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堆型艾美耳球虫裂殖子外分泌蛋白对细胞凋亡的抑制作用: 2024年; 为了研究堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)裂殖子的外分泌蛋白对马-达氏牛肾(MDBK)细胞凋亡的抑制作用,本试验建立Transwell小室间接共培养体系,即将E.acervulina裂殖子与MDBK细胞共培养,采用流式细胞术分别检测共培养1.5、3和6 h MDBK细胞的凋亡情况,利用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)对共培养6 h后的细胞上清液中的成分进行鉴定。结果显示,1.5、3和6 h共培养组MDBK细胞的总细胞凋亡率分别为(5.92±0.19)%、(8.13±0.32)%和(11.57±0.37)%,与对照组相比,总细胞凋亡率均极显著降低(P<0.01)。LC-MS/MS分析共鉴定到65个E.acervulina的外分泌蛋白,包括热休克蛋白、微线蛋白、能量代谢酶分子、蛋白磷酸酶分子和未知功能蛋白等。结果表明,E.acervulina裂殖子外分泌蛋白可抑制MDBK细胞凋亡,具体哪种蛋白在抑制细胞凋亡中发挥作用有待后续进一步研究。; 葛玉杰王黎霞王诗琪石梦云陈玲玲王梦琦于慧张建军安健; 关键词：堆型艾美耳球虫裂殖子凋亡抑制

堆型艾美耳球虫EAGZ疫苗株TaqMan qPCR鉴别诊断方法的建立及应用: 鸡球虫病是由一种或多种艾美耳球虫混合感染引起的家禽肠道寄生虫病。目前对于鸡球虫病的防控主要是药物防控和疫苗防控,由于鸡球虫多重耐药严重,减毒活卵囊疫苗成为了重要的防控手段。但目前缺乏对于减毒活卵囊疫苗的鉴别诊断方法,无法...; 靳浩展; 关键词：堆型艾美耳球虫分子标记

用于鉴别堆型艾美耳球虫的野毒株和疫苗株的特异性引物及试剂盒和用途: 本申请涉及分子生物学检测技术领域，涉及用于鉴别堆型艾美耳球虫的野毒株和疫苗株的特异性引物及试剂盒和用途。其中，特异性引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。将该引物及包含该引物的试剂盒用于检...; 蔡海明靳浩展孙铭飞廖申权戚南山李娟吕敏娜林栩慧胡俊菁宋勇乐尹理君陈祥杰朱易斌张小慧张健騑罗雪辉

表达双拷贝IBDV-VP2转基因堆型艾美耳球虫的构建及其免疫效应研究: 传染性法氏囊病（Infectious bursal disease,IBD）是由传染性法氏囊病毒（Infectious bursal disease virus,IBDV）引起的一种严重危害全球养禽业健康发展的免疫抑制性...; 郭庆彬; 关键词：艾美耳球虫转基因 VP2 传染性法氏囊病毒

堆型艾美耳球虫感染对鸡外源性凋亡关键蛋白的影响: 2023年; 为了探讨感染堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina,E.acervulina)对鸡十二指肠组织外源性凋亡关键蛋白的影响,试验将28日龄健康SPF鸡随机分为对照组和试验组,试验组雏鸡感染强毒株堆型艾美耳球虫,感染剂量为1×10^(5)个/只,周期为7 d。在试验的第24,96,144小时,每组随机取3只鸡的十二指肠进行组织病理学及细胞观察,另取部分肠组织制备组织匀浆,检测外源性凋亡关键蛋白Fas、TNFR1和FADD基因的表达情况。结果表明:感染鸡只平均增重显著低于对照组(P<0.05)。感染球虫96小时时,鸡只精神萎靡,十二指肠绒毛上皮细胞大量坏死;而感染球虫144小时时,鸡只的精神状态逐渐好转,小肠组织逐渐修复。感染球虫96小时时,荧光显微镜下可见坏死和变性的绒毛上皮细胞,且凋亡细胞明显增多,死亡和凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。试验期间,Fas、TNFR1和FADD基因的相对表达量均显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)。说明感染堆型艾美耳球虫可激活宿主细胞死亡受体凋亡信号通路,使细胞凋亡及坏死增加,肠道组织病变加重,鸡的平均增重降低。; 赵慧超徐之勇余燕马双坤申月华席浩冉李卓繁张万想刘子鹏; 关键词：堆型艾美耳球虫雏鸡十二指肠病理变化

一种堆型艾美耳球虫纳米亚单位疫苗及其制备方法和应用: 本发明公开了一种堆型艾美耳球虫纳米亚单位疫苗及其制备方法和应用。一种堆型艾美耳球虫纳米亚单位疫苗，所述的堆型艾美耳球虫纳米亚单位疫苗是由PLGA包裹重组蛋白EaMIC3形成的纳米粒子，所述的重组蛋白EaMIC3为堆型艾美...; 李祥瑞严若峰宋小凯徐立新黄剑梅

