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Fab型抗体的噬菌体表面展示与抗体CDR--H3理性设计研究: 单克隆抗体(MAb)是在特异性靶抗原的刺激下由B细胞产生的Y型免疫球蛋白，通过与特异性抗原作用来保护机体。抗体药物的治疗领域广阔，可以用于癌症、自身免疫性疾病、传染类疾病及代谢异常等的治疗，截至目前为止，已经有八十多种抗...; 王慧敏; 关键词：噬菌体展示

一种基于噬菌体表面展示多肽配体和磁性仿酶纳米材料及其应用: 本发明属于生物纳米技术检测领域，具体是指基于磁性仿酶纳米材料和一种噬菌体表面展示的靶向多肽配体的病原微生物的磁泳分离比色检测方法。采用生物模板法合成表面氨基化的同时具有优良磁性和仿过氧化物酶活性的四氧化三钴纳米材料。同时...; 刘爱骅刘培

M13噬菌体表面展示用于铁离子检测及对HIV-1P24蛋白的检测: 本研究通过改造M13噬菌体使其在外壳蛋白gp8上展示酪氨酸残基，研究发现铁离子浓度与噬菌体滴度存在联系，在一定范围内铁/亚铁离子浓度与噬菌体滴度的降低率成正比。该酪氨酸展示的M13噬菌体作为生物传感器检测铁及亚铁离子。在...; 牛春城; 关键词：表面抗原

使用细胞内同步表达法在T4噬菌体表面展示外源蛋白大分子的方法: 本发明是一种使用细胞内同步表达法在T4噬菌体表面展示外源蛋白大分子的方法，其步骤如下：带有T4噬菌体天然调控区的Hoc蛋白或Soc蛋白与外源蛋白融合的重组蛋白的表达质粒的构建；将外源重组蛋白的表达质粒转化进入大肠杆菌细胞...; 高嵩陶攀许恒皓刘伟尹欣程斌

使用细胞内同步表达法在T4噬菌体表面展示外源蛋白大分子的方法: 本发明是一种使用细胞内同步表达法在T4噬菌体表面展示外源蛋白大分子的方法，其步骤如下：带有T4噬菌体天然调控区的Hoc蛋白或Soc蛋白与外源蛋白融合的重组蛋白的表达质粒的构建；将外源重组蛋白的表达质粒转化进入大肠杆菌细胞...; 高嵩陶攀许恒皓刘伟尹欣程斌

利用噬菌体表面展示技术制备人源性抗肿瘤坏死因子-αFab’抗体: 肿瘤坏死因子-α（TNF-α）是在类风湿性关节炎（RA）等疾病的病理变化中起关键作用的细胞因子，临床试验结果证实，TNF-α是治疗该类疾病的合适靶点。针对 TNF-α的抑制剂用于治疗 RA取得了良好的效果，其代表药物有E...; 高鹏; 关键词：肿瘤坏死因子-Α 噬菌体

利用噬菌体表面展示技术克隆抗人DR5抗体可变区基因: 2011年; 目的:利用噬菌体表面展示技术制备抗人DR5单链抗体。方法:从抗DR5杂交瘤细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增VH和VL基因,并利用重叠扩增PCR将VH和VL拼接为scFv基因。将scFv与PAK100载体通过相同的酶切位点连接后,转化大肠杆菌XL1-Blue,经VSCM13辅助噬菌体拯救,构建成鼠抗人DR5单链抗体库。以DR5作为固相筛选分子,对噬菌体展示肽库进行3轮"吸附-洗脱-扩增"生物筛选,从第3轮洗脱物中随机挑选10个单克隆噬菌体扩增后进行ELISA鉴定,对所筛选克隆进行DNA序列测定和通过phage-ELISA验证噬菌体单链抗体的结合特异性。结果:经过3轮筛选后,对随机选取的10个噬菌体克隆进行鉴定,其中4个具有和DR5结合的特异性。结论:利用噬菌体表面展示技术筛选单链抗体,结果更加可信。; 刘瑞敏王明丽季泽俊刘峰涛白慧玲马远方; 关键词：噬菌体展示技术单链抗体死亡受体5

