搜索到312篇“ 反式激活基因“的相关文章
- 乙型肝炎病毒X蛋白反式激活基因4在HepG2细胞凋亡中的作用及其机制
- 2019年
- 目的探讨在肝母细胞瘤HepG2细胞凋亡中乙型肝炎病毒X蛋白反式激活基因4(XTP4)的作用及其机制。方法在HepG2细胞中瞬时转染XTP4的表达质粒pcDNA3.1/myc-His(-)A-XTP4及XTP4基因的小干扰RNA及各自的阴性对照,48h后用蛋白质印迹法检测在HepG2细胞中XTP4的过表达和干扰表达情况;流式细胞术检测HepG2细胞凋亡;蛋白质印迹法检测各组HepG2细胞中凋亡相关蛋白P53、Bcl-2、Bax、Caspase-3表达水平,并计算Bcl-2/Bax比值;化学发光法检测HepG2细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的活性。计量资料以均值±标准差表示,两组间比较采用独立样本t检验。结果在HepG2细胞中成功实现XTP4蛋白的过表达和干扰表达。与对照组相比,在HepG2细胞中过表达XTP4可以使凋亡细胞数显著减少(P<0.05),Bcl-2/Bax比值增高(P<0.05),P53蛋白表达降低(P<0.05),Caspase-3蛋白表达降低,Caspase-3活性下降(P<0.05);而在HepG2细胞中用干扰RNA抑制XTP4表达可以使凋亡细胞数显著增加(P<0.05),Bcl-2/Bax比值降低(P<0.05),P53蛋白表达增加(P<0.05),Caspase-3蛋白表达增加,Caspase-3活性上升(P<0.05)。结论在HepG2细胞凋亡中XTP4具有抑制作用,其抑制HepG2细胞凋亡的作用可能是通过调节Bcl-2/Bax比值实现,P53蛋白可能参与其中。
- 刘俊英李涵刘洋时朝辉梁祖兰王玲慧张钰赵媛范玉梅吴斌于彦章
- 关键词：细胞凋亡HEPG2细胞BCL-2/BAX
- 乙型肝炎病毒X蛋白反式激活基因XTP4与肿瘤发生发展的关系
- 2017年
- 乙型肝炎病毒X蛋白反式激活基因XTP4是近年来发现的与肿瘤发生发展相关的新基因。众多研究显示XTP4基因表达异常与乳腺癌、前列腺癌、胃癌、结直肠癌、卵巢癌、非小细胞肺癌和肝细胞肝癌等肿瘤密切相关。XTP4基因在肿瘤过度增殖和转移侵袭、肿瘤分级与分期以及化疗耐药等过程中发挥作用。本文将对XTP4基因的结构、功能以及与肿瘤发生发展的关系进行综述,以利于后期对其功能进行深入研究。
- 邓秀娟韩铭成军梁跃东
- 关键词：肿瘤细胞过度增殖
- HBX蛋白反式激活基因XTP4抑制HepG2细胞凋亡被引量：2
- 2015年
- 目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBXAg)反式激活基因4(XTP4)对肝母细胞瘤细胞HepG2细胞凋亡的影响。方法构建XTP4基因的真核表达质粒pc DNA3.1/myc-His(-)A-XTP4(p XTP4)及化学合成XTP4基因的干扰RNA(si XTP4)后,分别将XTP4基因的真核表达质粒、干扰RNA及各自的阴性对照(NC、si NC)瞬时转染HepG2细胞中,48 h后进行以下实验:用Western blot验证XTP4在蛋白水平的过表达和干扰表达;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测Bcl-2、Bax蛋白水平并计算Bcl-2/Bax比值;化学发光法检测胱冬肽酶-3(caspase-3)的活性。结果成功构建了XTP4的真核表达质粒p XTP4、XTP4在蛋白水平过表达和干扰表达。与各自的阴性对照组相比,过表达XTP4的HepG2细胞中,Annexin V+细胞数显著减少(P<0.05),Bcl-2/Bax比值增高(P<0.05),胱冬肽酶-3活性下降(P<0.05);而干扰XTP4表达的HepG2细胞中,Annexin V+细胞数显著增加(P<0.05),Bcl-2/Bax比值降低(P<0.05),胱冬肽酶-3活性上升(P<0.05)。结论 XTP4具有抑制HepG2细胞凋亡的作用,可能是通过增加Bcl-2/Bax的比值实现。
- 时朝辉张梦然王丽丽刘顺爱梁璞吴君成军梁跃东
- 关键词：HEPG2细胞细胞凋亡
- HCV NS5A及其反式激活基因NS5ATP9对肝细胞凋亡的影响及机制研究
- 第一部分
HCV(Ib型)NS5A真核表达载体构建及凋亡相关基因表达谱芯片分析
目的：构建HCV(Ib型)NS5A真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)-HCVNS5A，研究NS5A蛋白对人肝癌细...
