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叔丁基对苯二酚对脑缺血再灌注后大鼠线粒体通路第2个天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶激活物和凋亡抑制蛋白表达的影响被引量：1: 2021年; 目的观察叔丁基对苯二酚对脑缺血再灌注后大鼠线粒体通路第2个天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶激活物(Smac)和凋亡抑制蛋白(XIAP)表达的影响。方法2019年3-12月选取45只健康雄性SD大鼠,对大鼠进行随机编号并采用随机数表法分为假手术组、模型组与叔丁基对苯二酚组。通过结扎大鼠左颈动脉法建立脑缺血再灌注模型,并检测各组大鼠神经功能评分,剔除造模失败大鼠,每组各保留10只大鼠。分别于大鼠脑缺血再灌注后0.5 h、12 h对各组大鼠进行药物灌胃治疗,叔丁基对苯二酚组采用12.5 mg/kg叔丁基对苯二酚灌胃,假手术组与模型组采用等体积0.9%氯化钠注射液灌胃。再灌注24 h后,检测各组大鼠神经功能评分,之后处死大鼠,断头取脑。通过TUNEL法检测各组大鼠神经细胞凋亡情况;采用酶联免疫吸附法检测各组大鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)表达水平;通过免疫组化法与蛋白质印迹法(Western blot)分别检测大鼠XIAP、Smac阳性细胞计数与蛋白表达水平。结果叔丁基对苯二酚组大鼠神经功能评分为(1.36±0.49)分,明显低于模型组的(3.73±0.97)分(t=6.896,P<0.001),缺血侧皮质区仍可见大量神经细胞凋亡,但数量少于模型组。模型组大鼠脑组织SOD水平明显低于假手术组,MDA、TNF-α、IL-1β水平明显高于假手术组[SOD:(51.94±3.46)U/mg<(70.68±2.67)U/mg,t=13.560,P<0.001;MDA:(5.69±0.78)nmol/mg>(1.20±0.96)nmol/mg,t=11.479,P<0.001;TNF-α:(89.36±9.84)pg/mg>(40.53±4.35)pg/mg,t=14.353,P<0.001;IL-1β:(41.35±6.79)pg/mg>(17.22±2.31)pg/mg,t=10.639,P<0.001]。叔丁基对苯二酚组大鼠脑组织SOD水平相对模型组明显上调,MDA、TNF-α、IL-1β水平明显下降[SOD:(51.94±3.46)U/mg<(68.84±5.03)U/mg,t=8.754,P<0.001;MDA:(5.69±0.78)nmol/mg>(2.46±0.48)nmol/mg,t=11.153,P<0.001;TNF-α:(89.36±9.84)pg/mg>(57.64±6.22)pg/mg,t=8.617,P<0.001;IL-1β:(41.35�; 曾超陈静刘文兵梁康李辉王静马睿杰; 关键词：叔丁基对苯二酚线粒体凋亡抑制蛋白质类氧化性应激

银杏叶提取物降低活性氧水平并激活JNK信号通路诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡机制的研究被引量：1: 2021年; 目的:研究银杏叶提取物(金纳多,Ginaton)对人喉癌细胞的诱导凋亡作用及其分子机制。方法:体外培养人喉癌Hep-2细胞,用金纳多以时间梯度和浓度梯度的方式处理对数生长期人喉癌Hep-2细胞,利用细胞计数试剂盒(CCK)-8实验检测金纳多对Hep-2细胞的增殖抑制作用,利用流式细胞术检测细胞凋亡情况及细胞中活性氧(ROS)水平变化,利用蛋白质免疫印迹法(Western-blot)检测凋亡和信号通路相关蛋白表达情况。结果:金纳多能够以时间依赖性和浓度依赖性的方式抑制人喉癌Hep-2细胞增殖;丙二醛(MDA)水平以时间依赖性的方式逐渐降低,处理24 h降低为2.98 μmol/g;而超氧化物歧化酶(SOD)的水平以时间依赖性的方式逐渐升高,处理24 h上升为90.35 U/g,ROS水平以时间依赖性的方式逐渐降低,处理24 h降低为18.7%,与0 h相比差异均有统计学意义( F=14.98、19.65、11.47,均 P<0.001);金纳多处理3、6、12、24 h后,磷酸化氨基末端蛋白激酶(p-JNK)的表达量依次增长为1.98、2.57、2.91、3.28,呈现出时间依赖性升高,与0 h相比差异有统计学意义( F=16.37, P<0.001)。结论:金纳多在体外能有效抑制人喉癌Hep-2细胞增殖,诱导细胞凋亡,其作用可能与调节细胞中ROS水平并激活JNK信号通路有关。; 林海鸿谢丹丹胡俊潘兆虎; 关键词：银杏叶提取物细胞凋亡凋亡抑制蛋白质类

