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家蝇幼虫抗菌肽对人肝癌多药耐药细胞Bel-7402/ADM的影响: 目的:阿霉素诱导建立人肝癌多药耐药细胞系,检测家蝇幼虫抗菌肽对耐药细胞的抑制作用,探究抗菌肽对肝癌细胞耐药性的逆转作用及机制。方法:1.采用阿霉素小剂量持续培养、浓度梯度递增法建立人肝癌耐药细胞系。2.培养细胞,绘制细胞...; 郭姗; 关键词：抗菌肽多药耐药 P-糖蛋白逆转; 文献传递

家蝇幼虫抗菌肽对肝癌HepG2细胞增殖及凋亡作用的研究: 目的：　　比较家蝇幼虫、家蝇幼虫抗菌肽纯化物I1、I2、I3、I4及其粗提物对肝癌HepG2细胞增殖的影响，选择对HepG2细胞抑制作用最强的组分进行体外抗肿瘤实验，并探索其可能的抗肿瘤机制。　　方法：　　1.采用MTT...; 邢佳欣; 关键词：肝癌家蝇幼虫抗菌肽 HEPG2细胞增殖抑制

家蝇幼虫抗菌肽粗提物对人肝癌HepG2细胞凋亡、钙离子浓度及线粒体膜电位变化的影响被引量：3: 2017年; 本文从肿瘤细胞凋亡及作用机制的角度出发初步探讨了家蝇幼虫抗菌肽粗提物对人肝癌HepG2细胞的影响。采用Hoechst33258荧光染色法在荧光显微镜下观察家蝇抗菌肽对HepG2细胞形态学的影响。并通过流式细胞术分别观察家蝇抗菌肽粗提物对HepG2细胞凋亡、钙离子浓度及线粒体膜电位变化的影响。Hoechst33258荧光染色法结果显示家蝇抗菌肽粗提物作用于HepG2细胞48h后能够引起细胞核发生核凝聚、染色质趋边化、核碎裂等凋亡形态学的改变；流式细胞仪检测结果显示家蝇抗菌肽粗提物能够诱导HepG2细胞发生凋亡、线粒体膜电位下降、细胞内钙离子浓度增加的现象。因此，我们推测家蝇抗菌肽可能通过增加HepG2细胞内钙离子，降低线粒体膜电位，进而诱导细胞凋亡的发生。; 邢佳欣郭姗赵瑞君朱爱玉刘娟娟; 关键词：家蝇幼虫肝癌HEPG2细胞

肝癌耐药细胞株Bel-7402/ADM的建立以及家蝇幼虫抗菌肽对其耐药性逆转作用的研究被引量：2: 2017年; 本研究通过建立人肝癌多药耐药细胞系,研究家蝇抗菌肽对该耐药细胞耐药性的逆转作用。采用阿霉素浓度梯度递增体外诱导法建立人肝癌耐药细胞株Bel-7402/ADM;采用MTT法检测阿霉素、顺铂、吉西他滨以及抗菌肽对细胞的毒性作用,并计算Bel-7402/ADM细胞对阿霉素、顺铂、吉西他滨耐药指数(RI);荧光显微镜观察细胞内阿霉素的荧光强度;采用流式细胞术检测细胞周期及细胞表面P-糖蛋白的含量。细胞毒性检测结果显示Bel-7402/ADM对阿霉素、顺铂和吉西他滨耐药指数分别为10.96、1.74和8.14,周期分析结果显示Bel-7402/ADM细胞的细胞周期较Bel-7402细胞发生改变:G0/G1期细胞比例明显升高,S期的细胞比例下降,荧光显微镜观察Bel-7402/ADM细胞内阿霉素量明显低于Bel-7402细胞,流式细胞术检测结果显示,Bel-7402/ADM细胞表面P-gp含量明显高于Bel-7402细胞,表明建成的Bel-7402/ADM细胞对多种药物耐药。抗菌肽对细胞的毒性作用检测显示,抗菌肽对Bel-7402/ADM细胞抑制作用呈剂量依赖性,但耐药细胞对抗菌肽并无耐药性。小剂量(100 mg/m L)的抗菌肽作用后,Bel-7402/ADM细胞的耐药指数减小至7.1,荧显微镜观察Bel-7402/ADM细胞内阿霉素荧光强度增强,流式细胞术检测Bel-7402/ADM细胞表面P-gp表达降低。结果表明,抗菌肽有可能通过降低细胞表面P-gp的表达起到逆转Bel-7402/ADM细胞耐药性的作用。; 郭姗邢佳欣赵瑞君程璟侠; 关键词：抗菌肽肝癌多药耐药逆转 P-糖蛋白

