搜索到14652 篇“ 实时荧光定量聚合酶链反应 “的相关文章
多重实时 荧光 定量聚合酶链反应 对儿童社区获得性肺炎病原学的诊断价值 2025年 实时 荧光 定量聚合酶链反应 (qPCR)对儿童社区获得性肺炎(CAP)病原学的诊断价值。方法选取2024年1-6月来该院就诊的120例CAP患儿作为研究对象,收集所有研究对象一般资料,并采集痰标本、血清标本、咽拭子标本、肺泡灌洗液标本,分别进行痰培养、免疫荧光 、单重PCR、多重qPCR检测,比较不同检测方法病原学检测结果的差异。结果痰培养检测CAP患儿细菌阳性率为17.50%(21/120);免疫荧光 检测CAP患儿肺炎支原体阳性率为55.83%(67/120),肺炎衣原体阳性率为7.50%(9/120);单重PCR检测CAP患儿细菌阳性率为30.83%(37/120),肺炎支原体阳性率为64.17%(77/120),肺炎衣原体阳性率为10.83%(13/120);多重qPCR检测CAP患儿细菌阳性率为36.67%(44/120),肺炎支原体阳性率为65.83%(79/120),肺炎衣原体阳性率为10.83%(13/120)。多重qPCR检测CAP患儿细菌阳性率高于痰培养,差异有统计学意义(P<0.05);多重qPCR检测与免疫荧光 检测CAP患儿肺炎支原体和肺炎衣原体阳性率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);多重qPCR检测与单重PCR检测CAP患儿细菌、肺炎支原体和肺炎衣原体阳性率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。多重qPCR检测与痰培养、免疫荧光 、单重PCR检测阳性率均一致性良好(Kappa值>0.400,P<0.05)。结论多重qPCR对儿童CAP病原学诊断有积极意义,有较高的阳性率,有助于指导临床医生合理用药,且较单重PCR有更高的检测效率,有利于缩短临床诊疗流程。关键词：儿童 社区获得性肺炎 病原学诊断 痰培养 免疫荧光 实时 荧光 定量聚合酶链反应 对乙型肝炎病毒DNA的检验效果被引量：2 2023年 实时 荧光 定量聚合酶链反应 (PCR)对乙型肝炎(乙肝)患者进行乙肝病毒(HBV)DNA检验的效果。方法选择2020年9月—2022年10月在菏泽市第三人民医院进行健康体检的1000名受检者作为研究对象,其中500名纳入对照组,依托酶 联免疫吸附法(ELISA)法对HBV-DNA开展检测操作;其余500名纳入观察组,运用实时 荧光 定量 PCR法对HBV-DNA开展检测操作,比较两组HBV标志物[包括乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝炎e抗体(HBeAb)、乙肝核心抗体(HBcAb)]的检出率,分析不同阳性组合分布情况。结果观察组的HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb检出率均明显高于对照组(HBsAg:1.40%比0.20%,HBsAb:1.80%比0.40%,HBeAg:1.80%比0.20%,HBeAb:1.20%比0.00%,HBcAb:1.40%比0.00%,均P<0.05)。观察组的大三阳(HBsAg、HbeAg、HbcAb均阳性)、小三阳(HBsAg、HbeAb、HbcAb均阳性)检出率均明显高于对照组(大三阳:1.60%比0.20%,小三阳1.40%比0.20,均P<0.05)。对照组和观察组HBsAg及HBcAb均阳性、HBsAg及HBeAg均阳性、五项均阳性的检出率比较差异均无统计学意义(HBsAg及HBcAb均阳性:0.20%比0.20%,HBsAg及HBeAg均阳性:0.00%比0.20%,五项均阳性:0.20%比0.40%,均P>0.05)。结论应用实时 荧光 定量 PCR法开展对HBV-DNA的检测效果较为突出,有较高的准确度,与ELISA相比应用价值理想。关键词：乙型肝炎 酶联免疫吸附试验 实时荧光定量聚合酶链反应 乙型肝炎表面抗原 反转录酶 在微小RNA实时 荧光 定量聚合酶链反应 中的作用 2023年 实时 荧光 定量聚合酶链反应 (RT-qPCR)检测结果的关键点,并筛选出最优的检测方法。方法采用3种miRNA提取方法(分别使用EasyPure^(■)miRNA提取试剂盒、miRNA提取试剂盒、TransZol Up Plus RNA提取试剂盒)和3种反转录方法(分别使用TransScript^(■)第一链 cDNA反转录试剂盒、Evo M-MLV反转录试剂盒、miRNA第一链 cDNA合成试剂盒)处理大鼠纹状体脑区,检测miRNA与c DNA的质量和效率,并使用常规RT-qPCR检测miRNA水平,比较不同方法所得结果。