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8-oxo-Guo调控小鼠细胞因子表达及肺泡巨噬细胞极化的研究
2025年
目的明确核酸氧化损伤代谢产物8-oxo-Guo对小鼠体内细胞因子产生及肺泡巨噬细胞极化的影响,探讨其在肺部免疫炎症中的潜在作用。方法选用10~12周龄C57BL/6N雄鼠,随机分为对照组和8-oxo-Guo组,每组6只。8-oxo-Guo组小鼠尾静脉注射8-oxo-Guo(溶于含10%小鼠血清的1×PBS中,剂量为4μg/kg),对照组注射等体积含10%小鼠血清的1×PBS。间隔2小时注射1次,共注射2次,4小时后收集小鼠肺泡灌洗液和血浆。然后采用RayBio■QAM-CAA-4000芯片检测200种血浆细胞因子浓度,通过流式细胞术检测肺泡巨噬细胞极化情况。使用SPSS 22.0软件进行数据分析,以未配对Student t检验分析两组间差异,P<0.05为有统计学意义。结果与对照组相比,8-oxo-Guo组小鼠血浆中IL-12 p70、MIP-2等多种细胞因子显著上调,IL-33显著下调;GO富集分析显示变化的细胞因子主要在免疫效应调节等功能方面富集且与细胞对脂多糖反应相似。肺泡巨噬细胞检测中,8-oxo-Guo组小鼠肺泡巨噬细胞CD86^(+)CD206^(-)细胞占比率及CD86^(+)荧光强度增加,表明8-oxo-Guo可以诱导肺泡巨噬细胞向M1型极化。结论本研究基于小鼠模型证明8-oxo-Guo引起小鼠血浆细胞因子产生上调和肺泡巨噬细胞的促炎型转换,提示8-oxo-Guo可能在肺部免疫炎症进程中起重要作用。
李瑞李瑾蔡剑平
一种小鼠细胞的分区培养装置
本发明属于细胞培养技术领域,尤其是一种小鼠细胞的分区培养装置,针对现有技术中在给多个培养皿进行滴加营养液的时候容易出现错误的问题,现提出以下方案,包括开口向下整体呈桶状结构的底座,所述底座的顶端靠近圆周边缘处开有多个向心...
吕昌莲毕卓然向书晗李婧铱
益肾通络方调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路改善糖尿病肾病小鼠细胞焦亡的机制研究
2025年
目的研究益肾通络方通过调控Toll样受体4(TLR4)/髓系分化初级反应蛋白质88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路,改善糖尿病肾病小鼠肾脏细胞焦亡的机制。方法采用随机数字表法将60只C57BL/6雄性小鼠分为对照组(10只)和干预组(50只),干预组采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射(50 mg/kg)构建糖尿病肾病小鼠模型。造模成功后,采用随机数字表法将干预组进一步分为模型组、司美格鲁肽组(40μg/kg)和益肾通络方高(15.6 g/kg)、中(7.8 g/kg)、低(3.9 g/kg)剂量组。益肾通络方高、中、低剂量组灌胃相应剂量药物,司美格鲁肽组皮下注射司美格鲁肽注射液,对照组和模型组灌胃蒸馏水,连续12周。每4周监测各组小鼠随机血糖、生化法测定24 h尿蛋白含量;治疗后,采用生化法测定血清肌酐、尿素氮含量;称量小鼠肾脏质量,计算肾脏系数;苏木素-伊红、过碘酸-希夫、过碘酸六胺银和马松染色观察肾脏组织病理变化;酶联免疫吸附测定法检测尿液中β2微球蛋白(β2-MG)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)和肾损伤分子-1(KIM-1)水平;蛋白质印迹法和实时荧光PCR法检测肾脏组织中核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3(NLRP3)、胱天蛋白酶-1(Caspase-1)、焦孔素D(GSDMD)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)蛋白和mRNA表达;免疫组织化学法检测肾脏组织中TLR4、MyD88、NF-κB阳性染色面积占比。结果与对照组比较,模型组小鼠随机血糖,24 h尿蛋白,血清肌酐、尿素氮含量及肾脏系数均升高,尿液β2-MG、NGAL、KIM-1水平升高,肾组织NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β和IL-18蛋白及mRNA表达升高,TLR4、MyD88、NF-κB蛋白阳性染色面积占比增多(P<0.05),肾组织可见肾小球肥大等病理改变。与模型组比较,益肾通络方高剂量组治疗12周后随机血糖降低(P<0.05);益肾通络方高、中剂量组小鼠24 h尿蛋白,血
张轶斐曹梓静张泽钰白雪慧唐靖怡席俊羽王嘉奕谢亦冉吴宇琪郭玺刘忠杰刘伟敬
关键词:糖尿病肾病益肾通络方小鼠
黄芪总皂苷对EAE小鼠细胞因子表达的影响
2025年