抗凋亡蛋白ARC对人主动脉血管平滑肌细胞凋亡的影响被引量：1: 2020年; 目的探讨抗凋亡蛋白ARC对人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC)凋亡的影响。方法体外培养HA-VSMC,通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测ARC在HA-VSMC中的表达水平,以及HA-VSMC经H2O2时间梯度处理后ARC的表达量随着时间的变化;经合成的ARC过表达的腺病毒(Ad-ARC)处理HA-VSMC 24 h后,通过Western blot方法检测ARC在HA-VSMC中的过表达情况;Ad-ARC和H2O2同时处理HA-VSMC,通过caspase3/7活性检测实验和锥虫蓝染色实验检测细胞的凋亡情况。结果RT-qPCR结果显示,与H9c2、HAEC、KEK293相比,ARC在HA-VSMC中表达相对较高(F=84.50,P<0.05);RT-qPCR结果显示,在H2O2时间梯度处理以后,随着时间的推移HA-VSMC中ARC的表达量越来越低(F=8.83,P<0.05);Western blot方法检测结果显示,与对照组和β-gal组进行比较,Ad-ARC组HA-VSMC中ARC的表达量显著上调(F=296.00,P<0.01);caspase3/7活性检测实验和锥虫蓝染色实验检测结果显示,与经过H2O2处理组相比,Ad-ARC明显抑制了H2O2诱导的HA-VSMC的凋亡(F=55.46、190.10,P<0.05)。结论抗凋亡蛋白ARC在HA-VSMC中高表达,过表达ARC可抑制H2O2诱导的HA-VSMC的凋亡。; 刘梦馨杨茜张京王建勋; 关键词：血管主动脉凋亡抑制蛋白质类细胞凋亡体外研究