结果3种RNA提取方法得到的miRNA质量和效率比较差异均有统计学意义,其中方法2的效果较好,但方法1、2、3的RT-qPCR结果比较差异无统计学意义(miR-132:25.91±9.79、25.26±10.25、27.28±7.39,miR-U6:27.98±11.25、25.98±9.78、29.62±9.65,均P>0.05);3种反转录方法所得实验结果比较差异有统计学意义,方法3所得结果明显低于方法1、方法2(miR-132:16.53±3.17比35.20±1.06、31.42±2.95,miR-U6:16.63±1.73比36.06±2.57、35.59±1.54,均P<0.05),主要影响RT-qPCR的扩增效率和扩增特异性。结论使用能高效富集约18 nt大小RNA的提取方法和在miRNA的3’末端加多聚A尾(Poly A)的反转录酶 ,可以得到更可靠的RT-qPCR结果。关键词：实时荧光定量聚合酶链反应 微小RNA 不同激素处理下番茄实时 荧光 定量聚合酶链反应 内参基因的筛选 被引量：1 2023年 实时 荧光 定量聚合酶链反应 (real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)进行扩增,利用geNorm、NormFinder和BestKeeper 3个软件分析EF1α、L33、Act、Ubi、GAPDH、UK、CAC、TIP41这8个番茄候选内参基因的表达稳定性。结果表明,8个候选内参基因的平均CT值为26~34。综合3个软件的分析结果发现,在ABA诱导下,番茄中较稳定表达的内参基因为L33和Ubi;在MeJA诱导下,番茄中较稳定表达的内参基因为L33和EF1α;在SA诱导下,番茄中较稳定表达的内参基因为EF1α和L33。综上所述,L33基因是番茄在不同激素诱导下表达最稳定的候选内参基因。本研究筛选的最稳定内参基因将为后续番茄响应外源激素处理的差异基因表达分析和分子机制研究提供校准依据。关键词：番茄 激素诱导 实时荧光定量聚合酶链反应 内参基因 鼠肺炎病毒实时 荧光 定量聚合酶链反应 方法的建立及其在新型冠状病毒感染模型用小鼠等动物检测中的应用 2023年 实时 荧光 定量聚合酶链反应 (real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,Q-PCR)检测方法,用于新型冠状病毒感染模型用小鼠等实验动物及其动物相关样本的检测。方法选择PVM G基因保守序列设计合成引物和探针,建立Q-PCR方法。并进行方法的线性、特异性、敏感性、重复性、稳定性和可信度验证。应用建立的方法对包括用于构建新型冠状病毒感染模型用hACE2等8个品系142只小鼠,及15只大鼠、5只沙鼠、4只黄鼠、63只裸鼹鼠和19只PVM感染小鼠的肺组织样本进行PVM检测。结果建立的方法与仙台病毒、呼肠孤病毒Ⅲ型、汉坦病毒、淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒无交叉反应 。方法的线性范围为1×10^(1)-1×10^(8)拷贝/μl,检测病毒质粒标准品灵敏度达101拷贝/μl;重复性、稳定性结果显示实验内和实验间平均变异系数均<5%。用建立的方法检测用于构建新型冠状病毒感染模型用hACE2等8个品系142只小鼠,及15只大鼠、5只沙鼠、4只黄鼠和63只裸鼹鼠,结果均为阴性;检测19只PVM感染小鼠肺组织样本,PVM阳性率为36.84%(7/19),与RT-PCR检测结果符合率为100%。结论建立的PVM Q-PCR方法特异性、敏感性,重复性、稳定性好,检测结果可靠,能够用于构建新型冠状病毒感染模型常用品系小鼠等实验动物的监测及其相关样本的检测。未发现用于构建新型冠状病毒感染模型常用品系小鼠携带PVM。关键词：实时荧光定量聚合酶链反应 新型冠状病毒 实验动物 动物模型 输尿管镜检查联合实时 荧光 定量聚合酶链反应 在不典型肾结核中的诊断价值 被引量：4 2022年 实时 荧光 定量聚合酶链反应 (FQ-PCR)的应用及其诊断价值。方法回顾性分析2015年7月至2020年7月河北省胸科医院收治的43例不典型肾结核且入院后确诊肾结核的患者的诊治资料,采用尿沉渣和肾盂尿液的抗酸染色、结核菌培养和FQ-PCR-结核菌脱氧核糖核酸(TB-DNA)三种检测方法,比较其肾结核检出率的差异,并行输尿管镜检观察和做组织活检。结果(1)同种标本:FQ-PCR-TB-DNA阳性检出率>结核菌培养>抗酸染色[尿沉渣,60.47%,20.93%,4.65%,P<0.01;肾盂尿液,93.02%,76.74%,41.86%,P<0.01]。(2)同种检测方法:肾盂尿液的阳性检出率>尿沉渣[抗酸染色法,41.86%vs 4.65%,P<0.01;结核菌培养法,76.74%vs 20.93%,P<0.01;FQ-PCR-TB-DNA法,93.02%vs 60.47%,P<0.01]。