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放线菌DNA-DNA微孔板杂交法优化及菌株HA11090和HA11110的鉴定: 放线菌是自然界分布最广泛的微生物类群之一,其丰富的物种多样性、复杂的形态分化和特异的代谢途径,成为人们关注的对象。DNA-DNA杂交是分析DNA同源性的一种有效手段,是在16S rRNA基因序列相似较高的情况下确定新种的...; 王英; 关键词：放线菌

微孔板杂交法对肾综合征出血热早期诊断的应用研究: 目的：探索建立一种敏感特异的早期诊断肾综合征出血热的检测方法。方法： 1.从河北省各医院采集临床诊断为肾综合征出血热病人的急性期血清，用间接免疫荧光法(IFA)检测血清中IgG抗体;2.用间接免疫荧...; 韩霞; 关键词：肾综合征出血热微孔板杂交法

PCR-反向微孔板杂交法检测医学真菌初步应用: 2007年; 目的通过建立PCR-反向微孔板杂交法鉴定临床常见的致病真菌，为临床治疗提供可靠依据。方法应用通用引物对真菌ERG11基因的保守序列进行扩增，扩增片段包被于微孔板中，再将真菌特异性引物与之杂交，经漂洗后显色，读取450nm处吸光度值判断结果。结果8种真菌特异性探针不与其他种的真菌、细菌和人类DNA分子杂交，而只和其对应的真菌DNA扩增产物反应，呈现阳性杂交结果。55例临床血液病、肿瘤等患者的血液、脑脊液及痰等标本分别用PCR一反向微孔板杂交法和真菌培养法（API20C）鉴定，2种方法的结果基本一致（阳性率分别为34．5％和30．9％）。结论PCR-反向微孔板杂交法可用于临床不同标本致病真菌的检测。; 郭梅肖林李秀全牟兆钦; 关键词：真菌 PCR

多重聚合酶链反应微孔板杂交法在性病病原体检测中的应用: 2007年; 目的探讨敏感、特异的同时能检测3种性病病原体的方法。方法采用3种不同的特异性引物与梅毒螺旋体(TP)、单纯疱疹病毒(HSV)和杜克雷杆菌(HD)DNA模板进行单一和多重聚合酶链反应(M-PCR)、微孔板杂交,用不同梯度的DNA模板及其它常见16种泌尿生殖道微生物标本验证其敏感性和特异性。结果3种不同的特异性引物在单一和M-PCR反应中均能特异地扩增,其扩增产物均能与相对应的特异探针杂交;单一和M-PCR微孔板杂交法均能检测出单个和3种病原体靶基因10个拷贝,而其它常见泌尿生殖道病原微生物交结果均为阴性。结论M-PCR微孔板杂交法能同时敏感、特异地检测TP、HSV和TP性病病原体。; 雍刚张燕飞廖巫山喻林冲杨曦夏仲楠谭俊杨建琼; 关键词：梅毒螺旋体单纯疱疹病毒

测定端粒酶活性的端粒重复扩增－微孔板杂交法: 本发明公开了一种测定端粒酶活性的端粒重复扩增-微孔板杂交法，依次包括样本处理、扩增、包被、变性、杂交与呈色等步骤，本发明用于端粒酶活性测定具有简便快速、成本低廉、重复性好，敏感度高等优点，尤其适用于判断良、恶性胸腹水。; 王惠民瞿晓慈张冬雷施健刘俊华杨振华

应用PCR-微孔板杂交法快速检测矽肺患者痰中结核分枝杆菌: 2002年; 矽肺患者是结核病的易感人群，结核能促使矽肺病变的进展，而矽肺也能影响结核产治疗效果并加剧其恶化，结核是矽肺患者最常见的并发症，也是矽肺患者主要的死亡原因之一。因此快速、早期诊断矽肺合并结核感染，对保护工人健康、降低矽肺患者的死亡率是十分必要的。; 韩吉平; 关键词：矽肺结核病多聚酶链反应技术结核分枝杆菌

