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版纳微型猪1型糖尿病模型的构建方法初探: 2024年; 目的构建1型糖尿病微型猪模型,并探索有效延长模型猪生存周期的术后护理方案。方法选取7头版纳微型猪进行胰腺切除手术。术后3~5 d通过补充葡萄糖、维生素及抗生素等方法帮助其恢复。每日早晚两次检测血糖、尿糖水平,据此调整胰岛素补充量。每日巡视模型猪并记录其饮食欲、精神状态、虚弱程度、皮肤破损情况、粪尿量等数据,每周称量体重,直至动物死亡。根据模型猪状态及时给予葡萄糖注射液和乳酸林格氏液等以补充营养并纠正电解质失衡。结果7头版纳微型猪在胰腺切除术后均表现为随机血糖浓度大于11.1 mmol/L,远超正常猪的平均血糖值(6.0 mmol/L),尿糖阳性,且其体重呈渐进性下降等典型的糖尿病临床表征,提示1型糖尿病模型构建成功。此外,存活时间超过8周的1型糖尿病猪还出现了渐进性被毛脱落及皮肤破溃的情况;在模型猪无法站立乃至无法自主进食时进行安乐死,并采集其肝脏、肾脏及皮肤等受累及的器官组织进行病理组织切片及HE染色,病理组织切片也可见长期高血糖导致的肝脏淤血、肝糖原大量蓄积、肝细胞气球样变和渐进性肝脏纤维化,肾小球淤血、肾小管上皮细胞空泡变性和蛋白尿,真皮层出现淤血、血管壁变薄以及不同程度的角化不全和角化不良等肝脏、肾脏及皮肤组织病变。本研究构建的版纳微型猪糖尿病模型平均生存期为44 d,最长可生存121 d。结论通过胰腺切除术可成功建立版纳微型猪的1型糖尿病模型,进一步通过术后精心护理可获得并发症明显的长期1型糖尿病微型猪模型,这为1型糖尿病治疗策略研究提供了稳定的大动物模型。; 刘凯胡毓琦耿亚田程文杰王晶魏太云赵红芳李加宇角德灵赵红业魏红江; 关键词：版纳微型猪胰腺切除术术后护理糖尿病并发症

一种在受精卵期导入特异mRNA制作GHR-KO微型猪的方法: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种在受精卵期导入特异mRNA制作GHR‑KO微型猪的方法。本发明利用显微注射方法在小型猪受精卵中导入靶向猪GHR第6外显子的gRNA及CRISPR/Cas9mRNA，再把注射成功的受精卵...; 李林李勇张兴举魏强

基于机器学习的版纳微型猪行为识别方法研究: 版纳微型猪作为一种有着重要生物医学与异种器官移植研究价值的纯种系近亲繁殖猪,其养殖模式及行为意义一直以来都受到科研人员的重点关注。但长久以来,版纳微型猪的生理状态监测与行为识别主要依靠人工巡检以及主观判断的传统模式。在版...; 张鸿宇; 关键词：版纳微型猪目标检测

版纳微型猪近交系用于镇痛类经皮吸收药物体外渗透性评价: 2023年; 【目的】通过比较版纳微型猪近交系皮肤(以下简称“猪皮肤”)和人皮肤的组织形态学以及镇痛类经皮吸收药物的体外渗透试验,验证猪皮肤在镇痛类经皮吸收药物评价方面的应用价值。【方法】通过HE染色、Masson染色、弹力纤维染色和透射电镜观察比较2种皮肤组织结构形态;选择水杨酸溶液、双氯酚酸二乙胺乳膏和利多卡因凝胶贴膏3种药物作为模型药物,通过Franz扩散池进行药物渗透试验,采用酶标仪和高效液相色谱仪检测透过皮肤的药物质量浓度。【结果】HE染色、Masson染色以及透射电镜结果显示:猪皮肤与人皮肤的分层和细胞构成相似,但是猪皮肤的表皮层极显著厚于人皮肤表皮层(P<0.01),人皮肤的真皮层极显著厚于猪皮肤真皮层(P<0.01)。版纳微型猪身体各部位皮肤从厚到薄依次是肩胛、臀部、背部和腹部。3种药物渗透的0~24 h内,大部分时间点3种药物透过猪皮肤和人皮肤的药物质量浓度均无显著差异(P>0.05)。【结论】猪皮肤和人皮肤组织结构相似,3种镇痛药物在2种皮肤中的渗透性相似,猪皮肤可用于镇痛类经皮吸收药物的体外渗透性评估。; 王晶史海琼程雯张大妹师亚玲高艺柴文英魏红江

