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卵巢癌细胞外泌体抑制外周单个核细胞源性树突状细胞成熟的机制研究: 2023年; 目的探究卵巢癌细胞源性外泌体对人外周血树突状细胞(DCs)成熟的影响。方法从健康人外周血中分离单个核细胞(PBMC),利用免疫磁珠从中分选出CD14^(+)的细胞;采用重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和重组人白介素-4(rhIL-4)联合刺激的办法诱导CD14^(+)/PBMC分化为未成熟树突状细胞(iDCs),光镜确认细胞形态;超速离心提取卵巢癌顺铂耐药细胞外泌体(A2780cis-外泌体),蛋白质印迹法检测其特征性蛋白标志物,透射电镜(TEM)观察外泌体形态,纳米颗粒跟踪分析仪(NTA)检测外泌体粒径分布;iDCs与A2780cis-外泌体共培养后给予重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)诱导,流式细胞术检测CD83^(+)/HLA-DR^(+)/CD1a^(+)细胞比例变化。结果超速离心提取的卵巢癌顺铂耐药细胞外泌体,TEM下可检测到直径约为60 nm的“杯盏状”外泌体颗粒。蛋白质印迹法结果显示A2780cis细胞各蛋白表达均为1,A2780cis-外泌体中CD9、CD81和CD63相对表达量分别为1.08±0.07、0.67±0.04和1.78±0.19,t值分别为2.928、13.760和7.900,P值分别为0.043、<0.001和0.001;但A2780cis-外泌体无Calnexin表达。NTA检测显示,外泌体粒径范围主要集中于(56.80±1.60)nm。经流式细胞术检测CD14磁珠分选前后CD14^(+)/PBMC比例分别为(10.20±0.53)%和(97.60±0.26)%,t=255.900,P<0.001。rhGM-CSF和rhIL-4联合诱导的CD14^(+)/PBMC,细胞胞体变大,伸出半圆形、梭形、星形等毛刺状突起,形态不规则,表现为iDCs形态特征;rhTNF-α刺激iDCs后,细胞毛刺状突起明显增多,细胞贴壁能力增强,而A2780cis-外泌体与iDCs共培养组接受rhTNF-α刺激后,细胞毛刺状突起较少,细胞贴壁能力减弱。流式细胞术检测结果显示,rhTNF-α诱导前细胞CD86、CD40、HLA-DR、CD1a和CD83比例分别为(86.27±2.25)%、(67.43±0.64)%、(69.50±0.46)%、(68.20±0.46)%和(5.87±0.55)%,符合iDCs抗原表型特征;TNF-α诱导48 h后,CD86、CD40、HLA-DR、CD1a和CD83比例分别为(9; 董育清王怡李丽华司胜斌汤业珍董晓微盛青松赵薇; 关键词：外泌体

儿童原发性肾病综合征患者外周单个核细胞miR-199a、miR-196水平与临床症状的相关性及诊断价值被引量：2: 2021年; 目的:分析儿童原发性肾病综合征患者外周单个核细胞miR-199a、miR-196水平与临床症状的相关性及其诊断价值。方法:收集2017年2月—2019年5月在我院就诊的原发性肾病综合征的患儿60例,作为实验组,同时又选择同时期体检的健康儿童60例作为对照组,采用实时荧光定量PCR技术检测两组儿童外周血单个核细胞中的miR-199a、miR-196水平,同时检测血清总蛋白、白蛋白、总胆固醇、三酰甘油和肾功能指标(尿素、肌酐、尿酸、尿蛋白)水平,分析miR-199a、miR-196与临床症状的相关性及临床诊断价值。结果:与健康对照组相比,实验组患儿血清总蛋白、白蛋白均降低,总胆固醇、三酰甘油、尿酸指标则升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组的尿素和肌酐相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。实验组miR-199a、miR-196的表达水平均明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。根据ROC曲线分析结果显示,miR-199a对诊断PNS的ROC曲线下面积为0.843,敏感性和特异度为74.31%、87.84%;miR-196对诊断PNS的ROC曲线下面积为0.846,敏感性和特异度为92.66%、72.97%。在实验组患儿中,根据Pearson相关性分析结果,miR-199a水平与白蛋白、总胆固醇、三酰甘油、尿蛋白显著负相关(P<0.05),miR-196水平与白蛋白、总胆固醇、尿蛋白显著负相关(P<0.05)。结论:PNS患儿的外周单个核细胞内的miR-199a、miR-196水平与肾功能损伤的指标相关,对于诊断PNS均有较高的敏感性和特异性,对于PNS的诊断具有一定的临床价值。; 王宁李墨奇何文昌叶文婷刘杨; 关键词：肾病综合征

