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- 车程川刘琪丁平平杨革刘金锋
- 半乳糖上调内皮细胞Siglec-9聚糖配体水平抑制巨噬细胞活性
- 2024年
- 目的探究半乳糖对人原代肺动脉内皮细胞上唾液酸特异性Ig样凝集素-9(sialic-acid-binding immunoglobulin-like lectin 9,Siglec-9)聚糖配体表达的影响及作用机制。方法采用流式细胞术确定内皮细胞表面Siglec-9聚糖配体的表达并鉴定该聚糖配体末端糖苷键类型;分别用左旋葡萄糖、葡萄糖、N-乙酰基葡萄糖、甘露糖、N-乙酰基甘露糖、半乳糖、唾液酸、蔗糖处理内皮细胞48 h,采用流式细胞术检测内皮细胞Siglec-9聚糖配体的表达;将内皮细胞分为对照组和半乳糖组(n=3),Western blot、流式细胞术、免疫荧光分析半乳糖对内皮细胞Siglec-9聚糖配体表达的影响;α2-3,6,8唾液酸酶处理内皮细胞后,Western blot检测半乳糖对内皮细胞Siglec-9聚糖配体恢复时间的影响;半乳糖处理内皮细胞后,Western blot检测分析细胞内唾液酸合成关键酶(GNE、NANS、NANP、CMAS、NPL以及ST3Gals)表达水平,并用RT-qPCR验证相关蛋白的mRNA表达;siRNA敲低NANP、CMAS及ST3Gal-Ⅲ,Western blot检测内皮细胞Siglec-9聚糖配体水平变化;巨噬细胞与内皮细胞共培养实验分析Siglec-9聚糖配体的增加对巨噬细胞的凋亡与吞噬能力的影响。结果内皮细胞上表达有Siglec-9聚糖配体且该配体为末端结构为α2-3连接的唾液酸糖蛋白;与对照组比较,半乳糖组内皮细胞上该聚糖配体表达水平显著增加(P<0.01),但半乳糖的添加对该配体的自我恢复时间无影响;与对照组比较,半乳糖处理的内皮细胞中NANP、CMAS、ST3Gal-Ⅲ表达水平升高(P<0.05,P<0.01),且RT-qPCR验证结果与其一致;抑制内皮细胞中NANP、CMAS、ST3Gal-Ⅲ的表达后,内皮细胞Siglec-9聚糖配体水平下降(P<0.01)。共培养实验中,与未处理组比较,半乳糖处理的内皮细胞促进巨噬细胞凋亡增加(P<0.01),并导致其吞噬能力减弱(P<0.05)。结论半乳糖通过NANP-CMAS-ST3Gal-Ⅲ通路上调内皮细胞上Siglec-9聚糖配体水平,从而抑制巨噬细胞�
- 吴妮婷摄渊婷刘红梅李瑾贾乙
- 关键词:半乳糖内皮细胞巨噬细胞
- lncRNA LINC00943通过调节TLR4/NF-κB通路对结核杆菌感染的巨噬细胞活性的机制研究
- 2024年
- 目的 探讨LINC00943在结核杆菌感染的巨噬细胞自噬中的作用。方法 收集活动性结核病(tuberculosis, TB)患者15例和健康志愿者15例的外周血样本。实时定量反转录聚合酶链式反应检测LINC00943的表达。免疫荧光和透射电子显微镜检测自噬。蛋白质免疫印迹法检测LC3-Ⅰ、 LC3-Ⅱ以及Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)通路相关蛋白的表达。细胞计数盒8(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡。结果 与健康对照组相比,TB患者的单核细胞凋亡减少、自噬增强。与健康对照的单核细胞相比,TB患者单核细胞中LINC00943、TLR4和MyD88的表达显著上调。结核病患者单核细胞中LINC00943的表达上调。过表达LINC00943可诱导巨噬细胞自噬。LINC00943通过调节TLR4/NF-κB通路调节巨噬细胞自噬。TLR4/NF-κB通路抑制剂处理可以逆转LINC00943对巨噬细胞自噬的促进作用。结论 LINC00943通过调节TLR4/NF-κB通路抑制结核病中的巨噬细胞自噬,这意味着治疗由结核分枝杆菌免疫逃逸引起的活动性肺结核发生的新策略。
- 金慧敏王欢
- 关键词:巨噬细胞结核分枝杆菌自噬
- 光照老化微塑料对巨噬细胞活性及吞噬功能的影响
- 张轩
- 结核分枝杆菌Rv3529c蛋白调控小鼠巨噬细胞活性的免疫学机制研究
- 目的:通过生物信息学软件预测结核分枝杆菌Rv3529c基因编码蛋白的结构和功能并对其进行原核表达。探究结核分枝杆菌Rv3529c重组蛋白体外对小鼠巨噬细胞活性调控的免疫学机制。为阐明结核分枝杆菌致病机制及靶向治疗结核病提...
- 陈瑞枫
- 关键词:结核分枝杆菌TOLL样受体生物信息学
- 羊肚菌发酵淫羊藿提取物在增强巨噬细胞活性以及抗肿瘤活性中的应用
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- 车程川刘琪丁平平杨革刘金锋
- 芍药苷通过调控巨噬细胞活性抗幽门螺杆菌作用及其机制研究被引量:1
- 2023年
- 背景幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)容易造成胃炎、胃溃疡等胃部疾病,目前有很多杀灭H.pylori的药物,多以西药为主,不宜长期服用,且易复发.中药灭菌副作用小,但是作用机制并不完全清楚.目的分析芍药苷(paeoniflorin,PF)通过调控巨噬细胞活性抗H.pylori作用及相关机制.方法选取昆明小鼠6只,新西兰家兔4只,制备含PF血清,提取小鼠腹腔巨噬细胞,含药血清作用于小鼠腹腔巨噬细胞,实验组加入5%含药血清,对照组加入无药血清,各组同时在加入H.pylori 11637,含药血清在作用6 h后收集细胞.ELISA法检测各组小鼠巨噬细胞的单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、白介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量,Western-Blot检测热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、Toll样受体2(toll-like receptor-2,TLR2)及Toll样受体4(toll-like receptor-4,TLR4)蛋白表达,荧光定量多聚合酶链式反应检测小鼠巨噬细胞HSP70 mRNA、TLR2 mRNA及TLR4 mRNA相对表达.