(3)输尿管镜活检:39例镜下活检中,90.70%为结核,9.30%为慢性炎症。输尿管镜检查联合FQ-PCR的肾结核检出率显著高于尿沉渣(100.00%vs 60.47%,P<0.01);输尿管镜检并发症主要为新发肉眼血尿18例,新发尿频14例。结论输尿管镜检查联合FQ-PCR可显著提高不典型肾结核的临床检出率,可选择应用。关键词：不典型肾结核 实时荧光定量聚合酶链反应 输尿管镜 实时 荧光 定量聚合酶链反应 法与分离培养法在流感病毒鉴定中的关系研究被引量：1 2022年 实时 荧光 定量聚合酶链反应 (Real-Time PCR)检测阳性样本进行分离培养,分析CT值与流感病毒分离率的影响关系。关键词：实时荧光定量聚合酶链反应 流感监测 分离培养法 疾病预防控制中心 CT值 实时 荧光 定量聚合酶链反应 技术在肾结核病理诊断中的应用价值被引量：4 2022年 实时 荧光 定量聚合酶链反应 (polymerase chain reaction,PCR)技术在肾结核病理诊断中的应用价值。方法回顾性收集我院泌尿外科通过后腹腔镜技术或开放技术行肾切除术后石蜡组织标本55例患者的临床资料,以术前尿结核分枝杆菌培养结果为金标准,并结合术后病理诊断结果,将研究对象分为结核肾病组25例(阳性组),非结核肾病组30例(阴性组)。采用Taqman探针法实时 荧光 定量 PCR技术和抗酸染色技术检测每个石蜡组织标本,对比分析两种检测技术在肾结核病理诊断中的诊断效能,绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评估两种方法在肾结核病理诊断中的价值。结果实时 荧光 定量 PCR技术检测的敏感度与抗酸染色技术检测的敏感度分别为80.0%(20/25)和48.0(12/25),前者相比后者敏感度提高了32.0%,差异有统计学意义(χ^(2)=5.556,P=0.018)。荧光 定量 PCR检测的特异度、阳性预测值、阴性预测值均高于抗酸染色检测的结果,但两者比较差异均无统计学意义(P>0.05)。荧光 定量 PCR检测的准确度高于抗酸染色检测的准确度(89.1%vs.72.7%),两者比较差异有统计学意义(χ^(2)=4.767,P=0.029)。两种技术检测肾结核组织标本病原体结果与尿结核分枝杆菌培养结果的一致性Kappa值分别为0.777和0.429。ROC曲线分析显示,实时 荧光 定量 PCR技术和抗酸染色技术的ROC曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.883和0.707,前者高于后者0.177,差异有统计学意义(Z=3.502,P<0.05)。结论实时 荧光 定量 PCR技术检测方法简单易行,与抗酸染色检测技术相比可以提高肾结核组织病原体检测的敏感度和准确度,在肾结核的病理诊断中具有良好的应用价值。关键词：实时聚合酶链反应 组织细胞学制备技术 实时 荧光 定量聚合酶链反应 检测对结核病的诊断价值被引量：3 2021年 实时 荧光 定量聚合酶链反应 (PCR)(Gene-xpert)检测对结核病的诊断价值。方法随机选取我中心在2019年4月至2020年2月就诊的结核病患者共100例作为研究对象,将给予涂片抗酸染色法视为对照组,将给予实时 荧光 定量 PCR检测视为研究组,研究观察2组患者的检出率、灵敏度和特异度、实时 荧光 定量 PCR检测不同部位结核分枝杆菌阳性表达结果。结果研究组患者的检出率显著高于对照组患者(P<0.05);研究组患者的灵敏度和特异度显著高于对照组患者(P<0.05);淋巴结的阳性检出率较其他部位较高。结论实时 荧光 定量 PCR(Gene-xpert)检测在结核病的诊断中具有突出的临床价值,值得在临床上进一步推广应用。关键词：实时荧光定量聚合酶链反应 结核病 实时 荧光 定量聚合酶链反应 法检测沙门菌与志贺菌的结果分析被引量：4 2021年 实时 荧光 定量聚合酶链反应 (PCR)法检测沙门菌与志贺菌的结果。方法选取2016年7月至2018年9月开封市某医院腹泻患者510例粪便标本,分别采用传统培养法与实时 荧光 定量 PCR法对粪便标本进行检测。对比2种方法下沙门菌及志贺菌检测结果,并分析2种检测方法的应用价值。结果实时 荧光 定量 PCR法阳性检出率为7.8%高于传统培养法3.7%,差异有统计学意义(P<0.05);实时 荧光 定量 PCR法检测沙门菌的敏感性、特异性分别为100%、98.8%,检测志贺菌的敏感度、特异度分别为100%、97.0%。结论实时 荧光 定量 PCR法在检测沙门菌及志贺菌中具有较高的应用价值,敏感度及特异度均较高,检测结果客观、可靠,可为临床诊断提供参考依据,值得推广应用。关键词：沙门菌属 志贺菌属 实时荧光定量PCR法
