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- 一种基于Splint-PCR法检测C57BL/6J小鼠血清中反义寡核苷酸PS DNA的方法
- 本发明属于生物分析技术领域,具体涉及一种基于Splint‑PCR法检测C57BL/6J小鼠血清中反义寡核苷酸PS DNA的方法。本发明的方法包括如下步骤:向待检测样本中加入探针Probe A和探针Probe B,杂交;向...
- 赖力扈正桃薛爱琴
- 猪源奇异变形杆菌感染胃肠道后小鼠血清中细胞因子的动态变化
- 2025年
- 奇异变形杆菌(Proteus mirabilis,PM)是一种重要的食源性病原,经常导致人和动物发病,因此了解PM感染胃肠道后机体中细胞因子的变化情况对于制定有效的治疗措施具有重要意义。此项研究采用灌胃方式对小鼠进行攻毒,观察小鼠的临床症状和病理学变化,分别在感染后不同时间段采集小鼠血液,利用Bio-Plex悬液芯片检测系统对攻毒和对照组小鼠血清中的21种细胞因子进行定量检测和分析。攻毒结果显示,PM感染小鼠的胃肠道后,可导致小鼠的脾脏出血并显著肿大,在攻毒后24 h出现显著性差异(P=0.001 688),攻毒后96 h 2组小鼠间的脾指数差异最大(P=0.000 074)。细胞因子的检测结果显示,IL-2、IL-17A、KC、Eoatxin、MCP-1、RANTES、MIP-1α、MIP-1β、IFN-γ、G-CSF和IL-10的浓度在攻毒组中显著性增高,其中促炎因子IL-17A和G-CSF的含量变化最大,并与脾脏指数的变化趋势相同,均在攻毒后96 h达到峰值,质量浓度分别为(104.74±3.91)和(5 184.08±280.22) ng/L,是对照组的26.79和36.25倍。表明在PM感染胃肠道后,IL-17A和G-CSF在机体的促炎反应中发挥着重要的作用。
- 周杰付文贵郝成森李绍梅翟少钦翟少钦
- 关键词:奇异变形杆菌细胞因子脾脏小鼠
- 化瘀祛痰方通过影响动脉粥样硬化小鼠血清代谢产物调控PPAR通路抗动脉粥样硬化的机制
- 2025年
- 目的:探索化瘀祛痰方对动脉粥样硬化(AS)小鼠血清代谢产物的影响,并研究其通过调控PPAR通路抗AS的机制。方法:SPF级大鼠20只,其中10只化瘀祛痰方灌胃,10只0.9%氯化钠溶液灌胃,2次/d,第7次后,麻醉处死,腹主动脉取血,离心取上清液,高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(HPLC-Q-TOFMS/MS)法测定含药血清中的有效化合物;代谢组学检测,6只野生型C57BL/6J小鼠作为正常组,12只ApoE-/-小鼠随机分为模型组和化瘀祛痰方组,每组6只,其中模型组予0.9%氯化钠溶液灌胃,化瘀祛痰方组予化瘀祛痰方灌胃。取小鼠血清筛选差异性代谢物,分析相关代谢通路,进而采用实验进行验证。结果:化瘀祛痰方明显改善AS小鼠主动脉斑块脂质沉积情况,降低血脂水平,鉴定出抗AS的差异代谢产物4种。含药血清中抗AS有效化合物7种,减轻ox-LDL诱导的巨噬细胞泡沫化程度。与正常组比较,模型组NF-κB、TNF-α表达显著升高(P<0.01),用药后明显下降(P<0.05)。模型组Nrf2与Keap1融合程度下降,用药干预后升高,且Keap1表达明显下降;模型组HO-1荧光强度显著下降(P<0.01),用药后显著升高(P<0.01)。