结果对照组小鼠MCP-1、IL-1β及TNF-α含量较空白组升高,实验组小鼠MCP-1、IL-1β及TNF-α含量较对照组降低,差异均有统计学意义(P<0.05);对照组巨噬细胞iNOS、TLR4及TLR2蛋白表达较空白组升高;实验组巨噬细胞iNOS、TLR4及TLR2蛋白表达较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05);对照组小鼠巨噬细胞TLR4、TLR2 mRNA相对表达量较空白组升高,实验组小鼠巨噬细胞TLR4、TLR2 mRNA相对表达量较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05);对照组小鼠巨噬细胞HSP70 mRNA及蛋白表达较空白组升高,实验组小鼠巨噬细胞HSP70 mRNA及蛋白表达较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论芍药苷经过调节巨噬细胞活性起到抗H.pylori感染作用,可抑制巨噬细胞分泌炎症因子与HSP70应激因子,其抗炎作用可能和抑制巨�
- 徐微徐建光何雪云林小花
- 关键词:巨噬细胞幽门螺杆菌感染芍药苷炎性因子
- 培美曲塞通过抑制M1型巨噬细胞活性减轻Con A诱导的小鼠肝损伤
- 鲍枳月
- miR-505通过靶向核因子-κB调控脂多糖诱导的巨噬细胞活性研究
- 2023年
- 目的:探讨究微小RNA 505(miR-505)通过靶向调控核因子-κB(NF-κB)对小鼠巨噬细胞(RAW264.7)活性的影响。方法:通过生物信息学方法预测miR-505和NF-κB潜在的结合位点,扩增NF-κB基因的3’端非编码区,同时对结合位点进行突变,将野生型(WT)及突变型(MUT)序列克隆至pSicheck2载体中,进行双荧光素酶报告实验。利用Liposome 3000将miR-505 mimics及inhibitor转染至RAW264.7细胞中,逆转录聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot实验检测miR-505、NF-κB的表达。用脂多糖(LPS)及miR-505共处理RAW264.7细胞,采用CCK-8实验检测细胞的活力,ELISA检测炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的表达。结果:双荧光素酶结果表明miR-505可与NF-κB的3’UTR端结合,且miR-505与NF-κB的表达呈负相关。CCK8结果提示miR-505可抑制LPS对RAW264.7细胞的毒性作用;ELISA结果表明miR-505可抑制LPS作用下炎症因子TNF-α和IL-6的分泌。结论:miR-505可通过靶向作用NF-κB基因以抑制TNF-α和IL-6的分泌,并降低LPS对RAW264.7细胞的损伤。
- 凌丽王钰莹曹其莉薄世兴张宗敏张云
- 关键词:核因子-ΚB巨噬细胞脂多糖
- 灵芝亲本及其杂交菌株液态发酵胞外多糖理化特征及刺激Dectin-1受体和巨噬细胞活性比较
- 2023年
- 在相同条件下分别液态发酵培养赤芝(Ganoderma lucidum)G0119、G0154及其杂交菌株GZ36,比较不同发酵时间(24、48、72、96 h)所得胞外多糖的含量、重均分子量分布特征、单糖组成特征和免疫活性差异。结果表明:3个菌株的胞外液在21~26、34~44 min时间段均出现2个峰(P1、P3),而GZ36在26~33 min时出现峰P 2。在实验范围内,随着发酵时间延长,3个菌株的不同组分含量均呈现增加趋势。发酵终点72 h的胞外多糖P1、P2、P3的重均分子量分别为5.193×10^(6)~8.957×10^(6)、4.437×10^(6)、6.033×10^(4)~8.148×10^(4)g·mol^(-1)。与60%乙醇沉淀组分(60 E)相比,3个菌株胞外多糖的20%乙醇沉淀(20 E)组分的产量较高。与亲本菌株G0119、G0154的20E组分相比,杂交菌株GZ36的20E组分产量(0.46 g·L^(-1))较高,其多糖含量(82.96%)也较高;3个菌株的60E组分相比,菌株GZ36、G0154的产量(0.13、0.14 g·L^(-1))较高,菌株GZ36的多糖含量(78.76%)较高。杂交菌株GZ 36胞外多糖20 E组分(主要由葡萄糖组成)和60 E组分(主要由木糖组成)在单糖组成和比例上更接近亲本菌株G0154。与阴性对照相比,3个菌株的胞外多糖20E组分均表现出刺激Dectin-1受体的活性;60E组分均具有诱导巨噬细胞释放NO的活性。与亲本菌株相比,在200μg·mL^(-1)时,杂交菌株GZ36的60 E组分活性较强。研究结果为了解灵芝亲本与杂交菌株胞外多糖的异同提供参考。
- 段语嫣冯杰唐传红刘利平谭贻周帅刘艳芳张劲松
- 关键词:灵芝胞外多糖液态发酵
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- 于春水

- 作品数:197被引量:783H指数:14
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- 李坤成

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- 张海琴

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- 供职机构:首都医科大学宣武医院
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