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口服尖吻蝮蛇毒降纤酶对大鼠纤维蛋白原的影响: 2024年; 目的:探讨尖吻蝮蛇毒降纤酶(DF)灌胃给药后在SD大鼠胃肠道内的分布情况及对血浆纤维蛋白原浓度的变化情况。方法:SD大鼠灌胃尖吻蝮蛇毒DF后观察大鼠体征,检测DF对大鼠的急性毒性作用;采用免疫组织化学法和酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测尖吻蝮蛇毒DF在大鼠胃肠道组织中的分布情况及其与大鼠纤维蛋白原的量效关系和时效关系。结果:灌胃尖吻蝮蛇毒DF(1000 U/kg)后大鼠未出现明显的中毒反应,DF口服毒性很低;大鼠灌胃DF 3 h后,DF主要存在于十二指肠、胃和空肠组织内;在量效关系实验中,大鼠灌胃DF(200 U/kg)后纤维蛋白原水平显著低于对照组(P<0.05);在时效关系实验中,灌胃第5、第6、第7天的纤维蛋白原水平显著低于对照组(P<0.05),并呈时间和剂量依赖关系。结论:口服尖吻蝮蛇毒DF可以通过胃肠道黏膜吸收进入胃、十二指肠、空肠组织内;口服适量DF可以有效降低大鼠体内的纤维蛋白原水平,连续给药效果更为显著。; 陶秀珍张学荣廖明李牡艳孔露平张昊罗小玲; 关键词：尖吻蝮蛇毒降纤酶纤维蛋白原口服给药

尖吻蝮蛇毒多组学分析及抗凝组分的分离纯化: 陈曹娟

基于抗原表位的抗尖吻蝮蛇毒磷脂酶A2抗体制备: 2024年; 为探究尖吻蝮(Deinagkistrodon acutus)蛇毒磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)的抗原表位并制备针对该酶的特异性抗体,通过IEDB-Bepipred 2.0在线服务器对PLA2的氨基酸序列进行线性B细胞抗原表位预测,确定抗原位点氨基酸序列,并将它们连接到表达载体pET-28a(+)中进行原核表达获得重组蛋白。将纯化后的重组蛋白用于小鼠(Mus musculus)免疫以制备针对尖吻蝮蛇PLA2的抗体。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)和蛋白质印迹法(Western blot)检测分析小鼠血清中的抗体情况,评价抗体对尖吻蝮蛇毒PLA2活性的抑制作用。成功预测了尖吻蝮蛇毒PLA2的6个抗原位点氨基酸序列,并表达了相应的重组蛋白,该蛋白的相对分子质量约为16.5 kDa。ELISA和Western blot检测分析结果表明小鼠血清对尖吻蝮蛇毒PLA2的抗体滴度高于1∶256,并且与尖吻蝮蛇毒中相对分子质量为14~16 kDa的PLA2蛋白产生强烈的结合反应。体外酶活测定实验结果表明10μL重组蛋白免疫血清使6μg尖吻蝮蛇毒PLA2活性由100%降低至62.2%。研究结果提示基于尖吻蝮蛇毒PLA2设计的抗原表位能够有效刺激小鼠产生免疫应答反应,并成功制备出可抑制尖吻蝮蛇毒PLA2活性的血清抗体。; 朱海婷李恒杨万舟张文浩余晓东和七一; 关键词：磷脂酶A2 尖吻蝮 B细胞抗原表位

尖吻蝮蛇毒研究进展: 2023年; 尖吻蝮(又名五步蛇,中药材名为蕲蛇)蛇毒,是从尖吻蝮毒腺中分泌的毒液,内含磷脂酶A_(2)、丝氨酸蛋白酶、金属蛋白酶、C型凝集素、L-氨基酸氧化酶等多种蛋白类成分和肽类成分,具有多种生物活性,在抗肿瘤、抗血栓、抗炎、抗菌等方面发挥着重要作用。近年来,蛇毒研究日益广泛,但目前仍缺乏对尖吻蝮蛇毒全面系统的研究。本文通过检索尖吻蝮蛇毒的相关研究进展,在其来源、鉴别、活性成分、毒性研究及质量研究等方面进行总结与分析,以期为尖吻蝮蛇毒进一步开发利用提供参考。; 杨晨张彬陈曹娟刘平安彭艳梅彭艳梅李跃辉; 关键词：尖吻蝮蛇毒活性成分毒性研究

