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实验性自身免疫性葡萄膜炎小鼠发病中Tim-3的表达及其作用
2025年
目的探讨T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(Tim-3)在实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)发病中的表达和作用。方法选取4~5周龄雄C57BL/6J小鼠共12只;采用随机数字表法将12只小鼠分为对照组(3只)和实验组(9只)。对照组(造模时间节点为造模后0 d)不做任何处理,实验组小鼠诱导建立EAU模型(按造模时间节点分为造模后7 d、14 d、21 d三个小组,每组3只小鼠)。将光感受器间维生素A类结合蛋白651-670和完全弗氏佐剂充分混合乳化后,在实验组小鼠的双侧大腿、尾根部及颈后部皮下注射配制好的免疫乳剂(每只注射200μL免疫乳剂,含500μg光感受器间维生素A类结合蛋白651-670),随后实验组每只小鼠腹腔注射1μg百日咳毒素。通过裂隙灯显微镜观察各组小鼠眼前节及眼底表现并采集图像。根据炎症程度采用Caspi分级标准对小鼠行临床评分及组织病理学评分。ELISA法检测小鼠血清中IFN-γ、IL-17的表达;实时荧光定量PCR法检测小鼠脾脏及眼球组织中Tim-3 mRNA的表达;Western blot法检测Tim-3蛋白的表达;免疫组织化学法检测脾脏组织Tim-3蛋白的表达。采用Graphpad Prism 9.0统计软件进行数据分析。结果造模后小鼠的眼前节临床评分、眼底临床评分、组织病理学评分均随造模后时间的延长呈升高趋势,各组间的评分差异均有统计学意义(均为P<0.05)。造模后小鼠血清中IFN-γ、IL-17的表达量均随造模后时间的延长呈升高趋势,且各组间的差异均有统计学意义(均为P<0.05)。造模后小鼠脾脏与眼球组织中Tim-3 mRNA的相对表达量均随造模后时间的延长呈下降趋势,且各组间的差异均有统计学意义(均为P<0.05)。小鼠眼球和脾脏组织中Tim-3蛋白的表达情况和mRNA相同。结论Tim-3在EAU发病进程中的表达随着炎症的加重呈下调趋势,Tim-3在葡萄膜炎发病进程中可能发挥着负免疫调控作用。
吴雄飞张秋瑾郑柳杨彬彬李金清丁芝祥
关键词:实验性自身免疫性葡萄膜炎自身免疫性疾病TIM-3干扰素-Γ白细胞介素
基于生物信息学分析预测和验证实验性自身免疫性心肌炎的关键基因
2025年
目的:研究实验性自身免疫性心肌炎(EAM)的分子机制,确定EAM的新生物标记物和靶点,为心肌炎的诊断和治疗提供新的见解。方法:通过差异表达分析GEO数据库中EAM相关数据集GSE155423,筛选出差异表达基因(DEGs)。利用STRING数据库构建蛋白相互作用(PPI)网络。利用Cytohubba筛选出枢纽基因。利用支持向量机‑递归特征消除(SVM‑RFE)和随机森林(RF)机器学习算法筛选枢纽基因中的关键基因。最后,这些枢纽基因在脂多糖(LPS)诱导的心肌损伤模型中得到了进一步验证。结果:在GSE155423中确定9个枢纽基因。进一步发现了两个关键基因:Cxcl9和Cxcl10。通过实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应和蛋白质印迹分析验证了Cxcl10在LPS诱导的心肌损伤模型中的高表达。结论:Itgax、Ccl5、Cxcl10、I fng、Csf2、Cxcl9、Il6、Foxp3和Il1b与EAM的发生发展密切相关。Cxcl10基因可能是EAM发生机制中的一个关键靶点。
刘鑫朱浩彦吴嘉贺鲁志兵
关键词:实验性自身免疫性心肌炎生物标志物
白藜芦醇对实验性自身免疫性心肌炎大鼠心肌巨噬细胞极化及心肌炎损伤的影响
2025年
