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模拟失重下褪黑素对成骨细胞分化功能的影响: 2025年; 目的探究褪黑素(MT)在模拟失重条件下对成骨细胞分化功能的影响,并进一步探索MT对YTH N6甲基腺苷RNA结合蛋白F2(YTHDF2)的调控作用以及MT是否通过YTHDF2影响成骨细胞分化,为航天失重性骨丢失问题寻求新的干预靶点。方法利用si-YTHDF2或pEX-YTHDF2转染MC3T3-E1细胞,通过qRT-PCR和Western blotting测定MC3T3-E1细胞分化指标RUNX2、COL1A1的表达变化;利用2D回转器培养MC3T3-E1细胞,探究模拟失重下YTHDF2及成骨细胞分化基因RUNX2 mRNA和蛋白含量的变化;向MC3T3-E1细胞转染pEX-YTHDF2后2D回转48 h,通过qRT-PCR和Western blotting测定RUNX2、COL1A1的表达量;设定浓度梯度为10、50、100 nmol/L和1、100μmol/L,研究MT对成骨细胞分化功能的浓度效应;用含MT(100 nmol/L)的培养基回转培养MC3T3-E1细胞48 h,检测YTHDF2的表达变化;转染si-YTHDF2后给予MT或阴性对照,检测分化指标RUNX2、COL1A1,通过碱性磷酸酶(ALP)染色及ALP活性检测验证分化功能变化。结果转染si-YTHDF2显著抑制MC3T3-E1细胞分化,转染pEX-YTHDF2促进MC3T3-E1细胞分化(P<0.05);在模拟失重下MC3T3-E1细胞的YTHDF2 mRNA和蛋白表达水平均呈现明显的低表达状态(P<0.01);模拟失重下转染pEX-YTHDF2部分缓解MC3T3-E1细胞分化功能降低(P<0.05);MT处理可缓解模拟失重导致的YTHDF2 mRNA和蛋白表达下降(P<0.05);转染si-YTHDF2后给予MT处理,分化指标高于si-YTHDF2+DMSO组,但低于si-NC组(P<0.05)。结论YTHDF2促进成骨细胞分化;模拟失重抑制YTHDF2表达且过表达YTHDF2可部分挽救模拟失重导致的成骨细胞分化抑制;MT可缓解模拟失重下YTHDF2表达降低;MT正调控成骨细胞分化能力,部分依赖于促进YTHDF2的表达。本研究首次揭示了MT/YTHDF2轴在模拟失重影响成骨细胞分化中发挥调控的作用,有望为失重性骨丢失防护提供潜在的新策略。; 孙权徐丽群余亭霏刘景春胡泽兵张舒石菲; 关键词：模拟失重褪黑素成骨细胞分化 MC3T3-E1细胞

一种兼具导电、抗炎及促成神经分化功能的多层集合载细胞神经修复导管及其制备方法: 本发明公开了一种兼具导电、抗炎及促成神经分化功能的多层集合载细胞神经修复导管及其制备方法。制备方法为：1)制备掺杂有石墨烯的PLGA纤维，对其进行编织得到一层圆筒状纤维网；2)配制混合有负载促成神经生长因子的微球和二氧化...; 金晓强严煜王旨意付勇滕王锶源陈家煜

一种具有诱导细胞趋电迁移及成神经分化功能的人工耳蜗多孔凝胶电极及其制备方法: 本发明公开了一种具有诱导细胞趋电迁移及成神经分化功能的人工耳蜗多孔凝胶电极及其制备方法。包括：1)利用乳化‑凝胶法及浸渍法制备含有神经营养因子的明胶微球；2)结合沉淀法制备介孔二氧化锰(MMD)，并在其孔隙内超声负载促神...; 严煜付勇王旨意金晓强