版纳微型猪近交系肾脏同种异体移植及术后监测: 异种移植是目前器官移植基础研究的热点,2022年1月10日,马里兰大学医学院公布了世界首例活人成功植入基因编辑猪心脏的手术,为了追赶国外同行国内基因编辑猪的培育迫在眉睫。另外基因编辑猪的器官用于人体之前需动物实验验证,但...; 张滢; 关键词：同种异体肾移植免疫排斥术后监测

不同饲喂量对版纳微型猪近交系行为变化影响的研究: 小型猪在遗传育种、生长发育、疾病模型方面有着其他动物不能代替的优势,尤其是在生物医学研究和心血管系统研究中。但现阶段小型猪作为实验动物的饲养还没有统一标准,为防止小型猪因过度采食而出现体重过大的现象,许多研究通过限饲得到...; 史海琼; 关键词：饲喂量行为学实验动物

基于转录组测序分析SPACA1在版纳微型猪近交系睾丸中的表达及转录调控特征: 2023年; 旨在分析版纳微型猪近交系(Banna mini-pig inbred line,BMI)SPACA1基因的序列特征、生物学功能及在睾丸中的表达调控模式。选取4头成年BMI公猪的睾丸进行全转录组测序,获得SPACA1基因在睾丸中的表达丰度。采用RT-PCR技术克隆SPACA1的完整编码序列,分析SPACA1的序列、染色体定位、分子特征及相应蛋白的结构和功能。对SPACA1的相互作用蛋白进行GO、KEGG功能富集,并将获得的蛋白与转录组测序所获得的基因表达量进行关联分析。利用转录组测序数据构建SPACA1 mRNA与miRNA和lncRNA的ceRNA调控网络。SPACA1基因CDS区全长为888 bp(Genbank登录号:OK042308),具有2个跨膜螺旋结构,与SPACA3、SPACA4、HIPK4和CCDC62显著相关;SPACA1及其互作蛋白主要参与精子细胞发育、分化,精子活力、顶体反应和精子鞭毛形成等通路;SPACA1基因受6个miRNAs靶向调控。本研究报道了SPACA1的表达、分子结构、蛋白质功能、在睾丸中的和转录调控作用,为深入研究SPACA1基因在BMI受精以及顶体反应等重要生物学过程中的功能奠定基础。; 刘志朋张霞代红梅杨福华廖隽锐许静霍金龙

氯胺酮和丙泊酚对版纳微型猪近交系麻醉效果的观察: 2022年; 为了比较氯胺酮肌内注射和丙泊酚静脉注射对版纳微型猪近交系全身麻醉的效果,将30头8~15月龄、体重15~25 kg的版纳微型猪近交系随机分为两组,A组按每千克体重0.01 mg肌内注射氯胺酮,B组按每千克体重2.0 mg静脉注射丙泊酚;两组实验猪均在术前30 min肌注硫酸阿托品每千克体重0.01 mg,缓慢注入麻醉药后,很快进入麻醉状态,观察动物麻醉维持时间、镇痛效果、体温、呼吸频率和心率变化及术后苏醒情况。结果:A、B两个组的诱导期分别为(4.47±1.55)min和(0.87±0.14)min;维持期分别为(51.27±8.61)min和(35.87±5.08)min;苏醒期分别为(7.60±2.10)min和(4.67±1.23)min。两组实验猪的诱导期、维持期和苏醒期差异极显著(P<0.01);但两组间的体温、呼吸频率和心率差异不显著(P>0.05)。结论:丙泊酚麻醉的诱导时间短、起效快,恢复快速平稳,且无副作用,但丙泊酚静脉麻醉应根据手术过程中实验动物的反应情况适当调整丙泊酚追加量;氯胺酮的麻醉过程平稳,麻醉效果好,术后苏醒快,适合情况复杂且时间较长的手术,是一种适合版纳微型猪近交系手术的理想麻醉方法。; 赵丽琴; 关键词：氯胺酮丙泊酚麻醉

