旨在构建尘螨诱导的特应性皮炎(atopic dermatitis, AD)小鼠模型和哮喘小鼠模型。本研究利用3种主要尘螨螨种(屋尘螨、粉尘螨、热带无爪螨)的主要变应原Der p 1、Der f 1、Blo t 5等比混合,分别诱导AD小鼠模型和哮喘小鼠模型,并通过皮肤及肺组织的相关炎症细胞因子水平(IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-17A)、血清总IgE水平等指标对AD小鼠的过敏程度进行评估;通过IgE水平、耳朵点刺试验、肺部组织苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining, HE)等指标评估哮喘小鼠模型。结果表明,AD模型中致敏区域皮肤出现破损后结痂现象,皮肤及肺组织中细胞因子水平的变化表明小鼠体内反应偏向Th2反应,IgE水平较正常组显著升高;哮喘模型组小鼠血清总IgE水平显著升高,变应原激发后模型小鼠体温下降明显,且90 min后仍未恢复初始温度,耳朵点刺试验中,抗原的攻击使模型组小鼠耳朵染料渗漏增加,肺组织HE染色显示模型组小鼠炎症细胞浸润增加。本研究成功诱导尘螨AD小鼠模型和尘螨哮喘小鼠模型。
为构建可靠、稳定的过敏性哮喘小鼠模型,选取12只5周龄雌性BALB/c小鼠,随机分为模型组和对照组,每组6只。模型组每只小鼠腹腔注射100μL的1 g·L^(-1)猫、犬融合变应原Fel d 1-Can f 1/氢氧化铝复合物致敏,并经气管注入100μL的1 g·L^(-1)猫、犬融合变应原Fel d 1-Can f 1激发,对照组给予等体积PBS(pH=7.4)。检测血清特异性IgE水平、气道反应性水平、变应原诱发应激性过敏反应、耳朵点刺试验、肺部组织炎症浸润程度、肺部组织多黏液杯状细胞数和胶原纤维沉积程度等多个指标,以判断过敏性哮喘模型是否构建成功。结果表明,与对照组相比,经Fel d 1-Can f 1诱导的小鼠血清特异性IgE水平显著上升,气道反应性显著增高,变应原诱发体温下降明显,耳朵染料渗漏面积增大,渗漏净强度显著增强,肺部炎症浸润显著增加,多黏液杯状细胞数增加,胶原纤维沉积程度加重。综上所述,本研究成功构建过敏性哮喘小鼠模型,可为猫、犬过敏防治型疫苗的开发及评价提供模型条件。
目的探讨苏葶平喘汤对激素抵抗型难治性哮喘小鼠癌蛋白Fos(c-Fos)及血清核转录因子激活蛋白-1(activator protein 1,AP-1)表达的影响,试分析苏葶平喘汤对难治性哮喘的干预机制。方法将50只雌性SPF级BALB/c小鼠随机分为5组,分别为空白组(A)、模型组(B)、苏葶平喘汤组(C)、地塞米松组(D)和苏葶平喘汤+地塞米松组(E),每组10只。除空白组外,剩余4组均将小鼠建立为激素抵抗型哮喘模型。药物干预结束后进行取材,利用酶联免疫吸附测定(ELISA)法、实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)分别检测小鼠血清AP-1、肺组织c-Fos的表达水平。结果1.ELISA检测结果显示:模型组小鼠较空白组小鼠血清中AP-1的值明显增高(P<0.05),苏葶平喘汤组、地塞米松组及苏葶平喘汤+地塞米松组较空白组的小鼠血清AP-1值均降低(P<0.05),其中以苏葶平喘汤+地塞米松组的降低最为显著(P<0.05)。2.PCR检测结果显示:模型组与其余各组相比小鼠肺组织的c-FosmRNA表达明显升高(P<0.05),苏葶平喘汤组、地塞米松组和苏葶平喘汤+地塞米松组c-FosmRNA表达下降(P<0.05),地塞米松组、苏葶平喘汤组和苏葶平喘汤+地塞米松组小鼠的肺组织c-FosmRNA表达水平则无明显差异。结论苏葶平喘汤治疗激素抵抗型哮喘可通过影响AP-1及c-Fos的表达水平来实现抑制哮喘炎症反应控制激素抵抗型哮喘症状的作用。
