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一种新的湖羊子宫内膜上皮细胞的分离纯化方法: 2025年; 子宫内膜腔上皮在妊娠早期最早与胚胎接触,最先实现形态和功能上的转变达到容受态,对胚胎着床具有重要意义,但目前湖羊子宫内膜上皮细胞体外培养体系仍未建立。本试验基于文献报道的绵羊子宫内膜上皮细胞培养方法,优化分离方法、消化时间、纯化方法,以期建立湖羊子宫内膜上皮细胞分离纯化新方法。选用性成熟的健康空怀湖羊子宫,采用组织块培养法和酶消化过筛法分离细胞,酶消化过筛法细胞得率高,视野中杂细胞少,生长状态较好。分别消化30 min、1 h及30 min后收集组织块再次消化30 min,CCK8结果显示:30 min+30 min组细胞增殖情况最佳,体外培养24、48 h的增殖效果均显著高于1 h组,体外培养72 h的增殖效果极显著高于1 h组和30 min组。30 min组细胞在体外培养72 h后的增殖效果极显著高于1 h组。采用差时消化、差速离心及消化过筛3种方法纯化细胞,差时消化法纯化效率最高,细胞形态均为铺路石状,免疫荧光结果显示视野中细胞均为Cytokeratin 18阳性,证明本试验分离培养的湖羊子宫内膜上皮细胞,纯度较高、生长状态良好,为后续进一步探究早期胚胎着床机制提供了基础。; 陈曦彭彩娥谢言射金慧佳聂思佳王争光; 关键词：湖羊子宫内膜上皮细胞原代细胞培养

姜黄素对AngⅡ诱导的子宫内膜上皮细胞转分化及AKT/GSK-3β/β-catenin通路激活的影响: 2025年; 目的研究姜黄素对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的子宫内膜上皮细胞(endometrial epithelial cells,EECs)增殖、分泌、转分化能力及激活蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)/糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)/β-连环蛋白(β-catenin)通路的变化,探讨姜黄素对子宫内膜纤维化的保护机制。方法分离并鉴定原代人EECs,依据处理方式不同将其分成正常组、姜黄素组、AngⅡ组及姜黄素治疗组4组。正常组:常规孵育液;姜黄素组:含有姜黄素(30μmol/L)的孵育液;AngⅡ组:含有AngⅡ(10-6mol/L)的孵育液;姜黄素治疗组:含有AngⅡ(10-6mol/L)和姜黄素(30μmol/L)的孵育液,各组处理时间均为48 h。比较各组细胞的增殖情况;分析细胞孵育液中Ⅰ、III型胶原蛋白的分泌量、Western blot检测细胞转分化标志分子钙黏蛋白E(E-cadherin,E-cad)和α-平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle Actin,α-SMA);AKT/GSK-3β/β-catenin通路分子磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-AKT)、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(phosphorylated glycogen synthase kinase-3β,p-GSK-3β)和β-catenin的表达水平。结果DHA组和正常组相比,细胞增殖、孵育液中Ⅰ、III型胶原分泌量、转分化分子以及AKT/GSK-3β/β-catenin通路分子的表达水平差异均无统计学意义(均P>0.05)。AngⅡ组和正常组相比,细胞量(0.122±0.002)增多、Ⅰ型胶原[(0.538±0.093)ng/L]和III型胶原[(0.492±0.097)ng/L]分泌量上升、转分化标志分子a-SMA(0.492±0.031)、AKT/GSK-3β/β-catenin通路分子p-AKT(1.119±0.064)、p-GSK-3β(0.904±0.057)和β-catenin(0.121±0.002)表达水平均升高(均P<0.05),而E-cad(0.349±0.021)表达水平下降(P<0.05)。姜黄素治疗组和AngⅡ组相比,细胞量(0.118±0.001)减少、Ⅰ型胶原[(0.348±0.063)ng/L]和III型胶原[(0.306±0.063)ng/L]分泌量下降、转分化标志分子a-SMA(0.221±0.015)、AKT/GSK-3β/β-catenin通路分子p-AKT(0.705±0.052)、p-GSK-3β(0.563±0.029; 董静宋利华董永杰栗志英宋玉杰李玲; 关键词：姜黄素子宫内膜上皮细胞转分化

