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基于叠氮溴化丙锭-定量反转录-聚合酶链式反应的甲型肝炎疫苗病毒滴度快速检测方法被引量：3: 2020年; 目的建立快速检测甲型肝炎减毒活疫苗感染性病毒滴度的叠氮溴化丙锭-定量反转录-聚合酶链式反应(PMA-qRT-PCR)方法。方法比较叠氮溴化丙锭(PMA)浓度、光解时间、孵育温度和时间,以及不同灭活方式、pH值和添加剂预处理对PMA-qRT-PCR法检测的影响;进行线性、平行性、灵敏度、重复性、相关性、特异性和初步适用性研究。结果确定最适反应条件为PMA终浓度50μmol/L,4℃避光孵育30 min,光解30 min,病毒液pH值为1.48~7.43。方法学研究结果显示,该方法特异性良好;线性范围为5.0~8.0 lgCCID50/ml,线性和平行性良好;定量下限为5.0 lgCCID50/ml;重复性变异系数(CV)为2.78%~3.58%;与法定方法检测结果具有显著相关性(相关系数R2=0.698)。初步适用性结果显示,4个实验室使用各自细胞系检测同一样品结果差异无统计学意义(P=0.071~0.997);不同企业生产的疫苗在不同细胞系上检测适用性良好。结论建立了甲型肝炎减毒活疫苗感染性病毒滴度的PMA-qRT-PCR方法,为冻干甲型肝炎减毒活疫苗的效力评价提供了快速检测方法。; 卞莲莲王一平孙世洋高帆吴星毛群颖梁争论; 关键词：甲型肝炎疫苗 PMA 病毒滴度

基于巢式反转录-聚合酶链式反应技术检测葡萄病毒A和葡萄病毒B被引量：2: 2019年; 皱木复合病在世界范围内普遍发生,是引起葡萄木质部畸形的一类病害的统称,在沙地葡萄、Kober5BB和LN33品种上表现茎痘、茎沟和栓皮等症状,其中葡萄病毒A(Grapevine virus A,GVA)与Kober5BB品种上出现茎沟症状有关,而葡萄病毒B(Grapevine virus B,GVB)与LN33品种上出现栓皮症状有关。; 胡国君董雅凤张尊平范旭东任芳; 关键词：检出率反转录-聚合酶链式反应

反转录-聚合酶链式反应检测结直肠癌二氢嘧啶脱氢酶的意义被引量：1: 2013年; 目的研究结直肠癌患者二氢嘧啶脱氢酶(DPD)的表达及其临床意义。方法结直肠癌患者42例,于FOLFOX6方案化疗前,取癌组织及癌旁正常组织,用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测DPD的表达,观察其与毒性和预后的关系。结果癌旁正常组织DPD的表达高于相应癌组织(P<0.01)。结直肠癌组织DPD的表达状况和各种化疗反应无明显相关性(P>0.05)。正常组织DPD水平和口腔黏膜炎、腹泻的发生呈负相关(P<0.05)。Ⅲ期结直肠癌DPD高表达组和DPD低表达组患者的平均和中位无进展生存期(PFS)分别为28.3个月、27个月和38.6个月、36个月,差异无统计学意义(P>0.05)。结论结直肠癌组织DPD的表达可以预测Ⅲ期结直肠癌患者的预后,而癌旁正常组织DPD的表达可以预测5-FU相关毒性的发生情况。; 董秋美黎莹黄赛花; 关键词：结直肠癌化疗 5-氟尿嘧啶反转录-聚合酶链式反应二氢嘧啶脱氢酶

猪蓝耳病病毒实时荧光反转录-聚合酶链式反应检测方法: 猪蓝耳病病毒实时荧光反转录-聚合酶链式反应检测方法，其包括以下步骤：（1）设计针对猪蓝耳病病毒的的引物、探针，并在探针上标记好FAM和TAMARA荧光基团；（2）设计针对猪蓝耳病病毒靶序列的内标序列和内标探针，并在探针上...; 刘东波张柳莹王睿

