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噬菌体抗体库技术被引量：11: 2006年; 噬菌体抗体库技术是20世纪90年代继噬菌体展示技术发展而来。这一技术彻底改变了抗体制备的传统途径,使抗体工程技术进入了一个新的发展阶段。噬菌体抗体库技术是迄今发展最成熟、应用最广泛的抗体库技术。本文对与基因工程抗体相关的噬菌体展示技术以及噬菌体抗体库技术作一综述。; 张爱华余模松; 关键词：噬菌体展示技术噬菌体抗体库技术

噬菌体抗体库技术被引量：3: 2005年; 噬菌体抗体库技术是指从人外周血、脾或骨髓淋巴细胞提取总RNA,利用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法扩增抗体的全套可变区基因,通过噬菌体表面展示技术,把抗体Fab段或单链抗体表达在噬菌体表面,构建人源抗体库。噬菌体抗体将基因型(genotype)和表型(phenotype)统一于一体,将选择能力和扩增能力偶联起来,具有强大的筛选能力,能够在体外模拟体内的抗体生成过程,使抗体工程技术进入了一个新的时代。; 马小兵畅继武; 关键词：噬菌体抗体噬菌体抗体库技术多聚酶链反应可变区基因人外周血总RNA FAB段

噬菌体抗体库技术被引量：1: 2004年; 噬菌体抗体库技术以其简便和高效 ,大大地促进了抗体产业的发展。抗体库技术的出现离不开与社会需求的相互促进 ;抗体库的构建和筛选离不开对传统方法的改进和创新 ;抗体库技术的应用突破了传统杂交瘤技术的束缚。科研实践中处处体现着辩证法 ,了解一些辩证法知识 ,能够指导我们的科研实践。; 吕勇刚陶开山窦科峰郭照江; 关键词：噬菌体抗体库辩证法

噬菌体抗体库技术被引量：5: 1998年; 噬菌体抗体库(surface display phage antibody library)技术用PCR扩增出抗体的全套可变区基因,通过噬菌体表面表达技术(surface display),把Fab段或单链抗体(single chain Fv,ScFv)表达在噬菌体表面,经过“吸附-洗脱-扩增”过程筛选并富集特异性抗体。这一技术将表型和基因型联系在一起,使识别抗原的能力和进行再扩增的能力结合在一起,是一极为高效的表达、筛选体系,使单抗的制备根本改观,在生物技术领域极具潜能。; 徐伟文; 关键词：噬菌体抗体库单链抗体克隆

噬菌体抗体库技术在肿瘤治疗中的研究进展及应用被引量：1: 2023年; 肿瘤是严重威胁人类健康的疾病。目前肿瘤治疗策略以手术切除、放化疗、靶向治疗和免疫治疗为主。单克隆抗体药物因具备高效性和低毒性等特点,逐渐成为肿瘤临床治疗中不可或缺的药物类型。噬菌体抗体库技术(phage antibody library technology,PALT)是一种新型的单克隆抗体制备技术,其将免疫球蛋白可变区VH(variable region of heavy chain)/VL(variable region of light chain)基因重组后整合在噬菌体载体上,并以融合蛋白的形式将抗体表达到噬菌体表面,从而获得多样性抗体库。抗体库经过“吸附-洗脱-扩增”过程即可筛选获得到特异结合抗原的抗体分子及其基因序列。PALT具有抗体生产周期短、抗体结构可塑性强、抗体产量大、多样性高和可直接生产人源化抗体等优点,已应用于乳腺癌、胃癌、肺癌和肝癌等肿瘤标志物的筛选和抗体药物的制备等领域。文中综述了PALT在肿瘤治疗中的研究进展及应用。; 陈晓阳安瑞珩黄菊梁有沣张文静郝明炫郭蕊李小宁李永超应璐杨昭; 关键词：肿瘤噬菌体抗体库技术单克隆抗体靶向治疗标志物