- 赵崇山
- 关键词：基因表达谱芯片肝细胞凋亡血清饥饿线粒体途径
- 文献传递
- 噬菌体展示技术在HBV前-S1蛋白反式激活基因1启动子DNA的结合蛋白筛选中的应用被引量：1
- 2012年
- 目的应用噬菌体展示技术筛选HBV前-S1蛋白反式激活基因1(PS1TP1)的启动子DNA结合蛋白,进一步阐述PS1TP1在慢性乙型肝炎发病机制中的作用。方法根据GenBank中的PS1TP1启动子DNA序列设计引物,运用PCR技术以人基因组DNA为模板,扩增获得PS1TP1启动子的DNA片段,并通过亚克隆方法构建真核报告载体pCAT3-PS1TP1p后转染HepG2细胞系,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测转染细胞中氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性,以验证所获得的DNA片段具有启动子活性;将PS1TP1启动子DNA片段进行固相化,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行筛选,将所获得的噬斑裂解液进行PCR扩增,测序后进行DNA序列分析和同源性生物信息学搜索。结果 pCAT3-PS1TP1p瞬时转染的HepG2细胞中CAT表达活性是对照组(pCAT3-Basic空载体)的32.9倍,是pCAT3-promoter的4.2倍,提示所获得的DNA片段具有启动子活性;经4轮筛选共得到阳性克隆18个,经PCR扩增、测序,并经生物信息学分析后筛选出PS1TP1的启动子DNA结合蛋白编码基因共15个。结论 PCR扩增后所获得的PS1TP1启动子DNA片段具有顺式激活下游基因表达的作用,为研究PS1TP1启动子功能奠定了基础;噬菌体展示筛选结果提示PS1TP1可能参与了细胞周期调节、MAPK信号转导通路,并且有可能在辅助性T细胞亚群的发育和B细胞分化过程中发挥作用。
- 纪冬成军韩萍邵清陈国凤
- 关键词：前-S1蛋白转录启动子DNA结合蛋白质类
- 应用抑制性消减杂交技术克隆PS1TP1的反式激活基因
- 2011年
- 目的 应用抑制性消减杂交（SSH）技术构建乙型肝炎病毒（HBV）前-S1蛋白（preS1）反式激活蛋白1（PS1TP1）的相关基因cDNA消减文库,克隆PS1TP1反式激活相关基因,以期发现PS1TP1蛋白反式激活作用的靶位点.方法 以PS1TP1表达质粒PcDNA3.1（-）-PS1TP1转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1（-）为对照;提取mRNA并逆转录为cDNA,进行两次消减杂交及两次抑制性PCR,将产物与pGEM-Teasy载体连接,构建cDNA消减文库.结果 文库扩增后得到90个阳性克隆,随机挑选43个克隆测序,并进行同源性分析,获得12种编码基因,其中10个为已知功能基因,另外2个为未知功能序列.结论 成功构建PS1TP1反式激活的相关基因cDNA消减文库,为今后进一步分析、研究病毒蛋白的致病机制奠定基础.为进一步研究PS1TP1蛋白的功能及其在HBV感染中的分子生物学机制提供理论依据和研究方法.