尖吻蝮蛇毒通过PAR1上调CD62P表达促进大鼠血小板减少: 目的:通过干预尖吻蝮蛇毒中毒大鼠的蛋白酶活化受体1(Protease-activated receptor 1,PAR1),研究大鼠血小板计数、凝血功能、血小板PAR1含量、CD62P(Platelet P-select...; 陈萍; 关键词：尖吻蝮蛇毒血小板减少 PAR1 CD62P 凝血功能障碍

基于AutoDock Vina筛选徐长卿抑制尖吻蝮蛇毒金属蛋白酶有效组分的研究被引量：2: 2023年; 目的基于分子对接方法筛选徐长卿抑制尖吻蝮蛇毒金属蛋白酶的有效组分。方法使用AutoDock Vina软件对徐长卿[Cynanchum paniculatum(Bunge)Kitag]中化合物与尖吻蝮蛇(Deinagkistrodon acutus)蛇毒金属蛋白酶进行分子对接,采用ADMET对较高结合能组分进行毒性分析,筛选有效抑制组分。结果与阳性对照穿心莲内酯的对接结合能比较,从徐长卿中筛选出17种具有较高结合能的化合物。通过SwissADME预测毒性,确定10种潜在的无毒性化合物,分别为Cinatratoside B、Paniculatumoside D、Glacoside A、Cynapanoside A、Paeonolide、Paniculatumoside A、Cynatratoside A、Paniculatumoside B、GreenOil、1,6-Dimethylnaphthalene。结论基于AutoDock Vina虚拟筛选,从徐长卿中筛选出10种具有潜在抑制尖吻蝮蛇毒金属蛋白酶活性的化合物。; 陈千姿王晨黄旺香陈曦雅和七一余晓东; 关键词：尖吻蝮蛇蛇毒穿心莲内酯金属蛋白酶

鱼腥草地上部分和根部提取物抑制尖吻蝮蛇毒的比较被引量：2: 2022年; 研究鱼腥草Houttuynia cordata Thunb地上部分提取物和根部提取物对尖吻蝮Deinagkistrodon acutus蛇毒抑制作用。采用体外实验检测两种提取物对尖吻蝮蛇毒中主要酶类(蛋白水解酶、磷脂酶A2(PLA 2)、透明质酸酶等)的抑制作用;采用体内实验检测其对尖吻蝮蛇毒诱导体内毒性(出血、水肿、组织坏死和致死毒性)的抑制作用。鱼腥草地上部分提取物对尖吻蝮蛇毒蛋白水解酶、磷脂酶A2和透明质酸酶活性具有显著的抑制作用,同时能有效抑制促凝活性和纤维蛋白原水解活性;在体内,能够使尖吻蝮蛇毒引起的出血、水肿、组织坏死和致死毒性明显减弱。相比之下,鱼腥草根部提取物也表现出类似的抑制模式,但在相同浓度下其抑制效果均低于地上部分提取物。植物化学成分分析表明,两种提取物中均含有生物碱、蒽醌类物质和蛋白质;地上部分提取物中含有黄酮、多酚、单宁、三萜、甾醇和皂苷类物质,而根部提取物中缺少这些物质。实验结果首次验证了鱼腥草地上部分及根部对尖吻蝮蛇毒的抑制作用,并证实地上部分比根部在抑制毒液的主要酶类和体内毒性方面更为有效,表明鱼腥草地上部分可以作为一种潜在资源用于开发治疗毒蛇咬伤的解毒剂。; 陈峻波余晓东熊艳吴七云陈千姿和七一