中介素对急性肾衰竭的肾脏保护作用: 2020年; 目的探讨中介素在急性肾衰竭病人血清中的表达及其对肾脏的保护机制。方法选取焦作市第二人民医院2015年12月至2018年6月间确诊的急性肾衰竭病人45例和健康对照组30例,采用酶联免疫吸附试验检测血清中介素水平,寻找血清中中介素水平与急性肾衰竭的相关性。另外,建立大鼠肾小管上皮细胞(NRK⁃52E)缺氧/复氧模型,模拟急性肾衰竭肾脏缺血再灌注过程,MTT法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,RT⁃PCR和蛋白质印迹法检测自噬标志蛋白beclin⁃1、微管相关蛋白轻链3(LC3)和磷脂酰肌醇3⁃激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(phosphatidylinositol 3⁃kinase/protein kinase B/mam⁃malian target of rapamycin,PI3K/Akt/mTOR)信号相关蛋白表达水平,以进一步探索中介素对肾脏的保护作用。结果急性肾衰竭病人血清中中介素表达水平明显高于健康对照组者。大鼠肾小管上皮细胞经过缺氧/复氧处理后,细胞的存活率为(45.3±4.5)%,与对照组(100±1.4)%相比显著下降(P<0.05)。采用不同浓度的中介素(2μmol/L、4μmol/L、6μmol/L)对细胞进行干预后,细胞存活率分别为(55.9±2.6)%,(75.4±3.2)%,和(86.7±2.9)%,与缺氧/复氧模型组相比显著上升(P<0.05)。细胞在缺氧再复氧后发生了严重的细胞凋亡现象,凋亡率为(42.3±3.6)%,与对照组(10.2±1.7)%相比显著上升(P<0.05),而经过中介素(4μmol/L)预孵育4 h的细胞凋亡率为(27.6±3.1)%,与缺氧/复氧模型组相比显著下降(P<0.05)。随着中介素浓度升高,PI3K/Akt/mTOR信号通路关键蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.05),beclin⁃1、LC3⁃Ⅱ/LC3⁃Ⅰ表达量升高,细胞自噬水平显著升高;与中介素单独处理组相比,PI3K抑制剂LY290042与中介素(2μmol/L)联合用组,PI3K、Akt、mTOR磷酸化水平极显著下降(P<0.05),beclin⁃1、LC3⁃Ⅱ/LC3⁃Ⅰ表达量极显著上升,细胞自噬水平极显著升高。结论中介素在急性肾衰竭病人血清中高; 崔艳丽何利珍李小亮; 关键词：凋亡抑制蛋白质类中介素

高海拔地区藏族和汉族乳腺浸润性导管癌凋亡相关蛋白及凋亡指数的研究被引量：1: 2019年; 目的探讨世居青海的藏汉族人乳腺浸润性导管癌组织中Bcl-2、Bax及Caspase-3和凋亡指数(AI)的表达差异。方法采用免疫组织化学法检测藏族和汉族各60例乳腺浸润性导管癌中Bcl-2、Bax及Caspase-3蛋白的表达;采用原位DNA缺口末端标记法检测凋亡指数。结果藏族、汉族乳腺浸润性导管癌组织中Bcl-2的表达率分别为52.2%和38.3%,Bax表达率分别为76.7%和61.7%,Caspase-3表达率分别为60.0%和58.3%,藏族、汉族乳腺浸润性导管癌组织中AI阳性率分别为61.2%和60.0%,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论世居青海的藏族和汉族乳腺浸润性导管癌组织中Bcl-2、Bax及Caspase-3的表达无差异,且乳腺浸润性导管癌组织中AI表达比较也无差异。; 杨娟李亚飞宋晓燕袁青玲祁玉娟; 关键词：凋亡抑制蛋白质类

ShRNA-survivin基因对肝癌Huh7细胞增殖、迁移和凋亡的影响被引量：1: 2019年; 目的探讨生存素(survivin)基因对肝癌Huh7细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法将肝癌细胞分为空白对照组(A组)、空白载体病毒组(B组)和ShRNA-survivin慢病毒组(C组),构建ShRNA-survivin慢病毒载体,通过RT-qPCR检测凋亡因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)以及Caspase-3 mRNA的表达量;通过CCK-8实验检测肝癌Huh7细胞增殖能力;通过Transwell小室实验检测肝癌Huh7细胞迁移能力;通过AV-PI凋亡试剂盒检测肝癌Huh7细胞的凋亡情况。结果 A、B、C组survivin mRNA的相对表达量分别为1.000±0.000、1.079±0.011、0.421±0.097,A、B组与C组比较差异具有显著统计学意义(F=15.984,q=8.141、3.257,P<0.05),Caspase-3和Caspase-9的mRNA表达量与survivin的mRNA表达量趋势相同;A、B、C组中透过分子筛的细胞数比较差异有显著性(F=31.982,P<0.05);A、B组与C组比较差异均有显著意义(q=7.153、9.074,P<0.05);A、B、C组细胞的增殖率比较差异有显著意义(F=23.983,P<0.05);A、B组与C组比较差异均有显著意义(q=10.322、9.886,P<0.05);A、B、C组细胞的凋亡率比较差异有显著意义(F=30.009,P<0.05);A、B组与C组比较差异均有显著意义(q=9.531、8.001,P<0.05)。结论 ShRNA-survivin对肝癌Huh7细胞的增殖、迁移有抑制作用,对细胞凋亡具有促进作用,可以作为肝癌的潜在治疗靶点。; 林海华余玉红张绍敏陈出新刘国军张丽; 关键词：SURVIVIN 凋亡抑制蛋白质类细胞运动