与正常组比较,模型组PPARα、PPARγmRNA显著下降(P<0.01),PPARβ/δmRNA显著升高(P<0.05);与模型组比较,化瘀祛痰方含药血清PPARα、PPARγ、PPARβ/δ mRNA均显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论:化瘀祛痰方可能通过影响AS小鼠代谢产物,进而调控PPAR通路,影响巨噬细胞炎症反应及氧化应激抗动脉粥样硬化。
- 李越潘嘉祥杨关林宫丽鸿吴希泽宋囡程美佳史宝瑞袁常斌闵冬雨贾连群
- 关键词:动脉粥样硬化代谢组学
- 黄芪赤风汤对脑缺血/再灌注损伤的神经保护作用及对小鼠血清中CRP、TNF-α、IL-18、IL-1β表达的影响
- 2025年
- 目的探索黄芪赤风汤对脑缺血/再灌注损伤的神经保护作用及对小鼠血清中炎症因子CRP、TNF-α、IL-18、IL-1β表达的影响。方法体外:将BV2细胞分为对照组、模型组及黄芪赤风汤低、中、高剂量组5组,构建氧糖剥夺/再复氧(OGD/R)模型,采用CCK-8法检测细胞的活性;体内:使用随机数字表的方法,将25只C57BL/6小鼠随机分配到以下5组:假手术组、模型组及低、中、高剂量的黄芪赤风汤组,构建大脑中动脉栓塞/再灌注(MCAO/R)模型,采用改良神经功能缺损评分(mNSS)对小鼠进行神经行为学评价,TTC染色估算小鼠脑组织梗死体积,HE和Nissl染色观察小鼠脑组织内神经元的变化,ELISA检测血清中CRP、TNF-α、IL-18、IL-1β的表达。结果体外:模型组BV2细胞存活率较对照组降低(P=0.0004<0.001);黄芪赤风汤低、中、高剂量组BV2细胞存活率均较模型组提高,以高剂量组最为明显,但差异无显著性(P=0.3459>0.05)。体内:模型组小鼠的mNSS评分较假手术组显著升高(P<0.0001),脑组织梗死体积明显增加(P=0.0002<0.001),脑组织梗死部位的神经元发生形态改变,部分神经元变性、坏死,伴有空泡形成,细胞核固缩、深染,胞质内尼氏体的数量减少且着色变浅,血清中的炎症因子CRP、TNF-α、IL-18、IL-1β的表达均明显增加(P<0.0001);黄芪赤风汤低、中、高剂量组的mNSS评分均较模型组有不同程度的降低,以黄芪赤风汤高剂量组最为明显(P=0.0002<0.001),且脑组织的梗死体积减少,尤其是高剂量组(P=0.0144<0.05),脑组织梗死部位的神经元病理形态得到改善,血清中CRP、TNF-α、IL-18、IL-1β表达水平降低,亦以高剂量组效果最佳(P=0.0001<0.001,P=0.0011<0.01,P<0.0001,P=0.0003<0.001)。结论黄芪赤风汤对脑缺血/再灌注损伤具有一定的神经保护作用,其作用机制可能与CRP、IL-18、IL-1β等炎症因子介导的神经炎症反应密切相关。
- 郑蕴慧陈小敏周小莉张健唐夏林丁砚兵
- 关键词:缺血性卒中黄芪赤风汤
- 耐碳青霉烯高毒力肺炎克雷伯菌血流感染小鼠血清蛋白组学分析
- 2025年