版纳微型猪近交系AURKC的分子特征及其在睾丸中的转录调控研究: 2022年; 为研究AURKC基因在版纳微型猪近交系(Banna mini-pig inbred line, BMI)精子发生中的功能特性及表达调控,本研究利用RNA-seq技术对BMI 12月龄成年公猪的睾丸进行全转录组测序;采用RT-PCR技术从BMI睾丸获得AURKC全长编码序列,并分析其分子结构、蛋白保守结构域及功能特性,构建多物种氨基酸序列进化树和蛋白互作网络图;利用睾丸全转录组测序数据,借助相关数据库,对AURKC基因进行功能注释,预测调控的ceRNA(competing endogenous RNA,竞争性内源RNA),并构建转录调控网络。结果表明:AURKC在BMI睾丸中原始平均表达量为721.25,其对应转录本ENSSSCT00000051895.2的平均表达量(TPM)值为18.37,该基因CDS长894 bp(GenBank登录号:OK042305),编码297个氨基酸,位于猪6号染色体,含7个外显子;氨基酸序列N端亲水,C端疏水,含269个氨基酸组成的结构域S_TKC,二级结构中无规则卷曲占比最大;进化分析表明,AURKC氨基酸序列在哺乳动物多物种间具有高度的保守性及进化同源性;蛋白互作网络分析发现AURKC与10个蛋白存在相互作用;功能注释发现AURKC涉及26个GO,包括11个生物学过程,9个分子功能,6个细胞组分;ceRNA网络分析表明AURKC受ssc-miR-28-3p、ssc-miR-202-3p、ssc-miR-1296-5p和ssc-miR-361-5p共4个miRNA靶向调控。本研究可为进一步深入研究AURKC基因在BMI精子发生中的功能及表达调控奠定基础。; 代红梅刘志朋张霞霍海龙王配赵筱霍金龙; 关键词：生物信息学分析功能注释调控网络

版纳微型猪近交系精子发生相关基因PHF7的分子特征及转录调控研究: 2022年; 【目的】获得版纳微型猪近交系(Banna mini-piginbredline,BMI)精子发生相关基因PHF7的分子特征,构建其转录调控网络。【方法】通过RNA-seq技术对BMI睾丸进行全转录组测序;利用RT-PCR技术从BMI睾丸分离PHF7全长编码序列并分析其分子特征和蛋白功能;进一步基于睾丸全转录组测序数据,借助相关数据库对PHF7基因进行功能注释,分析其与非编码RNA(miRNA和lnRNA)间的调控关系,并构建其转录调控网络。【结果】成功获得了BMI睾丸转录组数据;通过RT-PCR获得了BMI PHF7 CDS区全长1155 bp,编码384个氨基酸;生物信息分析表明该基因位于猪13号染色体,含11个外显子,PHF7蛋白包含由54个氨基酸组成的PHD锌指结构域和112个氨基酸组成的扩展PHD锌指结构域,无规则卷曲在二级结构中占比最高;进化分析表明,BMI PHF7氨基酸序列在哺乳动物中较为保守,与双峰驼和羊驼的亲缘关系最为接近;蛋白互作网络分析发现,BMI PHF7与10个蛋白存在相互作用;基因功能分析发现,PHF7主要参与金属离子结合过程;基因靶向作用分析发现,猪PHF7受ssc-miR-149、sscmiR-769-3p、ssc-miR-324、ssc-miR-296-3p、ssc-miR-133b、ssc-miR-7142-3p、ssc-miR-27b-3p、ssc-miR-193a-5p等8个miRNA的靶向调控。【结论】阐明了BMI PHF7基因的分子特征、蛋白质结构并构建了转录调控网络,为深入研究PHF7在BMI精子发生过程的功能奠定基础。; 刘志朋代红梅杨忠张霞霍海龙王配李卫真赵筱霍金龙; 关键词：睾丸精子发生功能注释调控网络

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