皮质醇对原代奶牛子宫内膜上皮细胞Nrf2/HO-1通路的影响机制研究: 2025年; 围产期奶牛氧化应激状态的加剧和皮质醇水平的升高都是诱发产后子宫感染的风险因素。皮质醇可影响机体氧化应激,但其对奶牛子宫内膜氧化损伤的具体机制尚未阐明。本研究采用不同浓度皮质醇单独处理或与脂多糖(LPS)共处理静息或氧化应激状态下的原代奶牛子宫内膜上皮细胞,利用流式细胞术检测ROS水平,RT-q PCR和Western-blot检测Nrf2/HO-1通路的变化,围绕Nrf2/HO-1通路探究皮质醇对细胞氧化应激的影响机制。结果显示,与对照组相比,10、30、100、300和1 000 ng/mL皮质醇处理后,细胞活性氧水平降低(P<0.01),HO-1的基因和蛋白相对表达量上升(P<0.01)。LPS(10μg/mL)处理导致细胞活性氧释放增加(P<0.01),HO-1、NQO1和Nrf2的基因和总蛋白以及Nrf2核蛋白的相对表达量下降(P<0.05);与LPS组相比,30和100 ng/mL皮质醇与LPS共处理组的细胞活性氧水平降低(P<0.01),HO-1、NQO1和Nrf2的相对表达量出现不同程度的上升(P<0.05)。结果表明,静息状态下,高皮质醇水平可增强奶牛子宫内膜上皮细胞的抗氧化能力,其机制与HO-1有关;在LPS刺激下,高皮质醇可通过激活Nrf2/HO-1通路,发挥抗氧化效应。; 钟婧怡魏雨璠杨涔段江珧郭龙刘康军董俊升王亨王亨崔璐莹; 关键词：皮质醇氧化应激

蛋鸡子宫内膜上皮细胞的衰老模型的建立方法: 本申请公开了一种蛋鸡子宫内膜上皮细胞的衰老模型的建立方法，所述方法包括：将蛋鸡的子宫置于细胞培养液中，得到蛋鸡子宫内膜上皮细胞的目标细胞液；将细胞外基质与低糖培养基按(1：24)的比例进行稀释，得到稀释后的细胞外基质；使...; 邵丹曲亮瞿源王强郭军王星果李永峰郭伟童海兵卢建胡玉萍马猛窦套存

子宫内膜上皮细胞类器官在生殖领域的研究进展: 2024年; 近年来,子宫内膜上皮细胞类器官研究在生殖领域取得了显著进展。传统的二维细胞培养模型和动物实验难以准确还原子宫内膜的三维结构和生理功能,从而限制了对子宫内膜上皮细胞正常生理机制和相关疾病机制的深入研究。新兴的类器官技术为此提供了新途径,子宫内膜上皮细胞类器官通过干细胞或前体细胞在三维培养基中自行组织形成,成功地高度还原了在体子宫内膜腺体的特征。这种类器官模型不仅能够模拟子宫内膜上皮细胞在不同周期阶段的生理变化,还能够模拟囊胚与子宫内膜之间的复杂互动过程。此外,子宫内膜上皮细胞类器官系统为生殖领域的基础研究和临床研究提供了重要工具,包括生殖相关基础研究、疾病机制探索、药物筛选及靶向治疗研究等。这些研究可为深入了解子宫内膜的生物学特性、疾病机制以及相关疾病的治疗策略提供全新的思路和方法。; 曹志文颜桂军; 关键词：子宫内膜上皮细胞药物筛选

LIF调控奶牛子宫内膜上皮细胞容受性基因表达研究被引量：1: 2024年; 接受态的子宫内膜对于奶牛胚胎的成功植入至关重要。为探讨白血病抑制因子(LIF)对奶牛子宫内膜容受性的调控机制,试验将奶牛子宫内膜上皮细胞分为对照组、LIF处理组、LIF+STAT3共处理组,研究了LIF对子宫内膜容受性的作用和STAT3信号通路对奶牛子宫内膜容受性的调控。采用实时荧光定量RT-PCR和Western blot检测容受性相关基因HOXa10、VEGF和炎症相关基因TLR4、NF-κB的mRNA和蛋白表达变化。结果表明:与对照组相比,LIF处理组奶牛子宫内膜上皮细胞的容受性相关基因HOXa10、VEGF的表达量显著增加(P<0.05),炎症相关基因TLR4、NF-κB的表达量显著增加(P<0.05)。LIF+STAT3共处理组的HOXa10、VEGF的表达量与LIF处理组比较显著降低(P<0.05),与对照组无显著差异(P>0.05);TLR4、NF-κB的表达量与LIF处理组比较无显著差异(P>0.05),显著高于对照组(P<0.05)。说明LIF通过激活STAT3信号通路调控子宫内膜上皮细胞HOXa10、VEGF的表达,能够增强子宫内膜的容受性。; 王红战陈艳茹李琦唐颖李博郑鹏; 关键词：容受性胚胎附植