家蝇幼虫抗菌肽对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭及迁移的影响？: 2016年; 为了更全面的探究家蝇抗菌肽的抗肿瘤作用，本文从肿瘤细胞增殖、侵袭、迁移的角度研究家蝇幼虫抗菌肽对肿瘤细胞的抑制作用。通过针刺诱导家蝇三龄幼虫、低温离心、固相萃取后冻干获取抗菌肽粗提物，将所获抗菌肽调整至不同浓度进行CCK8细胞增殖实验。并通过细胞划痕实验和细胞侵袭实验判断家蝇抗菌肽对肝癌HepG2细胞迁移和侵袭的影响。实验结果显示家蝇抗菌肽能够明显抑制肝癌HepG2细胞的增殖，且作用效果与浓度呈剂量依赖特点。低浓度的抗菌肽（60μg／mL）能有效抑制肝癌HepG2细胞迁移及侵袭。; 邢佳欣刘娟娟聂守民郭姗赵瑞君程璨侠; 关键词：家蝇幼虫抗菌肽肝癌HEPG2细胞迁移

家蝇幼虫抗菌肽粗提物对原代FBL-3细胞增殖周期的影响被引量：2: 2015年; 为利用家蝇幼虫抗菌肽粗提物作用于原代FBL-3肿瘤细胞,探究其对原代FBL-3细胞周期的影响,本文通过构建小鼠肿瘤模型,获取原代FBL-3肿瘤细胞,之后用家蝇幼虫抗菌肽粗提物作用于该肿瘤细胞,运用流式细胞术检测每个实验组的细胞增殖周期的分布情况.经家蝇幼虫抗菌肽粗提物作用后的FBL-3原代肿瘤细胞,其细胞增殖周期发生了如下改变：G0/G1期细胞比例升高,S期细胞比例降低,细胞增殖指数降低,与对照组比较具有统计学意义.因此得出结论,家蝇幼虫抗菌肽粗提物可以通过阻滞原代FBL-3肿瘤细胞的增殖周期来诱导细胞凋亡.; 聂守民邢佳欣赵瑞君程璟侠刘娟娟; 关键词：家蝇幼虫细胞周期

家蝇幼虫抗菌肽作用于肿瘤细胞sup-b15的初步研究: 目的：　　利用家蝇幼虫抗菌肽针对急性淋巴细胞瘤sup-b15进行干预实验，并通过实验证明家蝇幼虫抗菌肽对肿瘤细胞sup-b15有抑制作用。研究内容由三部分组成：1.对比研究家蝇幼虫抗菌肽的分离纯化物与粗提物对sup-b1...; 王文健; 关键词：家蝇幼虫抗菌肽抑瘤作用分离纯化; 文献传递

探索家蝇幼虫抗菌肽粗提物抗FBL-3细胞的浓度和作用机制: 目的：　　1.本实验通过构建C57BL/6小鼠红白血病模型，得到更接近体内状态的原代FBL-3细胞，而众多肿瘤细胞实验均采用已传代的细胞株。红白血病动物模型构建的成功，是得到FBL-3原代细胞的重要前提。　　2.将家蝇幼...; 杜斌; 关键词：红白血病家蝇幼虫抗菌肽抑瘤作用细胞凋亡; 文献传递

家蝇幼虫抗菌肽defensin对食管癌细胞增殖、侵袭迁移的抑制作用研究: 目的：　　明确家蝇防御素成熟蛋白 MD对食管癌细胞的抑制作用以及其可能的作用机制。　　方法：　　1.将成功构建的 pGEX-6P-1/MD表达载体转化入大肠杆菌感受态细胞 BL21， IPTG诱导 MD蛋白表达，纯化目的...; 原发家; 关键词：食管癌细胞增殖抑瘤作用; 文献传递

一种新型家蝇幼虫抗菌肽基因(MDAP-2)的真核表达及抑菌活性检测被引量：1: 2015年; 利用毕赤酵母表达系统表达新型家蝇抗菌肽MDAP-2基因(Musca domestica antimicrobial peptide,MDAP-2),为其作为新型抗菌物质应用于临床提供实验依据。根据已有的MDAP-2的氨基酸序列,采用PCR技术扩增获得MDAP-2基因,构建真核重组表达质粒pPIC9K-MDAP-2,将线性化的重组质粒电击转入毕赤酵母(P.pastoris)感受态GS115细胞内,将PCR鉴定为阳性的重组酵母菌进行甲醇诱导表达,并采用Tricine-SDS-PGAE检测表达产物的大小,经镍柱亲和层析纯化获得纯度较高的重组蛋白,采用管碟法检测重组蛋白的生物学活性。结果显示,重组质粒pPIC9K-MDAP-2获得高效表达,蛋白分子量为7.8 kD,管碟法检测重组蛋白对大肠杆菌与沙门氏菌均具有体外抑菌活性。MDAP-2基因的成功表达为进一步研究表达产物的生物学及免疫学活性奠定基础。; 李文婷闫恕张丹丹贾博岩唐艳孔令聪裴志花刘树明马红霞; 关键词：分泌表达

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