- 目的应用液相色谱-质谱仪(LC-MS)分析耐碳青霉烯高毒力肺炎克雷伯菌(CR-hvKP)血流感染小鼠的血清蛋白变化,寻找差异表达蛋白,并进行相应的生物学功能分析。方法建立ICR小鼠CR-hvKP及经典肺炎克雷伯菌(cKP)血流感染模型,收集感染12 h小鼠血清,进行LC-MS检测。采用Maxquant软件对LC-MS结果进行鉴定,并对差异蛋白进行相应的生物信息学分析。结果与正常对照组相比,CR-hvKP组分别有24个蛋白上调和20个蛋白下调。与cKP组相比,CR-hvKP组有107个蛋白上调。134个差异表达蛋白于Uniprot数据库逐一进行检索,发现这些蛋白参与生物调控、免疫过程、生物间相互作用、运动、代谢过程、对刺激的反应、信号转导、炎症反应、氧化应激、血管生成等过程。信号通路分析涉及补体和凝血级联、胆固醇代谢、细菌感染、血红素清除、血浆脂蛋白组装、重塑和清除等多条代谢相关通路。重点关注蛋白,其中激肽释放酶B1(KLKB1)及丝氨酸蛋白酶抑制剂家族A成员(Serpina)1b与正常组相比下调但与cKP组相比上调,淀粉样蛋白A(SAA)1、SAA2、泛酰巯乙胺酶3(VNN3)、血红蛋白β多肽链b2(HBB-b2)蛋白与cKP组及正常组相比均上调。结论CR-hvKP血流感染涉及多个蛋白的激活及作用,SAA1、SAA2、VNN3、HBB-b2升高或KLKB1、Serpina1b下降时或提示CR-hvKP血流感染。
- 鲍金凤麻雅婷徐茵何燕娟王玉月时洛洛王成彬
- 关键词:耐碳青霉烯液相色谱-质谱血流感染
- aGVHD小鼠血清损伤骨髓间充质干细胞成脂分化能力体外细胞模型的建立与应用
- 2025年
- 目的:借助急性移植物抗宿主病(aGVHD)模型小鼠血清,建立模拟aGVHD骨髓微环境损伤的体外细胞模型,并探究aGVHD小鼠血清对间充质干细胞(MSC)成脂分化能力的影响。方法:以6-8周龄C57BL/6N雌鼠和BALB/c雌鼠分别作为aGVHD模型的供鼠和受鼠。全身照射致死剂量(8.0 Gy,72.76 cGy/min)γ射线后4-6 h内,受鼠经尾静脉输注供鼠来源骨髓细胞(每只1×10^(7)),以建立骨髓移植(BMT)小鼠模型(20只);经尾静脉输注供鼠来源骨髓细胞(每只1×10^(7))及脾脏淋巴细胞(每只2×10^(6))混合液共0.4 ml,以建立aGVHD小鼠模型(20只)。于造模后d 7眼球取血后收集小鼠血清。分离1周龄C57BL/6N雄鼠骨髓来源MSC,分别在培养基中添加2%、5%和10%的BMT小鼠血清和aGVHD小鼠血清培养。通过油红O染色检测两组血清对小鼠MSC体外成脂分化能力的影响;Western blot检测相关蛋白PPARγ、CEBPα的表达水平;实时荧光定量PCR检测成脂关键转录因子PPARγ、CEBPα、FABP4和LPL的表达差异。结果:成功建立了模拟小鼠aGVHD骨髓微环境损伤的体外细胞模型。油红O染色结果表明,与BMT组相比,aGVHD组血清浓度为10%时,橘红色脂滴数目明显减少,MSC成脂分化能力受损;Western blot实验表明,MSC表达成脂相关蛋白PPARγ、CEBPα下调;进一步实时荧光定量PCR检测结果表明,MSC成脂关键转录因子PPARγ、CEBPα、FABP4和LPL生成显著减少。结论:aGVHD小鼠血清抑制MSC成脂分化能力。
- 许润香李佩霖田家仪汤杰尹博丰虞富豪王飞燕李晓彤张晓宇夏文戎朱恒丁丽
- 关键词:急性移植物抗宿主病骨髓微环境
- 一种高品质小鼠血清制备装置
- 一种高品质小鼠血清制备装置,包括第一过滤器和第二过滤器,第一过滤器底部与连通管的一端连通,连通管的另一端与第二过滤器一侧的顶部连通,连通管上设置转移泵和转移阀;第一过滤器顶部与血清粗品进管连通,第一过滤器内下部固定安装过...
