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搜索到161篇“ 复制酶基因“的相关文章

基因沉默番木瓜环斑病毒复制酶基因(PRSV-Nib)获得抗病毒病番木瓜的研究: 2024年; 番木瓜是重要的热带经济水果。番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)是番木瓜的重要病毒病,经常导致严重的产量损失和质量恶化。自从1998年第一例转基因番木瓜问世以来,使得基于“致病菌衍生的抗病性(pathogen-derived resistance,PDR)”的抗病育种策略获得成功广泛应用。然而依赖于序列同源性的抗病性与病毒突变导致多样性增加之间的矛盾成为番木瓜育种科学家的新挑战。本研究拟采用RNAi策略针对复制酶(nuclear inclusion b.Nib)获得广谱抗PRSV番木瓜新种质。通过团队已建立的胚性愈伤诱导-农杆菌介导转化-再生苗诱导的番木瓜遗传转化体系,共获得经过抗性筛选的再生苗52株,通过特异性PCR进行筛选共计获得24株转基因阳性植株。通过对T0代田间自然发病试验中,转基因番木瓜株系抗病性明显高于非转基因对照,其中NibB5-2田间抗病性最优。通过hiTAIL-PCR方法确定NibB5-2插入位点位于第2号染色体supercontig_30的1976766的位置。T1代接种试验中,无病毒积累且无发病症状,初步确认具有良好的病毒抗性,为番木瓜抗病育种提供新思路。; 吴清铧贾瑞宗郭静远杨牧之胡玉娟郝志刚赵辉郭安平; 关键词：番木瓜番木瓜环斑病毒

齿兰环斑病毒复制酶基因克隆和抗体制备以及遗传转化的研究: 感染兰花的病毒有马铃薯X病毒属（Potexvirus）、烟草花叶病毒属（Tobamovirus）、黄瓜花叶病毒属（Cucumovirus）等。目前兰花上至少报道了27多病毒，其中齿兰环斑病毒（Odontoglossum ...; 刘倩; 关键词：齿兰环斑病毒复制酶基因多克隆抗体; 文献传递

中国小麦花叶病毒(CWMV)复制酶基因在病株体内的表达分析被引量：2: 2017年; 中国小麦花叶病毒(Chinese wheat mosaic virus,CWMV)是引起我国小麦花叶病的重要病原之一,其基因组由2条单链正义RNA片段(RNA1-2)组成。本研究根据发表的基因组序列设计特异性引物,扩增了CWMV复制酶基因的部分片段(nt102~1101),并克隆至原核表达载体pGEX-6P1,然后导入大肠杆菌E.coli BL21(DE3)pLysS中诱导表达。重组的复制酶蛋白经亲和层析纯化后免疫家兔制备多克隆抗体。Western-blot分析表明该抗体具有高度的特异性,能用于病株体内CWMV复制酶蛋白的检测。检测分析显示在病株体内,CWMV基因组RNA1可直接充当其复制酶基因的mRNA;在感染的细胞中,其复制酶组分主要是RNA1 ORF1编码的蛋白,分子量约153 kDa,且特异性地定位于膜结构上。; 张芬张芬羊健羊健李静陈剑平; 关键词：多克隆抗体复制酶

油菜花叶病毒(ORMV)126kDa复制酶基因在拟南芥中的可诱导表达: 植物病毒危害农作物的形势十分严重，是导致植物病害的主要原因之一。植物病毒对农作物的危害不仅严重威胁农业生产结构，对农业经济也造成了严重损失。因此，如何防治植物病毒病害早已是科学家们所需要研究和解决的重要课题。随着研究发现...; 黄学娟; 关键词：油菜病害花叶病毒蛋白表达植物病理学

基于复制酶基因序列的黄瓜绿斑驳花叶病毒系统进化及生物信息学分析被引量：4: 2015年; 本研究对江苏、浙江、湖南和北京等四个地区的葫芦、西瓜、黄瓜、西葫芦和甜瓜上的黄瓜绿斑驳花叶病毒（Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV）129kD和57kD蛋白复制酶基因分别进行扩增、测序和序列分析。结果显示,供试CGMMV分离物CGMMV-No.1、CGMMV-No.2、CGMMV-No.3、CGMMV-No.4和CGMMVNo.5的129kD和57kD蛋白复制酶基因序列相似性分别为99.64%和99.74%,其中CGMMV-No.1、CGMMVNo.3和CGMMV-No.4的相似性较高,三者的129kD和57kD蛋白复制酶基因序列相似性分别为99.95%和99.94%,而CGMMV-No.2的129kD和57kD蛋白复制酶基因序列与其余四个参比序列的相似性相对较低,分别为99.16%~99.27%和99.04%~99.18%;供试样品在基于129kD和57kD蛋白复制酶基因序列构建的NJ系统发育树中均被分为6个类群,CGMMV-No.1、CGMMV-No.3、CGMMV-No.4与GenBank上已报道的中国山东分离物（Accession No.KJ754195）聚为一支,CGMMV-No.5与中国辽宁分离物（Accession No.EF611826）聚为一支,而浙江的CGMMV-No.2西瓜分离物在129kD蛋白复制酶基因系统发育树中与韩国西瓜分离物（Accession No.AF417242）聚为一支,其在57kD蛋白复制酶基因系统发育树中独立成群。本研究中供试CGMMV分离物的129kD和57kD蛋白均无显著疏水性,也无高度卷曲螺旋部位,ProtParam预测显示仅CGMMV-No.4的129kD蛋白为稳定蛋白,其余均为不稳定蛋白,CGMMV-No.1、CGMMV-No.2、CGMMV-No.3和CGMMV-No.5的129kD蛋白分别有6个、6个、2个和4个可能的跨膜结构区域,CGMMV-No.2、CGMMV-No.4和CGMMV-No.5的57kD蛋白分别有13个、13个和5个可能的跨膜结构域,供试样品129kD蛋白的糖基化位点分别有2个、4个、4个、4个和4个,57kD蛋白的糖基化位点分别有2个、5个、2个、5个和2个,其129kD和57kD蛋白的紊乱区、球蛋白区、磷酸化位点以及B细胞抗原表位位点均存在差异。综合分析认为,供试CGMMV分离物复制酶基因序列相似性较高,种内稳定且保守,种间差异�; 梁超琼孟嫣罗来鑫刘鹏飞李健强; 关键词：黄瓜绿斑驳花叶病毒复制酶基因系统进化树