3种固定化尖吻蝮蛇毒金属蛋白酶的比较: 2021年; 【目的】筛选出一种最优的固定化尖吻蝮(Deinagkistrodon acutus)蛇毒金属蛋白酶(Snake venom metalloproteinase,SVMP)的方法。【方法】采用D380大孔树脂、海藻酸钠-壳聚糖、溶胶-凝胶等3种载体固定化SVMP,用分光光度法检测固定化金属蛋白酶和游离金属蛋白酶的酶活性,计算它们的酶搭载率、酶活回收率,并检验它们的温度耐受性、pH耐受性和重复使用性,并由此筛选出最优固定化方法。【结果】溶胶-凝胶固定化酶、海藻酸钠-壳聚糖固定化酶和D380大孔树脂固定化酶的酶搭载率分别为91.47%,78.14%和49.44%;D380大孔树脂固定化酶、海藻酸钠-壳聚糖固定化酶和溶胶-凝胶固定化酶的酶活回收率分别为39.00%,39.53%和41.17%;重复使用4次后,溶胶-凝胶固定化酶的酶活回收率最高;溶胶-凝胶固定化酶pH耐受性最优,对温度的耐受性也最高。【结论】溶胶-凝胶固载体固定尖吻蝮蛇SVMP的效果最优。; 聂学奎和七一黄达春陈峻波余晓东; 关键词：固定化酶尖吻蝮

黑老虎醇提物对尖吻蝮蛇毒主要酶类的抑制作用被引量：1: 2020年; 【目的】探究中草药黑老虎(Kadsura coccinea)醇提物对尖吻蝮(Deinagkistrodon acutus)蛇毒中主要酶类的抑制作用。【方法】用体积分数为75%的乙醇溶液浸泡黑老虎后再进行超声波处理得到醇提物;通过体外酶活抑制实验分别检测醇提物对尖吻蝮蛇毒中磷脂酶A2、蛋白水解酶、透明质酸酶、类凝血酶的抑制作用。【结果】黑老虎醇提物对尖吻蝮蛇毒中的蛋白水解酶、磷脂酶A2和透明质酸酶具有明显的抑制作用。当蛇毒与醇提物的质量比分别为1∶100,1∶10和1∶5时,后者能抑制蛇毒中98%磷脂酶A2活性、79%蛋白水解酶活性和65.14%透明质酸酶活性。同时,醇提物能够明显抑制尖吻蝮蛇毒水解纤维蛋白原和类凝血酶的活性。【结论】研究结果证实了黑老虎醇提物能有效抑制尖吻蝮蛇毒中的主要酶类,为深入研究黑老虎药材的抗蛇毒机制提供了理论依据。; 黄达春和七一聂学奎陈峻波余晓东; 关键词：尖吻蝮蛋白水解酶磷脂酶A2 透明质酸酶类凝血酶

尖吻蝮蛇毒抑瘤组分Ⅰ体外抑制人口腔鳞癌HN6细胞作用的研究被引量：1: 2020年; 目的:研究尖吻蝮蛇毒抑瘤组分Ⅰ(AAVC-Ⅰ)对口腔鳞癌HN6细胞体外增殖、迁移和侵袭的影响。方法:体外培养口腔鳞癌HN6细胞,实验分为对照组和AAVC-Ⅰ实验组。实验组以0.1 mg/mL浓度的AAVC-Ⅰ处理,在不同时间段采用CCK8法检测AAVC-Ⅰ对HN6细胞的增值抑制作用;划痕实验检测细胞迁移情况,Transwell实验检测细胞侵袭情况。结果:与对照组相比,AAVC-Ⅰ实验组在24、48和96 h HN6细胞增殖均受到抑制;12、24 h划痕愈合百分比降低,肿瘤细胞的迁移能力受限,实验组侵袭细胞数目百分比小于对照组。结论:AAVC-Ⅰ对体外培养口腔鳞癌HN6细胞的增殖、迁移和侵袭具有抑制作用。; 刘方兴邓超祖璨璨柴琳; 关键词：凋亡

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