子宫内膜腺癌组织中cIAP、Caspase-7的表达及临床意义被引量：1: 2019年; 目的研究子宫内膜腺癌组织中凋亡抑制蛋白(cIAP)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶7(Caspase-7)的表达情况及临床意义。方法采用免疫组织化学SP法对2015年1月～2017年12月于重庆医科大学附属第二医院接受刮宫和手术切除的80例子宫内膜腺癌组织、50例正常子宫内膜组织与50例子宫内膜不典型增生组织中cIAP、Caspase-7表达情况进行检查,并分析cIAP、Caspase-7表达与子宫内膜腺癌患者临床病理特征的关系,子宫内膜腺癌中c IAP、Caspase-7表达的相关性。结果子宫内膜腺癌组织cIAP阳性率高于子宫内膜不典型增生组织、子宫内膜正常组织,Caspase-7阳性率低于子宫内膜不典型增生组织、子宫内膜正常组织,差异均有统计学意义(P <0.05),子宫内膜不典型增生组织、子宫内膜正常组织c IAP阳性率、Caspase-7阳性率比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。组织学分类G_1～G_2、FIGO分期Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移子宫内膜腺癌患者组织中的cIAP阳性率低于组织学分类G3、FIGO分期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移患者,Caspase-7阳性率高于组织学分类G_3、FIGO分期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移患者,差异均有统计学意义(P <0.05)。Spearman相关分析显示,子宫内膜腺癌组织中cIAP、Caspase-7的表达呈负相关(r=-0.843,P=0.039)。结论子宫内膜腺癌组织中cIAP存在明显高表达,而Caspase-7存在明显低表达,且两者均与子宫内膜腺癌患者的组织学分类、FIGO分期、淋巴结转移存在密切相关,其两者表达呈负相关,值得临床重点关注。; 黄露刘燕华林安平; 关键词：子宫内膜腺癌凋亡抑制蛋白质类免疫组织化学法

半枝莲总黄酮对非小细胞肺癌细胞增殖及迁移的影响被引量：17: 2019年; 目的观察半枝莲总黄酮对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移及凋亡的影响并对其机制进行初步探索。方法体外培养非小细胞肺癌A549细胞,分为阴性对照组、实验组、阳性对照组。阴性对照组用1640培养液200μL处理细胞,实验组分别用1,5,10,20,40μg/mL半枝莲总黄酮处理细胞24 h,阳性对照组用200μL 40μg/mL芦丁溶液处理细胞。采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)观察细胞增殖情况;通过流式细胞术检测细胞凋亡情况;蛋白质印迹法(Western Blot)检测凋亡抑制蛋白Survivin和促凋亡蛋白酶Caspase?3蛋白的表达;迁移划痕实验检测迁移的情况。结果MTT检测结果显示,阳性对照组的增殖抑制率为(57.234±0.533)%,实验组的增殖抑制率分别为(14.852±1.059)%、(23.486±1.366)%、(36.396±0.321)%、(46.179±1.334)%和(51.530±1.054)%,随浓度增加抑制率显著升高,呈浓度依赖(F=1 408.303,P<0.001);流式细胞术检测细胞凋亡率,阴性对照组(9.09±0.50)%、阳性对照组(67.27±1.48)%、实验组分别为(24.62±0.70)%、(34.67±0.46)%、(46.92±0.29)%、(55.67±0.57)%和(59.29±0.73)%,实验组的细胞凋亡率均高于阴性对照组(F=1 467.681,P<0.001);Western Blot结果显示,实验组Survivin蛋白表达均低于阴性对照组,Caspase?3蛋白表达均高于对照组(F=34.176,P<0.001;F=57.730,P<0.001);迁移划痕实验结果显示,半枝莲总黄酮抑制肺腺癌A549细胞迁移并呈现剂量依赖性。结论半枝莲总黄酮可抑制人肺腺癌A549细胞的增殖,可能与Survivin蛋白降低和Caspase?3蛋白表达量升高有关;另外,半枝莲总黄酮可抑制人肺腺癌A549细胞的迁移。; 任守雷郭晓晓陈翠翠赵海燕李来庆; 关键词：半枝莲凋亡抑制蛋白质类半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 细胞运动总黄酮