蛋鸡子宫内膜上皮细胞分离培养和鉴定及其衰老模型的建立: 2024年; 本研究旨在建立蛋鸡子宫内膜上皮细胞的原代培养方法,并利用D-半乳糖(D-gal)构建蛋鸡子宫内膜上皮细胞体外衰老模型。试验选用产蛋高峰期(35周龄)蛋鸡子宫内膜组织为研究对象,刮取蛋鸡子宫内膜,使用Ⅰ型胶原酶消化,体外分离培养蛋鸡子宫内膜上皮细胞,通过形态学观察及细胞免疫荧光(IF)对细胞进行鉴定。添加不同浓度(0、8、16、32、64 mg/mL)的D-gal干预子宫内膜上皮细胞,通过观察细胞形态,测定干预24 h后的细胞活率,采用衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色检测蛋鸡子宫内膜上皮细胞的细胞衰老阳性率,筛选出D-gal的最佳干预浓度。结果显示:1)利用刮取结合酶消化法培养的蛋鸡子宫内膜上皮细胞形态呈铺路石状。2)通过免疫荧光技术,运用兔抗细胞角蛋白18(CK18)作为一抗,对蛋鸡子宫内膜上皮细胞进行鉴定,结果呈阳性,纯度达90%以上。3)与对照组相比,8、16、32、64 mg/mL D-gal组的细胞存活率均显著降低(P<0.05),32 mg/mL组的存活率仅剩47.87%。4)与对照组相比,不同浓度D-gal组细胞衰老阳性率显著增加(P<0.05),16 mg/mL D-gal组的细胞衰老阳性率为41.08%。综上所述,本研究使用的方法能够成功分离、纯化培养并鉴定出原代蛋鸡子宫内膜上皮细胞,采用16 mg/mL D-gal处理24 h子宫内膜上皮细胞可成功构建其衰老模型。; 瞿源邵丹杨海明童海兵; 关键词：子宫内膜上皮细胞体外细胞培养衰老模型蛋鸡

一种体外诱导IPS细胞分化生成人子宫内膜上皮细胞的方法: 本发明公开了一种体外诱导IPS细胞分化生成人子宫内膜上皮细胞的方法，具体包括如下步骤：(1)准备IPS细胞和培养基，所述培养基包括培养基A、培养基B和培养基C；(2)将IPS细胞接种到DMEM细胞培养瓶中培养得到第一代细...; 陈风辉

1种载药水凝胶对牛子宫内膜上皮细胞抗炎作用的研究: 2024年; 为研究负载七叶苷的水凝胶对LPS介导的牛子宫内膜上皮细胞(BEND)炎症的抗炎作用,以5μg/mL的LPS浓度对BEND细胞进行攻毒,以150、300、600μg/mL为药物低、中、高剂量进行干预后,检测细胞上清液中白介素1(IL-1β)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量变化,以判断其的抗炎作用。试验结果表明,负载七叶苷的水凝胶可以极显著降低细胞上清液中IL-1β、IL-6及TNF-α含量(P<0.05或P<0.01)。综上所述,负载七叶苷的水凝胶能降低机体炎性细胞因子含量,降低机体损伤。; 丁泽张耀锋马蓓刘盼董天祯王天扬刘俊峰; 关键词：抗炎

干扰FABP4基因对绵羊子宫内膜上皮细胞脂质积累及迁移的影响: 2024年; 研究旨在探究脂肪酸结合蛋白4(FABP4)基因对绵羊子宫内膜上皮细胞脂质积累及迁移的影响。设计3条FABP4干扰片段,将片段与pGBplv-U6-mcherry-puro连接构建干扰载体,以空载质粒为对照(NC组),3条干扰重组质粒分别为FABP4-shRNA1、FABP4-shRNA2、FABP4-shRNA3,对重组质粒进行酶切鉴定。质粒转染后RT-qPCR鉴定干扰效率,Western Blot对载体干扰效果进行进一步验证。将载体转染至体外培养的子宫内膜上皮细胞中,BODIPY法检测脂滴聚集情况,使用试剂盒检测细胞中甘油三酯含量,RT-qPCR检测脂代谢及增殖迁移相关基因,细胞划痕试验检测细胞迁移情况。结果显示:所有载体均可有效干扰FABP4基因的表达,其中FABP4-shRNA2载体干扰效果最好。在干扰子宫内膜上皮细胞FABP4基因表达后,与NC组相比,细胞中脂滴聚集能力下降,甘油三酯含量降低,细胞脂质代谢和增殖迁移相关基因mRNA表达下降,划痕愈合速度降低;降低子宫内膜上皮细胞FABP4基因表达后,细胞脂质积累水平及细胞迁移能力下降。研究表明,FABP4基因可能对绵羊妊娠和胚胎正常发育具有重要作用,值得在育种实践中进行更深入研究。; 陈岩刘畅魏盼盼喻恒彬张童胡广东; 关键词：绵羊子宫内膜上皮细胞 RNAI

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