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流体动力学基因转染技术构建BGJ398耐药原位肝内胆管癌小鼠模型: 2024年; 目的:构建一种BGJ398耐药的原位肝内胆管癌(intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC)小鼠模型,以模拟临床患者的成纤维生长因子受体2(fibroblast growth factor receptor 2,FGFR2)基因重排/融合突变及FGFR2激酶结构域突变,为相关研究提供工具。方法:通过流体动力学尾静脉注射技术向小鼠注射pT3-myr-AKT-HA、pT3-EF1aNICD1、pCMV(CAT)T7-SB100和pSB[Exp]-myr-FGFR2-FLAG等质粒,将易于磷酸化的FGFR2的基因引入小鼠肝脏,构建BGJ398敏感性原位ICC小鼠模型,随后对部分小鼠进行BGJ398连续给药4周以诱导小鼠的耐药性,从而建立BGJ398耐药性原位ICC小鼠模型;应用超声成像监测胆道梗阻病灶以分析小鼠模型对BGJ398的耐药程度;观察模型小鼠的肝脏组织并对肝脏组织切片进行HE染色和油红O染色以分析BGJ398耐药原位ICC模型的组织学特征;应用免疫荧光染色法分析BGJ398耐药小鼠ICC原位肿瘤细胞的来源;提取原代肿瘤细胞,应用CCK-8法测定肿瘤细胞对BGJ398的敏感度和BGJ398对肿瘤细胞的半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC_(50));用BGJ398对构建的小鼠模型进行治疗并绘制生存曲线以在体内验证原位ICC模型的耐药性;提取耐药性原位ICC组织的DNA,进行基因组重测以序验证FGFR2激酶结构域序列的突变。结果:BGJ398耐药的原位ICC小鼠模型构建成功率达93.33%,肝脏表现出显著的肿瘤负荷,肝组织内可见ICC组织呈腺管状排列;肝组织切片HE染色和油红O染色显示出大量脂滴空泡;肝组织免疫荧光染色结果显示,所有肿瘤细胞中胆管上皮细胞标志物细胞角质蛋白19(cytokeratin 19,CK19)的表达均呈阳性,而肝细胞标志物白蛋白(albumin,ALB)的表达均呈阴性;提取并培养ICC原代肿瘤细胞,CCK-8实验结果显示BGJ398在敏感细胞中的IC_(50)值为95.22 nmol,而在耐药细胞的IC_(50)值增至348.4 nmol;对敏感或耐药模型小鼠进行BGJ398腹腔注射治疗后发现,耐药小鼠的生存率显著; 段诣朱晏段友容孙颖; 关键词：肝内胆管癌耐药机制基因重排

基因转染技术在抗肝纤维化中应用的研究进展被引量：1: 2021年; 基因治疗是指将外源性正常基因导入靶细胞以治疗疾病的一种方法,现阶段主要运用于肿瘤及某些特殊疾病的治疗。有研究显示,将基因治疗的转染技术用于抗肝纤维化的治疗可以逆转纤维化,或可成为治疗肝纤维化的潜在方案。本文就基因转染技术在抗肝纤维化中应用的研究进展进行综述。; 艾丁丁罗伟生; 关键词：肝纤维化基因治疗

基于水动力基因转染技术的原发性小鼠肝癌模型的建立及应用: 研究背景与目的　　乙型肝炎病毒感染引起的肝炎、肝硬化和肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)是严重危害人类健康的重大传染病。早期发现、早期诊断和早期治疗仍然是HCC的治疗原则，从血清中筛选H...; 曹相宜; 关键词：早期诊断标志物

流体动力学基因转染技术构建乙肝病毒HBx蛋白瞬时表达小鼠模型: 2017年; 目的:构建乙肝病毒HBx蛋白瞬时表达小鼠模型,为研究HBx在HBV感染相关原发性肝细胞癌发生中的分子机制奠定基础。方法:8只6~8周龄雄性CD-1小鼠,尾静脉注射真核表达质粒pc DNA-HBx及空载体pc DNA3.0,6~8 h处死小鼠并收集肝组织,抽提RNA及蛋白。RT-PCR和Western blot检测HBx表达情况;实时荧光定量PCR检测FXR靶基因SHP和Cyp7a1的m RNA表达。结果:核酸和蛋白水平上,pc DNA-HBx注射组小鼠肝脏内均可检测到HBx的表达;空载体对照组肝组织中未检测到HBx的表达;肝组织中瞬时过表达的HBx可以有效调控FXR通路下游靶基因SHP和Cyp7a1的m RNA表达。结论:成功实现了HBx在小鼠肝脏中的瞬时高表达,为今后整体水平上研究HBx提供了有效的动物模型。; 黄丹梅吴曼鹏黄晓华张莹倪仰鹏牛永东; 关键词：流体动力学尾静脉注射 HBX