高效激发小麦抗黄花叶病毒病的复制酶基因片段及应用: 本发明涉及一种高效激发小麦抗黄花叶病毒病的复制酶基因片段及应用，是一段激发小麦抗黄花叶病毒病的复制酶基因片段的核苷酸序列，这种高效激发小麦抗黄花叶病毒病的复制酶基因片段，具有SEQ ID NO：1所述的核苷酸序列。利用上...; 陈剑平陈炯徐惠君程顺和马有志孙丽英吴宏亚陈明张晓祥张伯桥; 文献传递

马铃薯X病毒复制酶基因载体的构建及在烟草中的转化: 2011年; [目的]构建马铃薯X病毒复制酶基因(RdRp)的载体,并将其在烟草中转化。[方法]将RdRp基因分为3个片段,分别连入表达载体中,其中基因5'端和3'端序列通过PCR方法获得,中间序列通过酶切从病毒载体pGR107上获得。最后将构建成功的载体转入烟草中进行表达。[结果]表达载体pK1390+RdRp被成功构建;获得PCR初步鉴定为转基因的植株50多棵。[结论]为研究植物病毒机制提供了依据,也为利用杂交手段得到外源蛋白高效表达的双转基因植物奠定了基础。; 王俊杰马美施晓东; 关键词：PVX RDRP 抗病毒转基因

甘蔗黄叶病毒复制酶基因的克隆及序列分析被引量：2: 2010年; The gene of RNA-dependent RNA polymerase(RdRP) was cloned by RT-PCR from Sugarcane yellow leaf virus-Fuzhou isolate(CHN-FJ1) and then cloned into pMD18-T vector.The sequence showed that the fragment comprised 1 212 nucleotides including part gene of ORF1 and ORF2.The ORF2 was involved the RdRP gene consisted of 995 nucleotides and encoded putative protein of 331 amino acids.Compared the nucleo-tide sequence and encoded putative protein of CHN-FJ1 with the other isolates from different countries,they shared the homology above 92.0%.Phylogenetic tree suggested that the sixteen isolates were classified into four types according to the amino acid sequence of the RdRP.One of the groups contained CHN-FJ1 and the other isolates from China,American,Brazil,Australia and Colombia;however,there was the closest relation between CHN-FJ1 and BRA-YL1 isolate from Brazil.; 王勤南高三基陈如凯刘绍谋金玉峰; 关键词：甘蔗糖业复制酶基因 VIRUS LEAF

马铃薯Y病毒复制酶基因介导的病毒抗性研究: 马铃薯Y病毒属是植物病毒中最大的一个属，包括马铃薯Y病毒（Potato virus Y，PVY）、烟草蚀纹病毒（Tobacco etch virus，TEV）、芜菁花叶病毒（Turnip mosaic virus，TuM...; 徐丽; 关键词：马铃薯Y病毒复制酶基因保守序列 RNA沉默

转PRSV复制酶基因番木瓜食品安全性的初步评价被引量：7: 2010年; 应用生物信息学的方法对转基因番木瓜进行实质等同性分析。将复制酶基因与多个数据库中的花生、大豆、坚果、牛奶、鸡蛋、鱼类、贝类和小麦等8类过敏源序列进行比对分析,结果未发现连续8个相同的氨基酸,据此可初步认为转入的复制酶蛋白不是已知的致敏源。将复制酶基因进行原核表达,并纯化复性表达蛋白,再通过模拟胃肠液消化试验,结果发现纯化的变性蛋白与复性蛋白均能在15 s内降解,表明复制酶蛋白能在人的消化系统内降解,使人体发生过敏的可能性不大。通过液相萃取法,提取转基因与非转基因番木瓜中的一种内源毒物苄基异硫氰酯(benzyl isothiocyanate,BITC),将浓缩后的样品进行气相色谱分析,结果表明BITC的含量在转基因与非转基因番木瓜中差异不显著。; 阮小蕾侯燕李华平; 关键词：番木瓜番木瓜环斑病毒复制酶基因食品安全

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