复方新诺明联合泼尼松治疗对系统性红斑狼疮患者外周单个核细胞TLR7和TLR9表达的影响被引量：4: 2020年; 目的探究系统性红斑狼疮应用复方新诺明联合泼尼松治疗对外周单个核细胞TLR7和TLR9表达的影响。方法回顾性选择同济大学附属杨浦医院2018年5月至2019年12月期间收治的系统性红斑狼疮患者50例,对患者进行分组,为试验1组(n=20)和试验2组(n=30),其中试验1组为初次诊断患者,试验2组为复方新诺明联合泼尼松治疗患者,同时选同期同院健康体检的30例健康人作为对照组,对三组补体C4、补体C3、C-反应蛋白、红细胞沉降率、抗Sm抗体、抗ds-DNA抗体、抗核抗体、性别、年龄进行分析。结果在试验1组、试验2组、对照组中,外周血单个核细胞均有TLR9、TLR7表达。TLR9、TLR7转录水平经定量PCR检测,试验1组显著高于对照组(P<0.05)。试验2组TLR9、TLR7显著高于对照组(P<0.05)。试验2组的TLR7表达低于试验1组(P<0.05);系统性红斑狼疮活动指数与TLR9、TLR7呈正相关(P<0.01)。试验1组系统性红斑狼疮活动指数与TLR7的相关系数为0.099,与TLR9的相关系数为0.490;系统性红斑狼疮活动指数、抗Sm抗体滴度与TLR7的转录水平呈正相关(P<0.05)。TLR9和抗ds-DNA抗体滴度、系统性红斑狼疮活动指数呈正相关。TLR9与联合用药治疗剂量存在相关性。TLR9表达与药物治疗剂量、C4水平以及系统性红斑狼疮活动指数相关。TLR7转录水平与系统性红斑狼疮活动指数相关。结论系统性红斑狼疮病情变化情况与TLR9、TLR7基因转录呈正相关,而泼尼松、复方新诺明使用剂量是影响TLR9表达的主要因素。; 范俊郭洪佩路臻豪鲍华芳; 关键词：系统性红斑狼疮复方新诺明泼尼松外周单个核细胞 TOLL样受体

糖皮质激素治疗对系统性红斑狼疮患者外周单个核细胞TLR7和TLR9表达的影响及相关因素分析被引量：10: 2019年; 目的探讨糖皮质激素治疗对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)中Toll样受体(TLR7、TLR9)转录水平的影响及其可能的影响因素。方法收集40例SLE患者(激素治疗组24例,初次诊断组16例)以及健康对照组(19例)的临床资料和外周血,分离PBMC,通过定量PCR法检测TLR7和TLR9基因的转录水平,通过统计学分析组间的差异和相关变量分析。结果激素治疗组和初次诊断组SLE患者PBMC的TLR7和TLR9基因转录水平均高于健康对照组,差异具有统计学意义(P <0.05)。初次诊断组TLR7表达高于激素治疗组(P <0.05),但TLR9的增高差异无统计学意义。TLR7和TLR9的转录水平均与SLE的活动指数成正相关关系。TLR7还与抗Sm抗体滴度正相关,而TLR9与年龄、抗dsDNA抗体滴度、补体C4以及糖皮质激素治疗日均剂量等因素相关。通过线性回归模型进一步筛选变量提示TLR7主要与SLE活动指数相关,而TLR9的可能相关变量依次为SLE活动指数、补体C4和糖皮质激素治疗剂量。结论 TLR7和TLR9基因转录增高与SLE的病情活动具有正相关关系。影响TLR9表达的主要因素还包括近期糖皮质激素治疗剂量和补体C4水平。; 许敏玲陈桃蔡琪; 关键词：系统性红斑狼疮外周血单个核细胞 TOLL样受体糖皮质激素病例对照研究