WDR63促进人根尖牙乳头干细胞成神经分化功能: 2024年; 目的:研究WD重复结构域63(WDR63)对人根尖牙乳头干细胞(SCAPs)体外成神经分化能力的作用。方法:通过实时荧光定量PCR检测未转染慢病毒SCAPs中WDR63基因在成神经分化诱导3、6、9 d的表达变化,利用慢病毒转染分别获得WDR63稳定过表达和敲低的SCAPs,通过类神经球形成实验对各组SCAPs进行神经分化诱导,对类神经球的直径进行定量分析,免疫荧光染色实验检测SCAPs中巢蛋白(Nestin)和βⅢ-微管蛋白(βⅢ-tubulin)的表达,实时荧光定量PCR实验检测神经分化相关指标βⅢ-tubulin、神经源性分化蛋白(NeuroD)、神经细胞黏附分子(NCAM)和Nestin基因的表达。结果:未转染慢病毒SCAPs中WDR63的表达量在成神经分化后的3、6、9 d逐渐增加(P<0.05);过表达WDR63后,WDR63基因(P<0.001)和蛋白表达增加,神经球直径增加(P<0.01),Nestin和βⅢ-tubulin神经球样细胞荧光强度增加(P<0.01),βⅢ-tubulin、NeuroD、NCAM和Nestin基因表达升高(P<0.05);敲低WDR63后,WDR63基因(P<0.01)和蛋白的表达降低,神经球直径降低(P<0.05),Nestin和βⅢ-tubulin神经球样细胞荧光强度减少(P<0.05),βⅢ-tubulin、NeuroD、NCAM和Nestin基因表达降低(P<0.05)。结论:WDR63可促进SCAPs的成神经分化功能。; 周家玮范志朋

lncRNA SNHG8抑制颌骨骨髓间充质干细胞成骨分化功能: 2024年; 目的:研究lncRNA SNHG8对颌骨骨髓间充质干细胞(JBMMSCs)成骨分化的影响。方法:通过慢病毒转染敲除或过表达JBMMSCs中lncRNA SNHG8,实时荧光定量PCR检测基因表达,碱性磷酸酶(ALP)活性测定、茜素红染色、钙离子定量以及Western blot检测JBMMSCs的体外成骨分化能力,活性氧(ROS)染色检测ROS含量;lncRNA SNHG8敲低后的JBMMSCs与HA/TCP材料混合并植入裸鼠皮下,苏木素-伊红(HE)染色、Masson染色、免疫荧光染色检测JBMMSCs的体内成骨分化能力。结果:体外JBMMSCs中lncRNA SNHG8敲低后的ALP活性及体外矿化能力增强(P<0.01),骨涎蛋白(BSP)蛋白表达条带增强,lncRNA SNHG8过表达后ALP活性及体外矿化能力减弱(P<0.01),BSP蛋白表达条带减弱;敲除lncRNA SNHG8可上调MAPK通路中磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK),过表达SNHG8可抑制p-JNK表达;敲除lncRNA SNHG8可增强胞内ROS染色,过表达lncRNA SNHG8可抑制胞内ROS染色。lncRNA SNHG8敲除后的体内新骨形成增加(P<0.01),BSP、骨钙素(OCN)蛋白表达条带增强。结论:lncRNA SNHG8可通过JNK信号通路抑制JBMMSCs体内外成骨分化功能。; 刁展秋刘华杨昊清刘惠娜范志朋; 关键词：成骨分化 C-JUN氨基末端激酶

具有促进干细胞体外成骨分化功能碳量子点纳米材料的制备和应用研究: 裴素莹

奥氮平对乳腺癌相关巨噬细胞增殖与分化功能的影响被引量：1: 2024年; 目的探讨奥氮平对乳腺癌细胞共培养体系中人急性髓系白血病细胞系THP-1细胞增殖和分化功能的影响。方法体外培养THP-1细胞、人乳腺癌MDA-MB-231细胞,建立THP-1与MDA-MB-231共培养组,用CCK-8法检测奥氮平处理后的THP-1单独组、共培养组中THP-1的活性变化;用qRT-PCR法检测奥氮平对佛波酯诱导的THP-1单独组、共培养组中THP-1表面分子CD68、CD80、CD163的表达,以及炎症因子IL-1β、IL-6、IL-12、TGF-α、TGF-β和IL-10的表达,同时进一步检测巨噬细胞极化相关miRNA分子miRNA9、miRNA155和miRNA34a的表达。结果奥氮平能抑制THP-1单独组和共培养组中THP-1的增殖活性(P<0.05);在佛波酯诱导THP-1向巨噬细胞分化的研究中,奥氮平能够显著提高THP-1单独组CD68分子的表达(P<0.05),而在共培养组中CD68、CD80、CD163的表达则均显著升高(P<0.05)。在THP-1单独组中,奥氮平仅能够促进IL-12的表达;在共培养组中,奥氮平使CCL2、CXCL10、IL-1β、IL-10、IL-6、IL-12、TNF-α表达水平显著升高(P<0.05)。在巨噬细胞分化相关miRNA的研究中,在奥氮平作用下,THP-1单独组中miR155和Let7c的表达显著升高(P<0.05),miR146、miR9和miR34a的表达变化无差异;在与MDA-MB-231共培养条件下,miR34a和Let7c显著升高(P<0.05)。结论在肿瘤细胞存在的情况下,奥氮平可参与肿瘤相关巨噬细胞表面分子、炎症因子以及巨噬细胞极化相关miRNA分子表达的调节,这为进一步利用奥氮平治疗乳腺癌提供了新思路。; 孟娟李东辉高元慧刘梅李建旺; 关键词：奥氮平乳腺癌分化