迷迭香酸对堆型艾美耳球虫攻毒肉鸡生长性能、免疫机能及炎症反应的影响被引量：7: 2023年; 本试验旨在探究饲粮添加迷迭香酸对堆型艾美耳球虫攻毒肉鸡生长性能、免疫机能和炎症反应的影响。选用1日龄雄性黄羽肉鸡360羽,随机分为6组,每组6个重复,每个重复10羽。对照组、攻毒对照组饲喂基础饲粮,阳性对照组在基础饲粮中添加20 mg/kg地克珠利,试验组在基础饲粮中分别添加40、80和160 mg/kg迷迭香酸,在14日龄对攻毒对照组、阳性对照组和试验组进行堆型艾美耳球虫攻毒,试验期为56 d。结果表明:1)与对照组相比,堆型艾美耳球虫攻毒后肉鸡第4、7、10天每克粪便中卵囊数量(OPG),21日龄肝脏指数、脾脏指数、血清谷丙转氨酶(ALT)活性以及血清与肝脏补体3(C3)、补体4(C4)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量均显著上升(P<0.05),15~21日龄平均日增重、21日龄血清免疫球蛋白M(IgM)与肝脏免疫球蛋白A(IgA)含量显著下降(P<0.05)。2)与攻毒对照组相比,饲粮添加160 mg/kg迷迭香酸显著降低了堆型艾美耳球虫攻毒肉鸡OPG(攻毒后第4、7、10天),21日龄肝脏指数、血清谷丙转氨酶活性以及血清与肝脏C3、C4、IL-1β、IL-6、TNF-α含量(P<0.05),显著提高了15~21日龄平均日增重以及21日龄血清中IgA和IgM含量(P<0.05)。综上所述,饲粮中添加160 mg/kg迷迭香酸能缓解堆型艾美耳球虫感染引起的肉鸡生长减缓,提高其免疫机能,抑制肝脏炎症。; 酉加民杨茜梓宫嘉泰何晨鹏蒋亦轩贺建华伍树松; 关键词：堆型艾美耳球虫肉鸡免疫

用于防治堆型艾美耳球虫的重组多肽及疫苗: 本发明涉及兽用生物制品领域，具体而言，涉及一种用于防治堆型艾美耳球虫的重组多肽及疫苗。通过免疫堆型艾美耳球虫重组多肽疫苗EA‑FLTI蛋白，能有效控制鸡体感染堆型艾美耳球虫，大大降低养鸡场抗球虫药的使用量，有效控制鸡球虫...; 孙铭飞戚南山廖申权吕敏娜吴彩艳李娟蔡海明林栩慧胡俊菁于林增肖文婉张小慧张健騑

堆型艾美耳球虫重组亚单位疫苗的制备及其免疫效果评价被引量：4: 2022年; 目的制备堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)重组亚单位疫苗,并评价其免疫效果。方法将堆型艾美耳球虫的保护性抗原基因cSZ1克隆至酵母表达载体pPICZαA,构建重组表达质粒pPICZαA-cSZ1,转化毕赤酵母菌株GS115,构建重组菌GS115-pPICZαA-cSZ1,经甲醇诱导表达重组蛋白cSZ1。按20、40、60μg/只(低、中、高剂量)经雏鸡肌肉注射重组蛋白,7 d后进行加强免疫,加强免疫7 d后经口感染E.acervulina孢子化卵囊,剂量为1×10^(4)个/只,同时设阳性对照组(未免疫仅攻虫)和阴性对照组(未免疫未攻虫)。攻虫后7 d检测雏鸡的抗球虫指数(anticoccidial index,ACI);初次免疫后7 d及加强免疫后7 d,经雏鸡心脏采血,分离血清,间接ELISA法检测血清抗体水平;攻虫后7 d,无菌取雏鸡脾脏,CCK-8法检测T淋巴细胞增殖情况。结果经双酶切及测序鉴定,证明重组表达质粒构建正确;经菌落PCR及测序鉴定,证明重组菌构建正确。重组蛋白cSZ1的相对分子质量约19000,可与鼠抗His标签单克隆抗体发生特异性结合。低、中、高剂量免疫组的ACI分别为171.25、176.42、174.33;与阴性对照组比较,低、中、高剂量免疫组雏鸡于初次免疫后7 d及加强免疫后7 d,血清抗体水平明显升高(P<0.01),攻虫后7 d,T淋巴细胞增殖率显著升高(P<0.01)。结论制备的堆型艾美耳球虫重组亚单位疫苗对雏鸡有较好的免疫效果。; 毕天奇肇英池马丹程淑琴王晓岑李新李建华张西臣宫鹏涛张楠张媛媛; 关键词：堆型艾美耳球虫毕赤酵母重组蛋白免疫保护

堆型艾美耳球虫微线蛋白3及其结构域蛋白的免疫保护作用被引量：1: 2022年; [目的]本文旨在研究堆型艾美耳球虫微线蛋白3(EaMIC3)及其结构域蛋白的免疫保护作用。[方法]经原核表达和纯化获得重组蛋白EaMIC3、EaMAR3和EaMAR6,制备3种蛋白的抗血清并测其效价;分离纯化堆型艾美耳球虫卵囊。在腿部肌肉注射重组蛋白和翅静脉注射多克隆抗体血清免疫14日龄雏鸡,间隔7 d进行二免,再7 d后攻毒,评估3种蛋白抵抗堆型艾美耳球虫感染的免疫保护作用。[结果]重组蛋白免疫组和抗重组蛋白血清免疫组中,EaMIC3和EaMAR3的抗球虫指数分别为178、165和180、166,而EaMAR6的抗球虫指数分别为130、159。2种免疫方式与对照组相比,EaMIC3和EaMAR3均显示明显的免疫保护效果,且EaMIC3的免疫保护效果最好,而EaMAR6的免疫保护效果较差。[结论]结构域蛋白的免疫保护作用与其和肠上皮细胞的结合能力一致,也证明结构域蛋白在球虫入侵过程中的关键作用。; 刘佳斌张杨王茗悦黄剑梅靖传旭宋小凯徐立新严若峰李祥瑞; 关键词：堆型艾美耳球虫结构域蛋白免疫保护效果

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