目的分析黄芪总皂苷对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠细胞因子表达的影响。方法于2021年10月—2022年5月选取研究所动物实验中心24只C57BL/6雌性小鼠,根据随机数字表法将其平均分为三组,EAE组注射磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline,PBS),低剂量组和高剂量组分别注射黄芪总皂苷溶液40 mg/(kg·d)和80 mg/(kg·d)。记录对比各组体质量、临床症状评分以及炎症因子和神经营养因子水平。结果免疫28 d时,低剂量组和高剂量组体质量均高出EAE组,且高剂量组高出低剂量组(P=0.042);免疫14 d和28 d时,低剂量组和高剂量组症状评分低于EAE组,且高剂量组低于低剂量组(P=0.026);免疫28 d后,AST治疗组白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)表达水平高出EAE组,白细胞介素1β(Interleukin-1 beta protein,IL-β)表达水平显著低于EAE组(P<0.001),AST治疗组的BDNF表达水平和GAP-43蛋白含量较EAE组显著上升(P<0.001)。结论黄芪总皂苷治疗能够减缓小鼠体质量下降情况和临床症状,且高剂量治疗效果更加显著,可能是由于其对细胞因子及神经组织生长情况起到调节作用。
王喜春马冲黄月萍吴春菊孙爽
关键词:黄芪总皂苷实验性自身免疫性脑脊髓炎细胞因子
基于P53/P21信号通路探讨培元益肾安胎方对高龄复发性流产小鼠细胞衰老及蜕膜化的影响
2025年
目的基于P53/P21信号通路观察培元益肾安胎方调控高龄复发性流产(RSA)小鼠细胞衰老及蜕膜化过程,探讨其治疗RSA的作用机制。方法将8~9月龄CBA/J雌鼠随机分为高龄模型组(生理盐水0.3 mL/d)、中药组(18.72 g/kg)和地屈孕酮组(2.6 mg/kg),6~8周龄CBA/J雌鼠为育龄空白组(生理盐水0.3 mL/d),每组5只,分别予相应药液灌胃2周后,将育龄空白组小鼠与BALB/c雄鼠合笼,其余各组与DBA/2雄鼠合笼,确认见栓后继续灌胃至妊娠第9日取材。观察小鼠胚胎丢失率,HE染色观察子宫蜕膜形态,免疫组化法检测蜕膜组织衰老相关蛋白P16^(INK4a)定位及表达,RT-PCR及Western blot检测蜕膜组织P53、P21、胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)、泌乳素(PRL)mRNA及蛋白表达。结果与育龄空白组比较,高龄模型组小鼠胚胎丢失率显著升高(P<0.05),子宫内膜形态不规则,细胞呈空泡状且腺体及血管数量减少,蜕膜组织P16^(INK4a)表达显著升高(P<0.05),P53、P21 mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05),IGFBP-1、PRL mRNA及蛋白表达显著下降(P<0.05);与高龄模型组比较,中药组和地屈孕酮组小鼠胚胎丢失率有下降趋势,蜕膜组织细胞排列较整齐,血管和腺体数量增加,蜕膜组织P16^(INK4a)表达显著降低(P<0.05),P53、P21 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05),IGFBP-1、PRL mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论培元益肾安胎方可能通过调控P53/P21信号通路改善高龄RSA模型小鼠子宫内膜基质细胞衰老状态,促进蜕膜化进程,从而发挥保胎作用。
舒畅刘雁峰闫菲邓楠金凡惠郭霖霖徐子涵
关键词:高龄复发性流产蜕膜化细胞衰老小鼠
护肝片对非酒精性脂肪性肝病小鼠细胞自噬、焦亡和PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响
2025年
目的探讨护肝片对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠的干预作用及对自噬、焦亡和PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响。方法C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、护肝片组(0.7 g/kg)和易善复组(0.23 g/kg),每组10只,采用高脂饮食喂养16周诱导NAFLD模型,第13周起,灌胃给予相应剂量药物,16周末处死小鼠,采集血清及肝脏组织样本。