反向基因转染技术的最近研究进展被引量：1: 2015年; 随着基因治疗研究的深入,基因转染技术得到了长足的发展。在反向基因转染概念被提出来的十余年间,反向基因转染技术也引起了广泛关注。反向基因转染技术是相对于常规转染而言的,即首先通过基质锚定DNA(或RNA),然后将细胞接种于该基质表面,细胞贴附的同时摄取锚定的DNA(或RNA)而实现基因转染,因而也被称为表面介导基因转染、基质介导基因转染、固相基因转染。与传统转染方法相比,其具备以下优势:载体/DNA(或RNA)复合物更加稳定,转染试剂可以更有效地接触细胞而达到更高的转染效率,低的细胞毒性和血清环境中不影响转染效率等。本文主要综述了反向转染技术的最新研究进展及其主要应用领域。; 张鹏飞胡秀凤成璐王玮刘文广

基因转染技术及其在肿瘤研究中应用的研究进展被引量：1: 2013年; 基因转染技术应用于肿瘤基因治疗和基因功能的研究已受到广泛的关注。基因转染的方法包括物理法、化学法和生物法,它们各有优缺点。文章主要概述基因转染的基本方法及其在肿瘤基因功能研究及基因治疗中的应用。; 张敏刘微李擎郭春燕何俊霞斯日古楞吉日木图; 关键词：基因转染技术肿瘤基因治疗基因功能

基因转染技术及其在肿瘤研究中的应用进展: 基因转染技术作为肿瘤基因治疗和基因功能的研究已受到广泛的关注。基因转染的方法包括物理法、化学法和生物法,它们各有优缺点。现主要概述基因转染的基本方法及其在肿瘤基因功能研究及基因治疗中的应用。; 张敏刘微李擎郭春燕何俊霞斯日古楞吉日木图; 关键词：基因转染技术肿瘤基因治疗基因功能

体内基因转染技术在肝再生研究中的应用: 2012年; 肝脏是一个特殊的器官,不仅因为它独特的解剖结构和生理特征,而且它还具有无限的再生能力。在各种动物模型中,应用病毒或非病毒载体将肝细胞生长因子等基因转入体内,能增强肝再生能力,这就是肝脏基因转染技术在肝再生研究中的应用。未来的研究目标就是消除病毒载体的毒副作用和增加非病毒载体的转染率,这也是目前肝内基因转染技术中面临的主要难题;另一个研究目标就是用受体介导基因靶向肝转染,使转入基因在肝细胞中特异高表达。这些研究成果将有助于肝再生基因机制研究,以及将来临床基因治疗提供参考。; 王保林陈平; 关键词：基因转染肝再生

基因转染技术联合中药在肿瘤研究中的应用进展: 2011年; 基因转染技术作为肿瘤基因治疗中的一种新方法,能够在基因水平上纠正细胞的遗传缺陷,从根本上改变肿瘤细胞遗传性。随着对癌变机制、癌细胞信号转导、癌细胞遗传特征等方面的深入研究,发现肿瘤原癌基因的激活,抑癌基因的失活,并不是单个基因发生的过程,而是一个多阶段、多步骤、多基因参与的复杂过程,故仅通过纠正某一突变基因来彻底解决恶性转化似乎是不可能的,因此多途径治疗方法已成为肿瘤基因治疗领域研究热点。; 陈振南刘志臻胡洪新戴锦章戴秋勇; 关键词：基因转染中药肿瘤

基因转染技术及其在白血病研究中的应用被引量：4: 2010年; 随着人类基因组计划的完成,分子生物学研究进入后基因组时代,基因转染技术也成为重要的实验手段,被广泛应用于基因功能研究及基因治疗。基因转染的方法包括化学法、物理法、生物法,它们各有优缺点。现主要概述基因转染的基本方法及其在白血病基因功能研究及基因治疗中的应用。; 叶美玲王少元; 关键词：基因功能基因治疗基因转染白血病

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