- 黄辉煌纪冬王嗣予徐婉珍贾志远李克
- 关键词：蛋白质前体
- 肝细胞内人类次要组织相容性抗原-HA8蛋白反式激活基因的筛选
- 2011年
- 目的应用抑制性消减杂交（SSH）技术及生物信息学技术筛选肝细胞内人类次要组织相容性抗原-HA8（HLA-HA8）的反式激活基因。方法以HLA-HA8基因表达质粒pcDNA3.1（-）-HLA-HA8和空载体pcDNA3.1（-）转染HepG2细胞,提取mRNA并反转录合成双链cDNA（dscDNA）,分别标记为Tester和Driver;经RsaI酶切后,将Tester cDNA分成两组,分别与两种不同的接头adapter 1和adapter 2衔接,再与Driver cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性聚合酶链反应,将产物与pGEM-T easy载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠埃希菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析。结果成功构建HLA-HA8反式激活基因差异表达cDNA消减文库。扩增后得到101个阳性克隆,菌落PCR分析均得到200~1000bp的插入片段。随机挑选其中28个阳性片段测序,同源分析结果显示,共获得16种编码基因,其中4个功能未知。结论 HLA-HA8基因反式调节基因与细胞结构和生长、物质及能量代谢、物质转运和信号转导密切相关,为HLA-HA8的功能以及HBV感染慢性化机制研究提供了新的思路。
- 王琦蓝贤勇李越武会娟张丽娟成军
- 关键词：次要组织相容性抗原反式激活
- HCV NS5A反式激活基因NS5ATP13对肝癌细胞生长的影响被引量：1
- 2011年
- 目的验证HCV NS5A对NS5ATP13基因反式激活作用,并检测NS5ATP13基因表达产物对Huh-7细胞系生长的影响。方法应用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法验证HCV NS5A对NS5ATP13基因的反式激活作用,构建NS5ATP13与绿色荧光蛋白(GFP)的融合蛋白表达载体,用荧光显微镜观察NS5ATP13-GFP融合蛋白在细胞的分布。结果 HCV NS5A可反式激活NS5ATP13基因的表达,NS5ATP13-GFP融合蛋白荧光主要集中在细胞核质,转染细胞出现大量双核及多核现象,活细胞发光法检测NS5ATP13具有促进细胞增殖的作用。结论 NS5ATP13基因生物学功能的研究,为HCV致肝纤维化和肝癌的病理机制研究提供新的思路。
- 袁菊成军洪源陶明亮李康石磊
- 关键词：反式激活细胞定位细胞增殖
- 丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5A反式激活基因4剪切体Ns5atp4a基因原核表达载体的构建和表达
- 2010年
- 目的构建丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5A反式激活基因4剪切体(NS5ATP4A)的原核表达载体并进行表达。方法用PCR扩增NS5ATP4A基因,克隆入pET32a(+)质粒,构建pET32a(+)-NS5ATP4A表达重组体,转化DH5α和BL21菌,经IPTG诱导。SDS-PAGE分析,Western Blot验证蛋白带。结果成功构建大肠杆菌原核表达载体。经IPTG诱导,得到了目的蛋白分子量为35kD,用Western Blot证实其具有良好的抗原性。结论构建原核表达载体pET32a(+)-NS5ATP4A,为抗原的制备及临床检测奠定了基础。
- 陈立冬成军洪源张连峰韩莉郭江
- 关键词：病毒非结构蛋白质类肝炎病毒
- 丙型肝炎病毒核心蛋白反式激活基因2表达产物的亚细胞定位
- 2010年
- 目的研究HCV核心蛋白反式激活基因2(TAHCCP2)在细胞内的表达及表达产物的亚细胞定位。方法构建HBeAgTP基因的绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-C1-TAHCCP2,转染HepG2细胞,24h后荧光显微镜下观察表达蛋白的亚细胞定位。结果成功构建出TAHCCP2基因的绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-C1-TAHCCP2,其表达的蛋白定位于细胞核。结论TAHCCP2基因可表达TAHCCP2蛋白且定位于细胞核。
- 王建军赵平靳雪源成军卿松
- 关键词：丙型肝炎病毒
相关作者
- 成军
- 作品数：1,430被引量：5,878H指数：36
- 供职机构：中国人民解放军
- 研究主题：丙型肝炎病毒 乙型肝炎病毒 反式激活基因 肝炎病毒 克隆
- 刘妍
- 作品数：610被引量：1,590H指数：29
- 供职机构：吉林大学
- 研究主题：乙型肝炎病毒 丙型肝炎病毒 反式激活 反式激活基因 克隆
- 纪冬
- 作品数：225被引量：890H指数：14
- 供职机构：中国人民解放军总医院
- 研究主题：丙型肝炎病毒 反式激活基因 乙型肝炎病毒 抑制性消减杂交技术 反式激活
- 王建军
- 作品数：173被引量：512H指数：16
- 供职机构：中国人民解放军
- 研究主题：丙型肝炎病毒 乙型肝炎病毒 反式激活基因 克隆化研究 反式调节基因
- 张黎颖
- 作品数：112被引量：187H指数：7
- 供职机构：北京地坛医院
- 研究主题：抑制性消减杂交技术 反式激活基因 反式调节基因 乙型肝炎病毒 丙型肝炎病毒
