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芥菜花叶病毒RPA-LFD可视化快速检测的试剂、试剂盒及方法
本发明公开了一种芥菜花叶病毒RPA‑LFD可视化快速检测的试剂、试剂盒及方法,该试剂中包括上游引物、下游引物组成的特异性引物对和探针,其中上游引物选自SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示核苷酸序列;其中下...
于翠费静于子翔田沂民李友军
芥菜花叶病毒RPA-LFD可视化快速检测的试剂、试剂盒及方法
本发明公开了一种芥菜花叶病毒RPA‑LFD可视化快速检测的试剂、试剂盒及方法,该试剂中包括上游引物、下游引物组成的特异性引物对和探针,其中上游引物选自SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示核苷酸序列;其中下...
于翠费静于子翔田沂民李友军
一种用于芥菜花叶病毒及菜豆荚斑驳病毒检测的DPO-PCR引物对及其应用
本发明涉及病毒检测领域,尤其涉及一种用于芥菜花叶病毒及菜豆荚斑驳病毒检测的DPO‑PCR引物对及其应用。本发明在多重PCR中引入DPO引物技术,可以大大提高多重PCR技术的灵敏度及特异性。本发明建立的芥菜花叶病毒及菜...
袁俊杰马新华卢乃会杨卓瑜魏霜刘芳李冠斯谢小燕陈文
微滴数字RT-PCR检测芥菜花叶病毒被引量:2
2021年
为建立一种快速、灵敏、特异的定量检测芥菜花叶病毒(arabis mosaic virus,ArMV)的微滴数字RT-PCR方法,根据ArMV外壳蛋白基因保守序列设计了特异性引物和探针,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进行评估。结果表明,该数字RT-PCR检测方法的特异性好,与其他对照病毒均无交叉反应;检测灵敏度可达0.56 copies/μL;3次重复试验变异系数为0.74%,重复性良好。本实验建立的方法适用于实际样品中ArMV的快速定量检测。
赵晓丽杨术江陈红运向军张永江邓丛良
关键词:南芥菜花叶病毒实时荧光RT-PCR
双重DPO-RT-PCR检测芥菜花叶病毒及菜豆荚斑驳病毒
2021年
针对芥菜花叶病毒(Arabis mosaic virus,Ar MV)及菜豆荚斑驳病毒(Bean pod mottle virus,BPMV)基因组中特异性较高的序列,分别设计了特异性DPO(dual priming oligonucleotide)引物,建立了一种快速检测这两种植物病毒的多重DPO-RT-PCR方法,并评价其特异性、灵敏度及退火温度敏感性。设计的DPO引物特异性较强,Ar MV和BPMV可分别扩增出217 bp与800 bp的特异性条带,检测灵敏度均达0.02 ng/μL。该检测方法对退火温度不敏感。实际样本及模拟样本的检测结果均与国家标准方法一致。本研究建立的检测方法可应用于Ar MV、BPMV的快速筛查,为口岸检疫监管提供技术支撑。
袁俊杰马新华谢小燕卢乃会杨卓瑜陈文何群赵玲龙阳
关键词:南芥菜花叶病毒菜豆荚斑驳病毒
芥菜花叶病毒衣壳蛋白的克隆、原核表达和多克隆抗体制备被引量:2
2021年
为开发百合中芥菜花叶病毒(Arabis mosaic virus,ArMV)的血清学检测技术及研究ArMV的致病机理,原核表达ArMV衣壳蛋白(coat protein,CP),纯化并制备其多克隆抗体。以侵染东方百合杂交品种‘木门’(‘Conca D’or’)的ArMV基因组为模板,克隆ArMV CP基因全长,构建ArMV CP基因原核表达载体,转化E.coli BL21(DE3)原核表达ArMV CP蛋白,并以纯化ArMV CP蛋白为抗原制备兔抗多克隆抗体,Western blot鉴定多克隆抗体的特异性。结果表明:克隆获得百合ArMV CP序列(GenBank登录号:MT323117)全长,其长度为1515 bp,与已知的ArMV CP基因核苷酸序列相似性最高达到93.6%,氨基酸序列相似性最高达到98.2%;SDS-PAGE表明CP蛋白在E.coli BL21(DE3)中大量表达,蛋白相对分子质量为56 ku;Western blot结果显示抗体能够特异性结合ArMV CP蛋白,具有良好的特异性。
苏学思张玉宝王亚军郭志鸿邱阳唐国亮
关键词:百合南芥菜花叶病毒衣壳蛋白原核表达多克隆抗体
检测芥菜花叶病毒的交叉引物等温扩增引物组、试剂盒及应用
本发明公开了一种检测芥菜花叶病毒的交叉引物等温扩增引物组、试剂盒及应用。针对检测芥菜花叶病毒存在的问题,本发明设计并筛选了具有高特异性的检测芥菜花叶病毒的交叉引物等温扩增引物组,并进一步设计了试剂盒和检测方法。本发...
张蓬军杨倩倩 王道俞晓平 孙凯刘光富 尹传林
一种用于芥菜花叶病毒及菜豆荚斑驳病毒检测的DPO-PCR引物对及其应用
本发明涉及病毒检测领域,尤其涉及一种用于芥菜花叶病毒及菜豆荚斑驳病毒检测的DPO‑PCR引物对及其应用。本发明在多重PCR中引入DPO引物技术,可以大大提高多重PCR技术的灵敏度及特异性。本发明建立的芥菜花叶病毒及菜...
袁俊杰马新华卢乃会杨卓瑜魏霜刘芳李冠斯谢小燕陈文
检测百合芥菜花叶病毒的试剂盒及检测方法
一种特异性检测百合芥菜花叶病毒ArMV的IC‑RT‑LAMP试剂盒及其检测方法,试剂盒主要包括特异性ArMV抗体IgG、特异性RT反向引物ArMV‑R、特异性LAMP引物组、第一链cDNA合成试剂、LAMP扩增反应试剂...
张玉宝王亚军谢忠奎杨果邱阳郭志鸿王乐
芥菜花叶病毒核酸探针杂交快速检测方法
本发明公开了一种芥菜花叶病毒核酸探针杂交快速检测方法,其特征在于包括:A、百合总RNA的提取;B、RNA检测;C、RT?PCR扩增步骤;D、RT反转录;E、PCR扩增;扩增所用引物包括:上游引物ArMV?11:5’?C...
陈定虎杨雷亮管维杨志方吴颖儿

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