参地颗粒对慢性肾小球肾炎脾肾亏虚证患者细胞毒T淋巴细胞相关抗原-4/外周单个核细胞B7-1介导的免疫炎症紊乱的影响被引量：12: 2019年; 【目的】观察参地颗粒对于脾肾亏虚型慢性肾小球肾炎(CGN)患者外周细胞毒T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)、外周单个核细胞B7-1(CD80)水平和血清白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)、干扰素γ(IFN-γ)的影响,探讨参地颗粒对CGN患者的CTLA-4/B7-1介导的免疫炎症紊乱的干预作用。【方法】将60例脾肾亏虚型CGN患者随机分为治疗组和对照组,每组各30例;另选择20例同期健康体检者作为正常组。2组患者均给予西医常规治疗,治疗组同时给予参地颗粒治疗,对照组同时给予缬沙坦胶囊治疗,疗程12周。观察2组治疗前后24 h尿蛋白定量(24hUPr),外周血B7-1、IL-2、IL-6、IFN-γ及尿B7-1水平的变化情况,并评价2组的疗效。【结果】(1)治疗组剔除2例,对照组剔除3例,最终治疗组28例、对照组27例完成试验。(2)治疗后,2组患者的中医证候积分均较治疗前下降(P<0.05),且治疗组的降低作用明显优于对照组(P<0.05)。(3)治疗组和对照组的中医证候疗效总有效率分别为92.86%、55.56%,临床疾病疗效总有效率分别为89.29%、62.96%,治疗组的中医证候疗效和临床疾病疗效均优于对照组(P<0.05)。(4)治疗后各个时点,对照组的24hUPr含量与治疗前比较均无统计学差异(P> 0.05);治疗组在治疗8周、12周后的24hUPr含量均较治疗前明显降低(P <0.05),且其降低作用明显优于对照组(P <0.05)。(5)治疗前,2组患者血清IL-2水平均较正常组下降,IL-6、IFN-γ水平均较正常组升高(P <0.05)。治疗后,2组患者血清IL-2水平均较治疗前升高(P <0.05),IL-6、IFN-γ水平均较治疗前下降(P <0.05);组间比较,治疗组对血清IL-6、IFN-γ表达水平的降低作用优于对照组(P <0.05)。(6)治疗后,2组患者血清和尿B7-1表达水平均较治疗前下降(P <0.05),但治疗后组间比较,差异均无统计学意义(P> 0.05)。【结论】CGN患者体内CTLA-4/B7-1信号系统存在紊乱,引起Th1/Th2细胞失衡,造成炎症因子�; 茅燕萍王亿平陈成张磊魏玲任克军金华王东章雪莲; 关键词：慢性肾小球肾炎 CTLA-4 B7-1

鼻咽癌高癌家系外周单个核细胞蛋白质组学研究被引量：2: 2016年; 目的寻找鼻咽癌高癌家系鼻咽癌的癌变机制、早期诊断、治疗和预后监测的外周血特异性分子标志物。方法利用双向凝胶电泳技术(2-DE)分别分离鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者、鼻咽癌高癌家系成员及健康对照组外周血单个核细胞的总蛋白,经蓝银染色后进行图像分析,并对差异表达的蛋白质点进行识别,利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱得到肽质量指纹图谱,搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点。结果建立了鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者、鼻咽癌高癌家系成员及健康对照组外周血单个核细胞的2-DE图谱;发现并鉴定了鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者、鼻咽癌高癌家系成员及健康对照组之间的差异表达大于2倍的蛋白质点19个,这些差异蛋白质点主要为蛋白质合成与分解、抗氧化应激、分子伴侣、细胞结构相关蛋白质、三大代谢相关酶类以及信号传导相关蛋白质等。结论通过对鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者、鼻咽癌高癌家系成员及健康对照组外周血单个核细胞的比较蛋白质学研究,筛选并鉴定到19个与鼻咽癌高癌家系鼻咽癌发生相关的蛋白质,其中HSP27、Protein S100-A9、Prohibitin可能成为鼻咽癌高癌家系鼻咽癌癌变机制、早期诊断、治疗及预后监测的外周血特异性分子标志物。; 兰炎根陈舒华陈凯田道法何迎春黄冬云; 关键词：鼻咽癌外周血单个核细胞蛋白质组学