Survivin在肾细胞癌中的表达及临床意义被引量：2: 2019年; 目的探讨Survivin在肾细胞癌发生、发展中的作用和意义,分析其表达与肾细胞癌生物学行为(临床分期、病理分级及淋巴转移)之间的关系。方法选取2010年3月至2011年9月在中南大学湘雅三医院治疗的肾细胞癌患者26例,免疫组化检测了肾细胞癌和癌旁正常肾组织中Survivin蛋白的表达情况,并将Survivin蛋白表达结果与肾细胞癌的临床分期、病理分级和淋巴转移等进行相关性分析。结果26例肾癌组织中Survivin蛋白的阳性表达为19例(73.1%),阴性表达为7例(26.9%),16例正常肾组织中未见阳性表达,组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。Survivin蛋白在Ⅰ、Ⅱ期肾细胞癌11例患者中阳性表达患者共有5例(45.5%),在Ⅲ、Ⅳ期肾细胞癌15例患者中阳性表达14例(93.3%),组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。Survivin蛋白在中低分化肾细胞癌13例中阳性表达12例(92.3%),在高分化肾细胞癌13例患者中阳性表达7例(53.8%),差异具有统计学差异(P<0.05)。Survivin蛋白在有淋巴结转移的肾细胞癌患者中阳性表达率为93.3%(14/15),在无淋巴结转移的肾细胞癌患者中阳性表达率为45.5%(5/11)。两组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。Survivin在肾癌中的表达与患者的年龄、性别差异均无统计学意义。结论Survivin在肾细胞癌中高表达,而在正常的肾脏组织中不表达。Survivin有望成为判断肾癌转移和预后等生物学行为的重要指标,将有可能成为肿瘤治疗的新靶点。; 秦松林刘婷胡威刘伯龙唐正赵磊; 关键词：肾肿瘤凋亡抑制蛋白质类

Smac多肽对肺腺癌耐药性的作用机制研究被引量：4: 2018年; 目的探讨Smac多肽对肺腺癌细胞耐药性的影响及作用机制。方法培养肺腺癌细胞株A549并诱导产生耐紫杉醇耐药A549/Taxol细胞,分为用Smac多肽处理的观察组及用Smac反向多肽处理的对照组。记录两组细胞增殖活力、细胞内凋亡基因表达量及细胞内耐药基因表达量。结果两组培养12 h、18 h、24 h的细胞增殖活力比较差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,细胞培养24 h后,观察组细胞内Livin、X连锁凋亡抑制蛋白、多耐药基因、肺耐药相关蛋白、拓扑异构酶Ⅱ、谷胱甘肽-s-转移酶-π的mRNA表达量均显著降低,含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3、Caspase-7、Caspase-9的mRNA表达量均显著升高,比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Smac多肽通过下调凋亡抑制蛋白及耐药基因的表达来改善肺腺癌细胞的紫杉醇耐药性。; 陈康翟爱东努尔兰.阿汗; 关键词：肺肿瘤凋亡抑制蛋白质类

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