检测血清ALT、AST、TG、TC、LDL水平,肝组织TG、TC、NEFA、MDA水平和SOD、GSH-Px活性;ELISA法检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平;HE染色及油红O染色观察肝组织病理变化;Western blot法检测肝组织ACC、CPT1A、FAS、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR、P62、LC3、NLRP3、GSDMD、Caspase1蛋白表达。结果与模型组比较,护肝片组小鼠体质量、肝体比降低(P<0.01);血清ALT、AST、TG、TC、LDL、IL-6、IL-1β、TNF-α水平降低(P<0.05,P<0.01);肝组织TG、TC、NEFA、MDA水平升高(P<0.05),SOD、GSH-Px活性降低(P<0.05);肝组织中脂质沉积、气球样变等病理改变有所改善,NAS评分和油红O染色面积均降低(P<0.01);肝组织ACC1、FAS、NLRP3、Caspase1、GSDMD、P62、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),CPT1A、LC3蛋白表达升高(P<0.01)。结论护肝片可有效防治高脂饮食诱导小鼠NAFLD的形成,其机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路,促进肝细胞自噬,抑制细胞焦亡有关。
王瑞华黄兰蔚徐列明平键
关键词:护肝片非酒精性脂肪性肝病自噬
一种小鼠细胞、人源化小鼠及其构建方法和应用
本发明公开了一种TLR7‑IFN I信号通路活化的小鼠体内细胞,具有该细胞的人源化系统性红斑狼疮小鼠,该小鼠的构建方法及其在医学研究中的应用。具体地,通过施用TLR7激动剂瑞喹莫德活化细胞的TLR7‑IFN I信号通路,...
李颜朱茹洁任德善丁帅刘爽
一种小鼠细胞悬浮培养搅拌装置
本实用新型提供一种小鼠细胞悬浮培养搅拌装置,属于搅拌装置领域。包括转动放置在培养容器内的搅拌端子,搅拌端子自带磁性,托板拆卸的安装在底座上,培养容器放置在托板上,端子转动驱动源驱动搅拌端子转动,若干吸盘固定安装在底座的底...
朱伯成陈江华姜虹
慢病毒介导的强制泛素化HBcAg基因修饰小鼠髓源性树突状细胞源外泌体体内诱导小鼠细胞毒性T淋巴细胞反应
周雯雯
Apelin-13通过NLRP3/caspase-1/GSDMD通路抑制脑缺血再灌注损伤小鼠细胞焦亡被引量:1
2024年
目的:探究Apelin-13调节肽对脑缺血再灌注(I/R)损伤模型小鼠神经细胞焦亡的影响。方法:利用大脑中动脉栓塞再灌注法(MCAO/R)制备小鼠I/R损伤模型,氧糖剥夺/复氧(OGD/R)法制备HT22细胞损伤模型,同时给予Apelin-13处理。神经功能缺损评分评估小鼠神经功能;苏木精-伊红染色法(HE)和尼氏染色观察小鼠脑梗死区组织形态变化;2,3,5氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察脑梗死体积;Western Blot检测梗死区脑组织或者HT22细胞中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)、胱天蛋白酶1(caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素18(IL-18)等分子的表达;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠血清及培养上清中IL-1β和IL-18的水平;用CCK-8试剂盒和乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒分别检测HT22细胞活性和细胞损伤;caspase-1活性检测试剂盒检测HT22细胞中caspase-1的活性;免疫荧光染色观察HT22细胞中caspase-1和GSDMD表达。结果:Apelin-13可显著改善I/R小鼠神经功能和脑梗死体积,减轻梗死区病理损伤。同时降低血清中IL-1β和IL-18的水平。此外,Apelin-13可降低小鼠脑梗死区NLRP3、GSDMD、caspase-1、IL-1β、IL-18等分子的表达。体外实验表明Apelin-13可显著增加OGD/R处理的HT22细胞活力,降低caspase-1活性,并减少LDH含量,同时降低OGD/R处理的HT22细胞中NLRP3、GSDMD、caspase-1、IL-1β、IL-18等分子的表达。结论:Apelin-13可通过NLRP3/caspase-1/GSDMD通路抑制脑缺血再灌注损伤小鼠细胞焦亡,进而发挥神经保护作用。
马雅萍马昌盛韩博白敏孟姝辰段梦圆贺茂涛
关键词:APELIN-13NLRP3小鼠

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王正国
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