目的:探讨白藜芦醇(Res)对实验性自身免疫性心肌炎(EAM)大鼠心肌巨噬细胞极化及炎损伤的影响。方法:建立EAM大鼠模型,分为对照组、EAM组、Resveratrol组,通过免疫荧光、HE染色观察心肌组织巨噬细胞浸润程度并对心肌病理损伤进行评分;采用Realtime PCR检测巨噬细胞极化标记分子诱生型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶1(Arg1)及炎症因子白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达变化,Western blot检测NLRP3炎小体蛋白组分的表达变化。结果:EAM组大鼠心肌组织可见大量巨噬细胞浸润,伴有明显的心肌纤维断裂、溶解;IL-6、IL-1β、TNF-α、iNOS mRNA表达均较Control组显著增加(分别为P<0.05,P<0.05,P<0.01,P<0.01),而Arg1表达较Control组显著减少(P<0.05);Resveratrol可减少EAM大鼠心肌组织巨噬细胞浸润数量及心肌病理损伤积分(均P<0.05),减少IL-6、IL-1β、TNF-α、iNOS mRNA的表达(均P<0.05),增加Arg1的表达(P<0.01)。同时,与Control组比较,EAM大鼠心肌组织NLRP3和Caspase-p10、pro-Caspase-1及IL-1β蛋白表达明显升高(均P<0.05),Resveratrol可显著减少人NOD样受体家组蛋白3(NLRP3)、Caspase-p10、pro-Caspase-1及IL-1β蛋白表达,差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论:巨噬细胞浸润并向M1型极化参与EAM大鼠心肌炎损伤;Res可能通过抑制M1型巨噬细胞向M2型极化、NLRP3炎症小体激活及相关炎因子释放减轻EAM心肌损伤。
林琳樊刚李青朱文静薛嘉虹魏瑾
关键词:白藜芦醇实验性自身免疫性心肌炎心肌损伤
基于PI3K p85/AKT/GSK-3β通路探讨隔药饼灸对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠的调控机制
2025年
目的观察隔药饼灸对实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)大鼠甲状腺PI3K p85/AKT/GSK-3β通路的影响,探讨隔药饼灸干预实验性自身免疫性甲状腺炎的免疫调节机制。方法SD大鼠随机分为正常组、模型组、隔药饼灸组和西药组。采用抗原免疫联合碘剂诱导法制备实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠模型,在隔药饼灸组中,采用“大椎与命门”或“天突与关元”穴位交替干预的方式,西药组采用优甲乐溶液灌胃,均干预30 d。治疗结束后,通过HE染色对大鼠甲状腺组织的形态学特征进行观察;采用ELISA法检测大鼠血清甲状腺自身抗体TPOAb、TGAb的浓度,RT-qPCR法检测大鼠甲状腺组织IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-18、PI3K p85、pAKT、GSK-3β、β-catenin的mRNA表达,免疫组化法检测甲状腺组织PI3K p85、pAKT、GSK-3β、β-catenin蛋白表达。结果隔药饼灸和西药均能改善EAT大鼠甲状腺组织炎症损伤;隔药饼灸降低血清TPOAb、TGAb浓度;降低甲状腺组织IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-18 mRNA及PI3K p85、pAKT、GSK-3βmRNA和蛋白表达,升高β-catenin mRNA和蛋白表达。西药组降低IL-1βmRNA表达。结论隔药饼灸可能通过抑制PI3K p85/AKT/GSK-3β通路的异常激活,减少促炎症因子IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-18的表达,减轻甲状腺炎症反应。
崔云华崔云华陈珂旭陈子怡吴璐一吴璐一刘雅楠刘雅楠黄艳赵继梦吴焕淦
关键词:实验性自身免疫性甲状腺炎隔药饼灸
