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检测流感疫苗中宿主细胞DNA残留量的地高辛标记探针杂交法的建立: 2018年; 目的建立地高辛标记DNA探针杂交法,检测基于Madin-Darby犬肾（Madin-Darby canine kidney,MDCK）细胞生产的流感疫苗中宿主DNA的残留量.方法提取MDCK细胞基因组DNA,制备地高辛标记探针.对地高辛标记DNA探针杂交法进行特异性、灵敏度及稳定性验证,并用此法检测3批MDCK细胞流感疫苗中的DNA残留量.结果 MDCK细胞基因组DNA的质量浓度为33 ng/μl,260 nm与280 nm波长处的吸光度比值为1.9.制备的探针与非同源细胞DNA无杂交,最低检测限度为10 pg.探针在-70℃放置9个月后,检测灵敏度仍可达到10 pg.经检测,MDCK细胞流感疫苗成品中的DNA残留量＜10 ng.结论建立的地高辛标记探针杂交法特异性强、灵敏度高、稳定好,并且操作简便,可用于MDCK细胞流感疫苗中DNA残留量的检测.; 李贝贝周琳婷; 关键词：流感疫苗地高辛 DNA探针

鸭细小病毒地高辛标记探针的制备与应用被引量：3: 2016年; 根据GenBank发表的1株鸭细小病毒全基因组序列设计1对特异性引物,利用PCR扩增得到大小为301bp的片段,回收纯化后用地高辛进行标记,制备鸭细小病毒地高辛标记探针。特异性试验表明,该探针仅与鸭细小病毒发生特异性杂交反应,与GPV、MDPV、DcuV、DEV、DHAV-I、H9N2亚型AIV、N-DRV、NDV、TMUV杂交反应均为阴性。敏感性试验表明,该探针对鸭细小病毒核酸的最低检测量为25pg。应用制备的探针对山东、江苏和安徽等地采集的61份患病鸭和30份健康鸭组织进行检测,阳性率分别为97%和0%,与病毒分离结果符合率为98%。上述结果显示,本研究制备的探针特异性强、敏感性高,为该病的诊断和流行病学调查提供可靠的方法。; 郑肖强陈浩窦砚国杨晶牛晓宇于相龙刁有祥; 关键词：地高辛探针

地高辛标记探针检测重组白细胞抑制因子-水蛭肽嵌合蛋白宿主DNA残留量的研究被引量：2: 2014年; 重组白细胞抑制因子一水蛭肽嵌合蛋白（recombinantneutrphilinhibitoryfactorandhiruloghybrid，TNHH）是一种通过基因工程技术改造的新型嵌合蛋白，临床上可用于急性脑栓塞后的脑组织损伤修复，减少脑水肿，防止微小血栓形成从而改善微循环，是一种有前景的心脑血管疾病治疗创新药物，; 蔡晓娜王鹏贺晓强刘立平陈海容郭晋霞范开; 关键词：嵌合蛋白水蛭肽地高辛标记探针检测宿主

地高辛标记探针检测重组定点突变巴曲酶蛋白宿主DNA残留量的研究被引量：1: 2013年; 目的建立检测重组定点突变巴曲酶原液中外源性DNA残留量的方法。方法从重组定点突变巴曲酶酵母工程菌提取基因组DNA作为模板,制备地高辛标记探针。此探针与样品进行点样杂交,并进行显色反应。结果 3批重组定点突变巴曲酶原液中,每人份剂量的宿主DNA残留量均<10ng。结论该方法检测灵敏度较好,特异性较强,可用于重组定点突变巴曲酶的检测。; 李娜徐梅杨宇张宏杰薛雁王宏英薛百忠; 关键词：地高辛探针