筛选肝细胞p53启动子结合蛋白的噬菌体表面展示技术被引量：1: 2011年; 目的筛选p53启动子结合蛋白,探讨p53对肝细胞调节的分子生物学机制。方法应用噬菌体表面展示技术,以p53作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行5轮"吸附-洗脱-扩增"过程,经噬斑的PCR扩增后,构建克隆载体,最后对所筛选克隆进行DNA测序和生物信息学分析。结果噬菌体经5轮富集后,成功构建了噬菌体p53展示文库,该文库包含与p53结合的肝细胞蛋白有17种。其中2个克隆编码未知功能蛋白;其余的克隆分别编码人α2HS糖蛋白(AHSG)、人D4、锌指蛋白家族2(DPF2)、凋亡反应锌指基因(REQ)、Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制因子结合蛋白、氨基甲酰磷酸合成酶1、磷酸化酶激酶、酪氨酸氨基转移酶、酪蛋白激酶细胞周期素激酶、谷胱甘肽过氧化物酶、组蛋白结合蛋白3、跨膜蛋白2、血清黏蛋白2、有核红细胞白血病病毒癌基因2、毛细管扩张失调症突变基因,涉及到细胞发育和代谢、细胞外基质、细胞周期调控、信号转导、细胞凋亡以及原癌基因。结论噬菌体表面展示技术成功筛选出了肝细胞p53启动子结合的多种类型和功能蛋白。; 吴顺华钟彦伟成军郑玉建; 关键词：噬菌体表面展示技术 P53 肝细胞

噬菌体表面展示文库筛选人干细胞因子模拟肽被引量：1: 2011年; 目的用噬菌体表面展示文库筛选具有人干细胞因子(hSCF)生物学活性的模拟肽。方法采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)从噬菌体环七肽库和十二肽库筛选与重组hSCF受体(rc-kit/Ig1-3)有较高亲和力的噬菌体克隆,提取噬菌体单链DNA进行序列测定,根据序列测定结果合成阳性小肽,四甲基偶氮噻唑盐(MTT)法检测合成小肽刺激UT-7细胞增殖的活性。结果经3轮筛选获得11个来源于环七肽库和8个来源于十二肽库与rc-kit/Ig1-3结合活性较高的噬菌体克隆,DNA测序结果显示环七肽库筛选到1个共有序列DPSPHTH,十二肽库没有筛选到共有序列。序列比对分析显示,这些小肽与hSCF没有同源序列。MTT法测定结果表明,合成的4个小肽均能促进UT-7细胞增殖,其中CE16和LE20刺激效果明显。结论获得4个具有较高hSCF生物学活性的模拟肽。; 苏林孔燕刘长征杨克恭陈松森; 关键词：人干细胞因子模拟肽酶联免疫吸附测定法

小鼠神经细胞cDNA T7噬菌体表面展示文库的构建: 2011年; 目的构建小鼠神经细胞cDNA T7噬菌体表面展示文库。方法用Trizol试剂提取原代小鼠神经细胞总RNA,分离、纯化mRNA,经反转录合成其双链cDNA。在双链cDNA末端加上定向EcoRⅠ/HindⅢ接头,用内切酶EcoRⅠ和HindⅢ消化接头,以形成两端分别带有EcoRⅠ和HindⅢ黏性末端的双链cDNA。经Mini Column进行纯化,收集大小在300 bp以上的双链cDNA片段,将其连接于含有EcoRⅠ和HindⅢ末端的T7Select 10-3b载体上,体外包装后经BLT5403菌株增殖,进行文库扩增。结果所构建的文库库容量为含有3.04×107个重组子,原始滴度为2.8×107 pfu/ml,重组率为92%,扩增后文库滴度为3.5×1010 pfu/ml。对随机挑取的100个噬菌斑进行PCR鉴定,88%的插入片段大于300 bp。结论成功构建了小鼠神经细胞cDNA T7噬菌体表面展示文库。; 张磊升高巍赵魁贺文琦宋德光陆慧君高丰; 关键词：小鼠神经元基因文库

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