衰老清除药物对规模化长期培养中牙髓干细胞增殖和分化功能的影响被引量：1: 2024年; 目的探讨间断清除衰老细胞对规模化长期培养中牙髓干细胞(dental pulp stem cell,DPSC)增殖和分化功能的影响,探索维持体外培养DPSC年轻状态的方法。方法从四川大学华西口腔医院口腔颌面外科提供的因正畸或阻生拔除的健康恒牙中提取人DPSC,模拟DPSC体外规模化长期培养过程,并对年轻DPSC(第5代,P5)、衰老DPSC(第25代,P25)进行细胞衰老β-半乳糖苷酶染色、集落形成实验、成骨分化诱导茜素染色实验。利用细胞衰老β-半乳糖苷酶染色比较5种衰老清除药物[那维克拉(ABT-263)、姜黄素、达沙替尼、非瑟酮、槲皮素]的清除效率,选择清除效率最高的药物进行后续实验。选取衰老细胞占比开始显著增多的代数,给予间隔3代、累计3次的衰老清除药物处理,对对照组和药物处理组细胞进行荧光细胞衰老β-半乳糖苷酶染色、实时荧光定量PCR(qPCR)、集落形成实验、细胞划痕实验、成骨诱导茜素红染色实验。体内验证使用裸鼠皮下异位成骨实验,对移植物进行HE染色、碱性磷酸酶(ALP)免疫组织化学染色。结果衰老细胞占比随培养周期延长而增加,相比年轻DPSC,衰老DPSC的增殖和成骨分化能力减退(P<0.05)。与年轻DPSC相比,衰老DPSC衰老相关蛋白p21、p16^(INK4a)、白细胞介素(IL-6)mRNA及增殖相关蛋白Ki67 mRNA表达量均发生显著改变(P<0.001)。5种衰老清除药物中,ABT-263有较高的清除效率(P<0.05)。培养过程中间断使用ABT-263后,药物处理组衰老细胞占比[(6.72±2.34)%]显著小于对照组[(31.82±0.57)%](P<0.001);qPCR证实,药物处理组p21、p16^(INK4a)、IL-6 mRNA表达量均显著小于对照组(P<0.05),Ki67 mRNA表达量显著大于对照组(P<0.01)。药物处理组的细胞愈合能力、成骨分化能力均显著大于对照组(P<0.05)。体内实验结果显示,药物处理组DPSC移植体内后相对新生骨质面积[(2.36±0.48)%]显著大于对照组[(1.00±0.46)%](P<0.05)。结论ABT-2; 王冠玉廖立田卫东; 关键词：牙髓干细胞细胞衰老细胞培养技术

长时间血清饥饿胁迫对姜曲海猪SMSCs自噬的发生、代谢及分化功能的影响: 动物个体在生长发育过程中需要摄入一定的营养物质来维持正常生长,能量摄入不足则可能会影响动物机体代谢,本研究团队前期研究中发现饥饿胁迫可以诱发猪骨骼肌卫星细胞(Skeletal muscle satellite cells...; 范博钧; 关键词：骨骼肌卫星细胞血清饥饿自噬代谢

一种具有激活哺乳动物干细胞分化功能的菌株、组合物及其应用: 本发明公开了一种具有激活哺乳动物干细胞分化功能的菌株、组合物及其应用。本发明菌株生物活性高，酸性pH耐受力强，来源于人或小鼠等哺乳动物胃肠道微生物。干细胞实验测定显示，该菌株对干细胞进行干预后，干细胞明显分化。在动物伤口...; 丁辰盛韧高艺洳郑少钦

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