基于噬菌体抗体库技术制备诺如病毒全人源单链抗体: 2022年; 目的基于噬菌体抗体库技术制备抗诺如病毒(norovirus,NoV)全人源单链抗体(single-chain antibody fragment,scFv)。方法从GⅡ.6 NoV感染者恢复期外周血中分离得到外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),提取总RNA,RT-PCR法分别扩增scFv的重链和轻链可变区基因片段,通过Overlap PCR技术将两者随机拼接成scFv基因片段。将scFv基因克隆至噬菌体质粒pCANTAB-5E,转化至感受态E.coli TG1,获得全人源scFv噬菌体抗体库。以GⅡ.6 P蛋白为固相抗原对抗体库进行4轮生物筛选,以选取的特异性抗NoV阳性噬菌体为模板,扩增scFv基因后,进行原核表达及纯化,并鉴定其特异性及中和性。结果人源噬菌体scFv抗体库库容约为8.8×106PFU/mL。4轮生物筛选共获得10株scFv,均能与GⅡ.4、GⅡ.6和GⅡ.17 NoV P蛋白发生特异性结合,且对3株NoV毒株均有不同程度的阻断作用。结论利用GⅡ.6 NoV感染者恢复期的PBMCs构建了全人源scFv噬菌体抗体库,筛选出的10株抗NoV scFv对NoV具有一定的中和作用。; 周飞园王璐余京蓉梁芷妍林璧慧张绪富戴迎春; 关键词：诺如病毒噬菌体抗体库单链抗体

噬菌体抗体库技术筛选抗VEGF165单克隆抗体被引量：3: 2019年; 目的:获得抗血管内皮生长因子165(VEGF165)单克隆抗体,并对其功能进行初步验证。方法:利用噬菌体抗体库展示技术筛选与VEGF165结合的噬菌体克隆并测序,以测序正确的阳性克隆质粒为模板,PCR扩增抗体的轻重链可变区基因,并克隆至哺乳动物细胞表达载体中,构建全抗体表达载体;将全抗体表达载体转染293E细胞,收取培养细胞上清,利用ProteinA亲和纯化抗体;通过结合ELISA、表面等离子共振检测抗体的亲和力,以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为模型验证抗体功能。结果:经过噬菌体抗体库展示技术筛出1个与VEGF165特异性结合的抗体序列VG2;293E细胞表达了VG2全抗体蛋白,SDS-PAGE显示VG2抗体纯度较高;BIAcore检测结果表明该抗体具有较高亲和力(KD=0.56nmol/L),竞争抑制ELISA结果表明VG2抗体能抑制VEGF与VEGF受体(VEGFR)的结合(IC50为1.470μg/mL),进一步实验结果表明VG2能够抑制VEGF引起的HUVEC增殖。结论:制备了靶向VEGF165的全人源单克隆抗体VG2,该抗体具有较高的亲和力,能阻断VEGF165/VEGFR2的结合,并抑制HUVEC的增殖,可以作为潜在药物应用于肿瘤治疗。; 詹明硕刘方杰张亚兰; 关键词：血管内皮生长因子噬菌体抗体库技术单克隆抗体

噬菌体抗体库技术概述被引量：3: 2017年; 噬菌体抗体库是近年发展起来的一项分子生物学新技术。构建容量大、特异性高和敏感性强的人源性抗体是此项技术的核心。本文就噬菌体抗体库的技术原理、构建过程及应用作一综述。; 蔡尽忠; 关键词：噬菌体展示技术噬菌体抗体库技术噬菌体抗体

噬菌体抗体库技术在抗体研发中的运用: 2017年; 噬菌体抗体库技术是一种以噬菌体为载体,将外源抗体库基因插入到噬菌体衣壳蛋白基因中,并组装出具有扩增能力且在噬菌体表面无缺损表达抗体的融合噬菌体的技术。噬菌体抗体库技术已广泛运用于单克隆抗体的研发,它相对于传统的筛选技术,在时间周期,抗体类型,筛选范围,经济成本等有较为突出的优势。本文主要介绍噬菌体抗体库技术的原理、类型、运用以及最新研究进展。; 蒋红欣; 关键词：噬菌体抗体库技术抗体筛选抗体库

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