TLR4/NF-κB-NLRP3炎症小体信号通路在实验性自身免疫性前列腺炎大鼠中的作用机制
2025年
目的基于TLR4/NF-κB-NLRP3炎症小体信号通路探讨EAP大鼠发病机制。方法将12只SD雄大鼠数字表随机分为正常组(N)、模型组(M)、Caspase-1抑制剂组(Caspase-1)、NLRP3抑制剂MCC950组(NLRP3),每组3只。药物干预后,采用HE染色、ELISA、WB法等观察相关指标。结果与N组比较,M组大鼠前列腺腺体结构损伤明显,炎症细胞浸润。与M组比较,Caspase-1组、NLRP3组前列腺腺体结构损伤减轻。与N组比较,M组大鼠前列腺组织TLR4、P-NF-κB P65、NLRP3、ASC、Cleaced-Caspase-1、Cleaced-IL-1β、IL-18蛋白表达升高(P<0.01)。与M组比较,NLRP3组、Caspase-1组TLR4、P-NFκB P65、Cleaced-Caspase-1、NLRP3、ASC、Cleaced-IL-1β、IL-18蛋白表达降低(P<0.01)。与N组比较,M组大鼠血清炎症因子IL-1β、IL-6、IFN-γ、IL-8、IL-18、IL-17A、TNF-α水平升高(P<0.01);血清IL-10水平略低,无统计学意义。与M组比较,Caspase-1组、NLRP3组大鼠血清IL-1β、IL-6、IL-8、IL-17A、IL-18、IFN-γ、TNF-α水平显著下降(P<0.05或P<0.01);血清IL-10水平升高(P<0.01)。结论TLR4/NF-κB-NLRP3炎症小体信号通路激活后促进EAP大鼠前列腺炎症的发生发展。
陆良喜史宏黄志敏陆杰王文杰
关键词:慢性前列腺炎慢性盆腔疼痛综合征炎症因子
维生素D对实验性自身免疫性葡萄膜炎影响机制
2024年
目的探讨维生素D活形式1-25二羟维生素D_(3)[1,25-Dihydrovitamin D_(3),1,25(OH)2D_(3),VD]对实验性自身免疫性葡萄膜炎(Experimental autoimmune uveitis,EAU)的影响及其机制研究。方法选择6~8周龄,雌Lewis大鼠40只,随机数字表法分为5组:Control组和EAU组,EAU+VD 0.5μg/kg组、EAU+VD 1.0μg/kg组、EAU+VD 2.0μg/kg组,每组8只。Control组在大鼠躯干上皮下、后肢足垫及两侧腹壁各点一次注射200μL无菌磷酸盐缓冲液(phosphate buffer saline,PBS)。其余各组在相同位置一次注射200μL含有光感受器间维生素A结合蛋白(Interphotoreceptor binding protein,IRBP)、结核菌素(tuberculin,TB)、完全弗氏佐剂(CFA)和无菌磷酸盐缓冲液的乳糜液免疫诱导EAU。EAU+VD 0.5μg/kg组、EAU+VD 1.0μg/kg组、EAU+VD 2.0μg/kg组均在建模前3天分别给予VD 0.5μg/kg、1.0μg/kg、2.0μg/kg,1次/d灌胃给药,持续19 d。免疫后10 d、12 d、14 d分别在裂隙灯显微镜、眼科90D前置镜观察大鼠眼部前节及视网膜炎症表现;免疫后16 d处死大鼠,HE染色观察眼部组织病理变化;q-PCR检测TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-17、IL-23、CD80,CXCL9、CXCL10、CXCL11、CXCR3、CCL2、CCR2表达;Western Blot检测蛋白激酶B(Protein kinase,AKT)及磷酸化蛋白激酶B(Phosphorylated protein kinase B,p-AKT)表达。结果与EAU组相比,EAU+VD 2.0μg/kg组眼前节及眼部组织病理均表现轻度炎改变;与EAU组相比,EAU+VD 2.0μg/kg组TNF-α、IL-23、CXCL9、CXCL10及CXCR3 mRNA表达量降低(P<0.05);磷酸化AKT表达量明显降低(P<0.01)。结论VD 2.0μg/kg预防给药有可能通过干扰AKT磷酸化,抑制炎症相关因子表达,缓解实验性自身免疫性葡萄炎病情。
