩,淋巴细胞减少。通过PCR可以分别从体外感染MDCC-MSB1细胞和体内感染鸡只中扩增到病毒基因片段。本研究证明含有双拷贝CAV的重组质粒Psk2CAV在体内、外均具有感染性,能衍生出病毒,并产生符合自然感染CAV的大体病变和组织病理学变化。; 李秀梅江丽萍郭立力李颖朱雅宁石瑜杨爱华陈荣荣; 关键词：鸡贫血病毒聚合酶链反应感染性分子克隆转染

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株感染性分子克隆的建立及拯救病毒的鉴定被引量：5: 2011年; 为构建高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染性克隆,本实验根据 PRRSV HuN4 株基因组序列设计并合成 PRRSV 特异性引物,应用 RT-PCR 技术分6段扩增了 PRRS VHuN4 株全基因组 cDNA。将扩增的各个cDNA部分重叠片段分别克隆于 pBlueScriptⅡSK(+)载体中构建了感染性重组质粒 pHuN4。并在病毒 cDNA5'末端引入 sp6 启动子序列便于后期的体外转录获得病毒的转录本,在3'末段 Poly(A)尾引入 NotⅠ酶切位点用于线性化 pHuN4;此外,将 HuN4 基因组第14680位的A沉默突变为G产生一个 MluⅠ酶切位点作为鉴定拯救病毒的分子标记。pHuN4 通过酶切线性化后经体外转录及转染BHK细胞,并在 Marc-145 细胞中救获病毒。结果显示:救获的病毒能够在 Marc145 细胞引起明显的细胞病变;间接免疫荧光检测以及分子标记验证结果表明病毒拯救成功,而且拯救的病毒与亲本强毒生长曲线没有显著差异。利用拯救的第5代克隆病毒株对本动物进行致病性试验,结果显示实验猪在感染后第3d开始出现体温升高、厌食、消瘦等临床表现,发病率达100%,在感染后20d内陆续死亡,表明拯救的病毒保持了与亲本病毒株相一致的致病特征,以上研究证实我们成功的构建并获得 PRRSV 强毒 HuN4 株感染性克隆,为从基因水平上研究 PRRSV 的致病机制提供了技术平台。; 张善瑞周艳君朱建平童武姜一峰童光志; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性分子克隆

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HUN4株感染性分子克隆的建立及拯救病毒的鉴定: 为构建高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）感染性克隆，本实验根据PRRSV HUN4株基因组序列设计并合成PRRSV特异性引物，应用RT-PCR技术分6段扩增了PRRSV HUN4株全基因组CDNA。将扩增的各个...; 关键词：感染性分子克隆

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