端粒重复扩增-微孔板杂交法检测妇科肿瘤端粒酶活性的研究被引量：1: 2002年; 目的 :探讨妇科几种常见恶性肿瘤与端粒酶活性的关系。方法 :采用端粒重复扩增 (TRAP)扩增端粒酶产物 ,通过生物素 -亲和素将扩增产物结合于微孔板 ,并与荧光素 (FITC)标记的特异性探针杂交 ,经酶标抗荧光素抗体结合而显色。结果 :妇科恶性肿瘤端粒酶活性检出 2 5例 (89.3% ) ,而肿瘤边缘组织检出 14例 (5 0 .0 % ) ,正常对照组织检出 10例 (35 .7% )。恶性肿瘤端粒酶活性显著高于肿瘤远端组织和正常对照组织 (P<0 .0 5 )。结论 :端粒酶激活可能在妇科恶性肿瘤的发生、发展中起重要作用。 TRAP-微孔板杂交法是检测端粒酶活性灵敏而特异的一种方法。; 邱亚萍张冬雷; 关键词：妇科肿瘤端粒酶活性

半巢式聚合酶链反应-微孔板杂交法检测沙眼衣原体: 2002年; 目的　应用半巢式聚合酶链反应 -微孔板杂交法 (半巢式PCR -MPH)检测泌尿生殖道沙眼衣原体 (Ct)。方法　分别用质粒和主要外膜蛋白基因引物进行扩增。将下游引物用生物素标记 ,经半巢式PCR扩增Ct主要外膜蛋白基因后 ,扩增产物被包被有链霉亲和素的微孔板捕获 ,经碱变性后与标有荧光素的特异性探针进行杂交。然后通过辣根酶标记的抗荧光素抗体与杂交分子反应 ,经过酶底物显色 ,通过测定吸光度来判断结果。结果　主要外膜蛋白基因引物半巢式PCR较质粒引物PCR更敏感 ,比半巢式PCR产物酶切后电泳法高 1 0倍 ,半巢式PCR -MPH法特异性强。该法重复法好 ,批内CV值 <1 0 % ,批间CV值 <1 5 % ;该法在包被浓度为 4mg L、产物 1∶2 0稀释、与微孔板结合 2 0min后加入 1 0pmol mL探针杂交 3 0min ,用 1∶3 0 0 0稀释的酶显色条件下有最佳结果。结论　该法操作简便、敏感性和特异性均高 ,无放射性和EB染料污染 ,适于临床样本的常规检测。; 凌文利李欣欢张益康陈荣安; 关键词：沙眼衣原体限制性内切酶泌尿生殖道感染

端粒重复序列扩增法结合微孔板杂交法定量检测端粒酶活性被引量：3: 2001年; 目的探讨定量检测端粒酶活性的非放射性检测方法。方法将端粒重复序列扩增测定法（ＴＲＡＰ）与微孔板杂交相结合建立了非放射性检测方法，对３例正常肝组织和４例肝癌患者治疗前后的肝癌组织、瘤旁组织、肝癌凋亡组织进行检测。结果肝癌组织具有比较高的端粒酶活性，而正常肝组织和瘤旁组织无此酶活性，肝癌凋亡组织端粒酶活性显著降低。结论　该定量分析方法简单、灵敏、特异性强，可以比较准确地反映组织的端粒酶活性状态。; 温淑娟况二胜黄镇华; 关键词：端粒微孔板杂交末端转移酶

PCR-微孔板杂交法检测不同人群TTV DNA被引量：1: 2001年; 根据报道的TTV全序列设计引物和探针 ,建立PCR 微孔板杂交法 ,检测 81例正常人群、92例职业献血员 12 3例甲～庚型肝炎、32例非甲～庚型肝炎、48例原发性肝癌患者的TTVDNA。结果表明TTV在以上五种人群中的阳性率分别为 3.7%、4.3 %、2 1.1%、2 8.1%、5 2 .0 % ,前者与后三者比较有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,TTV合并HBV二重感染占重叠感染的 5 4.0 %。这揭示不同人群均存在TTV感染 ,正常人群和职业献血员存在健康携带状态 ,甲～庚型肝炎和非甲～庚肝炎病人为高危人群 ,TTV可与各型肝炎存在重叠感染 ,TTV除经血传播外 ,存在其它传播途径 ,TTV感染与ALT及TBIL的升高密切相关。; 郭乃洲王万相; 关键词：TTV TTVDNA 肝炎相关病毒

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