妊娠期高血压患者外周单个核细胞NF-κB活性及血浆五聚素3的表达的相关性被引量：4: 2016年; 目的探讨妊娠期高血压患者外周单个核细胞核因子κB(NF-κB)活性及血浆五聚素3(PTX3)的表达的相关性。方法选取2012年3月至2014年12月收治的妊娠期高血压疾病患者60例作为观察组,选取同期入院正常晚期妊娠妇女20例作为对照组,分别检测其外周单个核细胞NF-κB和血浆PTX3水平,并进行统计学分析。结果重度子痫前期、轻度子痫前期和妊娠期高血压三组之间NF-κB水平逐渐降低,而PTX3水平逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关分析显示,NF-κB与子痫严重程度呈正相关(r=0.521),而PTX3呈负相关(r=-0.397),差异有统计学意义(P均<0.05);ROC曲线显示,两种指标联合诊断阳性面积0.808,具有诊断意义(P<0.05)。结论妊娠期高血压患者外周单个核细胞NF-κB活性及血浆PTX3的表达呈负相关关系,两者联合检测具有较高的诊断价值。; 夏芬; 关键词：妊娠高血压核因子ΚB

妊娠期高血压患者外周单个核细胞NF-kB活性与血浆五聚素3表达的相关性被引量：3: 2015年; 选取妊娠期高血压疾病患者60例作为观察组,选取同期入院正常晚期妊娠妇女20例作为对照组。观察组外周单个核细胞NF-k B活性高于对照组,而血浆五聚素3水平低于对照组,其差异有统计学意义(P<0.05);重度子痫前期、轻度子痫前期和妊娠期高血压三组之间有统计学差异(P<0.05)。经Pearson相关分析显示,两组之间变化呈负相关,r=0.672;ROC曲线显示,两种指标联合诊断阳性面积0.808,具有诊断意义(P<0.05)。结论:娠期高血压患者外周单个核细胞NF-k B活性及血浆五聚素3的表达呈负相关关系,两者联合检测具有较高的诊断价值。; 章小东黄文彩王彩红郑穗瑾罗红英付文金尹丽明彭兰芬曾见芬刘亮; 关键词：妊娠高血压核因子

Blimp1mRNA在RA患者外周单个核细胞的表达及IL-21对其调节作用研究: 背景与目的类风湿性关节炎（Rheumatoid arthritis,RA）是一种病因不明的慢性系统性自身免疫性疾病，以对称性滑膜关节炎进而导致进行性关节破坏为特征，在成人中发病率达0.5%。RA患者滑膜易形成滤泡外生发中...; 苏利沙

四种循环miRNA在类风湿性关节炎患者血浆及外周单个核细胞中的表达分析被引量：5: 2013年; 目的探讨血液中四种miRNA在类风湿性关节炎(RA)患者血浆及外周单个核细胞(PBMC)中的表达及意义。方法采用实时荧光定量PCR检测随机选取的43例RA患者和30例健康体检者血浆和PBMC中四种miRNA(miRNA-146a、miRNA-223、miRNA-16和miRNA-155)的表达,分析这些血浆和PBMC特异的miRNA在RA中的作用。结果与对照组相比,RA组患者血浆中miR-146a和miR-155表达下调(P<0.05),miR-16表达增高(P<0.05),而miR-223与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);PBMC中四种miRNA表达均上调(P<0.05);相关性分析显示这些miRNA在血浆和PBMC中的表达没有明显相关性。结论 miRNA-146a、miRNA-223、miRNA-16和miRNA-155在RA中起着重要作用且在血浆和PBMC中出现的机制可能不同。; 荀春华胡志坚韩峰; 关键词：微RNAS 血浆外周血单个核细胞

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