集在线荧光分析的连续流动反转录-聚合酶链式反应快速扩增检测食源致病性轮状病毒被引量：3: 2011年; 采用含RNA反转录(Reverse transcription,RT)和在线荧光分析的连续流动聚合酶链式反应(Poly-merase chain reaction,PCR)微流控技术检测食源致病性轮状病毒。此RT-PCR微流控装置以加热铜块组成恒温带,以聚四氟乙烯毛细管微通道为反应体系构建而成。采用循环水冷却退火区,此装置能获得低至31℃的退火温度,而且温度控制及其稳定性良好,因而能满足不同PCR的要求。为了充分体现PCR微流控技术的优越性,在线荧光分析被用于检测PCR产物。当流速为7.5 mm/s时,轮状病毒RNA的cDNA扩增和在线荧光分析能在约12 min完成(扩增约10 min,在线分析约2 min)。在此集成化的RT-PCR微流控装置上,1 h可完成轮状病毒RNA的RT-PCR以及其扩增产物的在线荧光分析,样品检出限达到6.4×104 copies/μL。; 章春笋李彧媛王海英

反转录-聚合酶链式反应检测促血管生成素-1和促血管生成素-2及Tie-2受体的mRNA在血管瘤组织中的表达及其意义: 2009年; 目的研究血管瘤组织中促血管生成素-1（Ang-1）、促血管生成素-2（Ang-2）及Tie-2受体的mRNA表达水平，探讨其在血管瘤血管生成中的作用与意义。方法用反转录-聚合酶链式反应（RT—PCR）的方法分别检测30例血管瘤组织（增生期血管瘤17例，消退期血管瘤13例）以及10例小儿正常皮肤组织中Ang-1mRNA、Ang-2mRNA及Tie-2mRNA的表达水平。用免疫组织化学方法检测血管瘤组织Ki-67蛋白的表达。结果增生期血管瘤组织中Ang-2mRNA及Tie-2mRNA表达水平高于消退期血管瘤组织（P〈0．01）。血管瘤组织中Ang-1mRNA表达为阴性。结论Ang—Tie-2体系表达失衡在血管瘤的发生发展过程中可能起重要的作用。; 洪帆庄福连王彪林经安; 关键词：血管瘤促血管生成素 TIE-2受体

禽白血病-肉瘤病毒的反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测: 应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)对二株禽白血病病毒(ALV)和一株劳斯肉瘤病毒(RSV)进行了检测试验。试验中,提取了病毒RNA,并使用三对ALVgp85基因引物对其进行了反转录、扩增,从而建立了ALV-RSV...; 范书才李虹肖睿; 关键词：PCR 禽白血病病毒劳斯肉瘤病毒

禽白血病—肉瘤病毒的反转录—聚合酶链式反应(RT-PCR)检测: 应用反转录—聚合酶链式反应(RT-PCR)对二株禽白血病病毒(ALV)和一株劳斯肉瘤病毒(RSV)进行了检测试验.试验中,提取了病毒RNA,并使用三对ALVgp85基因引物对其进行了反转录、扩增,从而建立了ALV-RSV...; 范书才李虹肖睿; 关键词：禽白血病病毒劳斯肉瘤病毒病毒检测

应用反转录-聚合酶链式反应对LH/CG受体在大鼠垂体中表达的研究: 1996年; 促黄体激素/绒毛膜促性腺激素(LH/CG)受体存在于睾丸和卵巢组织中.然而以往的研究都未报道有关LH/CG受体是否存在于垂体这一重要的内分泌腺体组织中.本研究利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),以大鼠垂体总RNA为模板,扩增LH/CG受体cDNA片段.结果表明:LH/CG受体cDNA不仅存在于卵巢组织中,同样也存在于垂体组织中,垂体组织LH/CG受体cDNA与卵巢组织受体cDNA类似,都是由外显子拼接而成,结果又表明:LH/CG受体cDNA在垂体组织中以较小分子结构(或同工型)形式存在.尽管在大鼠垂体组织中没有发现全长cDNA存在,但本研究提示我们:LH/CG受体分子在垂体组织中的形式可能是由一些不完整的cDNA片段表达而成,并且表达水平较低.; 杜晓岩JuiieEMercer; 关键词：垂体反转录-聚合酶链式反应

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