代海燕朱伟白宇希张书筠司子厚朱晓冬
关键词:自身免疫性葡萄膜炎维生素DAKT炎症因子
羟基红花黄色素A对实验性自身免疫性肝炎小鼠的保护作用被引量:1
2024年
目的 利用刀豆蛋白A(concanavalin A,Con A)诱导的肝损伤小鼠模型,研究羟基红花黄色素A(hydroxylsafflor yellow A,HSYA)对实验性自身免疫性肝炎小鼠的保护作用。方法 36只BALB/c小鼠随机分为6组,Sham组、Con A组、HSYA低剂量组(5 mg/kg)、HSYA中剂量组(10 mg/kg)、HSYA高剂量组(20 mg/kg)、Sham+HSYA高剂量组(20 mg/kg),每组小鼠各6只。将各组小鼠称质量并记录,通过腹腔注射给药的方式对其进行3 d HSYA预处理,处死小鼠前12 h,尾静脉注射Con A,制作实验性自身免疫性肝炎小鼠模型,最终以二氧化碳吸入法处死小鼠并取材备用。使用全自动生化分析仪检测各组小鼠血浆AST和ALT水平,并进行组间比较。肝组织进行苏木精-伊红染色,镜下观察肝脏组织学变化。应用ELISA检测血浆中TNF-α、 IL-17、IL-10水平。结果 Con A组小鼠体内TNF-α、 IL-17、IL-10水平(F=21.19、F=13.12、F=3.209,P均<0.05)及ALT、AST水平(F=274.33、F=214.91,P均<0.05)高于Shan组,并伴有肝细胞大片坏死。HSYA中剂量和HSYA高剂量组小鼠体内炎症因子水平及氨基转移酶水平低于ConA组,同时伴肝细胞坏死区域缩小。结论 Con A成功诱导小鼠肝组织损伤,HSYA对实验性自身免疫性肝炎小鼠具有保护作用。
彭雪莹王阳阳陈治张建光李慧张佳庆刘英华
关键词:羟基红花黄色素A刀豆蛋白A白细胞介素-17白细胞介素-10肿瘤坏死因子-Α
棕榈酸对实验性自身免疫性葡萄膜炎的作用及机制研究
研究背景:葡萄膜炎是一种严重威胁视力的眼部炎症疾病,可累及葡萄膜、视网膜、视网膜血管及玻璃体。葡萄膜炎既可仅局限于眼内,如交感眼炎、鸟枪弹样视网膜脉络膜病变等;也可作为全身疾病的眼部表现,如白塞病(BD)伴发葡萄膜...
冯晓洁
关键词:葡萄膜炎CD4+T细胞自身免疫
消退素D1对实验性自身免疫性肝炎小鼠的保护作用的研究
目的:本研究利用Con A诱导的肝损伤小鼠模型,以Rv D1预处理小鼠的方法,通过比较T细胞比例变化,AST、ALT、IL-17、IL-10的水平及镜下病理学变化,研究Rv D1对实验性自身免疫性肝炎小鼠的保护作用。方法...
李慧
关键词:刀豆蛋白ATH17细胞白细胞介素10白细胞介素17
Tim-3在实验性自身免疫性葡萄膜炎中的表达及作用研究
目的:研究T细胞免疫球蛋白粘蛋白分子-3(Tim-3)在实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)小鼠中表达的动态变化,并探讨其在EAU中的作用。方法:选取4-5周龄雄C57BL/6J小鼠共12只,将光感受器间视黄醇结合蛋白6...
吴雄飞
关键词:实验性自身免疫性葡萄膜炎自身免疫性疾病TIM-3

相关作者

马存根
作品数:319被引量:1,371H指数:17
供职机构:山西大同大学
研究主题:实验性自身免疫性脑脊髓炎 多发性硬化 EAE 小胶质细胞 法舒地尔
郑荣远
作品数:437被引量:1,478H指数:17
供职机构:温州医科大学
研究主题:实验性自身免疫性脑脊髓炎 EAE 左旋咪唑 实验性变态反应性脑脊髓炎 咪唑克生
尉杰忠
作品数:201被引量:903H指数:14
供职机构:山西大同大学
研究主题:实验性自身免疫性脑脊髓炎 小胶质细胞 多发性硬化 EAE 法舒地尔
毕宏生
作品数:859被引量:2,147H指数:18
供职机构:山东中医药大学附属眼科医院
研究主题:近视 葡萄膜炎 白内障 实验性自身免疫性葡萄膜炎 高度近视
肖保国
作品数:167被引量:578H指数:13
供职机构:复旦大学
研究主题:重症肌无力 实验性自身免疫性脑脊髓炎 帕金森病 小鼠 EAE