地高辛标记探针原位杂交检测猪延髓TPH2 mRNA的表达: 2012年; 为了从组织学水平研究色氨酸羟化酶2(TPH2)在猪体的表达通路,探讨5-羟色胺(5-HT)与猪厌食、呕吐的关系,试验采用PCR法对猪TPH2 cDNA探针进行地高辛(digoxigenin,DIG)标记,应用核酸分子原位杂交技术检测猪延髓组织内TPH2 mRNA的表达。结果表明:地高辛标记的TPH2cDNA探针使用简便,灵敏度高,特异性强,杂交结果直观,探针保存时间较长,无放射性污染;猪延髓组织内的血管壁、蛛网膜、下橄榄核区与极后区的神经元均有阳性反应,TPH2 mRNA的表达较高,提示了TPH2在这些部位的存在与5-HT的转运具有相关性。; 钱慧慧何敏谢玉萍郑声陶钟帆剡海阔马勇江邓衔柏; 关键词：探针延髓原位杂交

地高辛标记探针检测鼻气管鸟杆菌的研究与应用: 利用PCR扩增鼻气管鸟杆菌(ORT)16S RRNA基因的671BP的特异性片段，经同收纯化后用地高辛标记，建立了地高辛标记探针诊断ORT的方法。特异性试验表明，该探针可与ORT不同血清型参考菌株的核酸发生特异性杂交，而...; 关键词：鼻气管鸟杆菌地高辛标记探针杂交检测; 文献传递网络资源链接

地高辛标记探针检测重组人p43蛋白宿主DNA残留量的研究被引量：9: 2011年; 目的:建立重组人p43蛋白原液中宿主DNA残留量的检测方法。方法:以重组人p43工程菌基因组DNA为模板,制备地高辛标记的探针,并以此探针与阳性对照品及供试品进行杂交及显色反应。结果:3批次重组人p43蛋白原液中每人份剂量的宿主DNA残留量均小于10 ng。结论:该方法灵敏度高,特异性强,重复性好,操作安全简便,可用于重组人p43制备过程中的原液检定及质量监控。; 黄相红胡立德梁文璐谭小钉刘大涛; 关键词：地高辛斑点杂交

地高辛标记探针检测鼻气管鸟杆菌的研究与应用被引量：1: 2010年; 【目的】建立鼻气管鸟杆菌(Ornithobacteriumrhinotracheale,ORT)快速、准确的检测方法。【方法】利用PCR扩增鼻气管鸟杆菌16 S rRNA基因的671 bp特异性片段,经回收纯化后用地高辛标记,建立了地高辛标记探针诊断ORT的方法。【结果】特异性试验表明,地高辛标记探针可与ORT不同血清型参考菌株的核酸发生特异性杂交,而与鸡大肠杆菌、副鸡嗜血杆菌、鸡白痢沙门氏菌、禽多杀性巴氏杆菌的核酸杂交均为阴性;敏感性试验结果表明,地高辛标记探针对ORT的最低检出量为100 pg/μL;利用该探针对分离菌株和疑似病料进行检测,结果均与PCR检测结果一致。【结论】建立了地高辛标记探针检测ORT的方法,为ORT的诊断提供了一种敏感性高、特异性强、简便且易行的方法。; 李瑶瑶刁有祥李宏梅; 关键词：鼻气管鸟杆菌地高辛标记探针杂交检测

应用PCR法制备地高辛标记探针原位杂交检测绵羊卵巢褪黑素受体Mel1aα基因表达: 采用RT-PCR技术从绵羊下丘脑组织中克隆到褪黑素(melat:onin,Mel)受体Mel1aα基因,扩增序列全长653bp.以此为模板,运用随机引物法制备了地高辛(DIG)标记的核酸探针,检测探针的标记效率达到100...; 张勇朱家桥李发弟马友记赵兴绪; 关键词：地高辛标记探针原位杂交绵羊卵巢褪黑素受体; 文献传递

应用PCR法制备地高辛标记探针原位杂交检测绵羊卵巢褪黑素受体Mel1aα基因表达: 采用RT-PCR技术从绵羊下丘脑组织中克隆到褪黑素(melatonin，Mel)受体Mel1aα基因，扩增序列全长653bp.以此为模板，运用随机引物法制备了地高辛(DIG)标记的核酸探针，检测探针的标记效率达到100n...; 张勇朱家桥李发弟马友记赵兴绪; 关键词：地高辛标记探针原位杂交绵羊卵巢褪黑素受体; 文献传递

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