- 苏少博李亚男黄钜壕
- 正常小鼠血清通过抑制focal adhesion信号通路减轻小鼠放射性肺炎
- 2024年
- 目的探讨正常小鼠血清(NMS)对放射性肺炎的治疗作用及可能机制。方法建立胸腔照射诱导的放射性肺炎模型,将小鼠分为对照组、静脉注射血清组、照射组和照射后静脉注射血清组。注射血清组小鼠在照射后立即静脉注射正常小鼠血清100μL,对照组小鼠注射100μL生理盐水,隔天注射1次,共注射8次。照射后15 d取材,HE染色检测肺组织形态学变化,ELISA检测小鼠肺组织和血清中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素-1α(IL-1α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;流式细胞术检测肺组织内淋巴细胞比例变化。外泌体miRNA高通量测序探索处理后小鼠的信号通路变化,qRT-PCR检测免疫相关基因的表达水平,使用Western blotting检测黏着斑通路talin-1、tensin 2、FAK、vinculin、α-actinin和paxillin蛋白的表达。结果与照射组相比,照射后注射血清组小鼠肺脏器系数、血清及肺组织上清液中炎症因子TNF-α、TGF-β、IL-1α、IL-6水平显著降低(P<0.05),CD45^(+)、CD4^(+)、T_(reg)淋巴细胞在小鼠肺组织中的浸润程度显著下降(P<0.05);肺中Egfr和Pik3cd的mRNA和蛋白表达水平显著下调,talin-1、tensin 2、FAK、vinculin、α-actinin和paxillin蛋白的表达水平也显著降低(P<0.05)。结论正常小鼠血清通过抑制focal adhesion信号通路关键蛋白的表达减轻电离辐射诱发的小鼠放射性肺炎。
- 苑通郭玉莹张俊伶樊赛军
- 关键词:放射性肺炎外泌体
- 基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS技术的炒山楂、焦山楂小鼠血清药物化学比较研究
- 2024年
- 目的 利用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)分析技术,鉴定炒山楂、焦山楂组小鼠血清中药物化学的差异。方法 选取2023年12月—2024年2月成都中医药大学药学院共9只KM小鼠作为研究对象,根据随机数字表法分为空白组(n=3),炒山楂组(n=3),焦山楂组(n=3),其中炒山楂组、焦山楂组分别给予3 g/kg的炒山楂、焦山楂浸膏水溶液灌胃。使用Thermo Scientific AccucoreTM C18色谱柱,以0.1%甲酸水溶液(A)和0.1%甲酸乙腈溶液(B)作为流动相,梯度洗脱;质谱采用ESI源,+/-离子模式扫描,扫描模式为Full MS/dd-MS2。利用Compound Discoverer 3.3软件分析数据,根据一级质谱质荷比、二级质谱碎片等信息,鉴定样品化学成分,以及血清中的化学成分;同时利用SIMCA14.1,通过主成分分析法(principal component analysis, PCA)、正交偏最小二乘判别分析法(orthogonal partial least-squares discrimination analysis, OPLS-DA)进行模式识别筛选出其中差异性化学成分,结合统计学知识分析出炒山楂、焦山楂入血后的血液中相关化合物的变化差异。结果 经过对药品醇提物中化学成分的筛选,结合相关文献,在炒山楂、焦山楂中分别鉴定出了34、45个化学成分,包括有机酸类、氨基酸类、三萜类、酰胺类、黄酮类、苯丙素类、及其他类成分等。此外,通过SIMCA软件统计分析,在两组小鼠血清中共鉴定出14个显著差异性成分。结论 炒山楂、焦山楂中化学成分、对应含量差异,可能是两种炮制品功效差异性的影响因素之一。不同给药组小鼠的血清中鉴别出的差异性化学成分,为揭示两种炮制品功效性差异提供了参考依据。
- 谢康为席家庄邓放谢铌奇胡铁弋杨璐嘉
- 关键词:山楂血清药物化学
- 小鼠血清IgG冻干质控品开发的方法
- 本发明涉及一种小鼠血清IgG冻干质控品开发的方法,包括原料筛选,小鼠血清IgG的检测选择Elisa检测手段;溯源检测,小鼠血清IgG的检测选择某进口品牌成品试剂盒,质控品溯源至该试剂盒标准品;质控液配制:质控液稳定剂选择...
- 苏少博李亚男黄钜壕
相关作者
- 王刚

- 作品数:392被引量:28H指数:3
- 供职机构:江南大学
- 研究主题:发酵食品 植物乳杆菌 长双歧杆菌 肠道 鼠李糖乳杆菌
- 季宇彬

- 作品数:1,197被引量:4,327H指数:31
- 供职机构:国家教育部
- 研究主题:细胞凋亡 抗肿瘤 抗肿瘤作用 甲苯二异氰酸酯 羊栖菜多糖
- 王天成

- 作品数:73被引量:337H指数:11
- 供职机构:北京大学第三医院
- 研究主题:小鼠血清 小鼠 生化指标 血清生化指标 铬盐
- 贾光

- 作品数:198被引量:882H指数:15
- 供职机构:北京大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系
- 研究主题:纳米二氧化钛 纳米材料 职业卫生 生物标志物 小鼠
- 赵宇亮

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