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双侧下丘间相互作用对神经元反应潜伏期的调制研究:脑片膜片钳细胞记录
下丘(inferioreolliculus,IC)作为皮层下核团的最后一级双耳整合中枢,在双耳信息输入中发挥着重要的作用。目前有关双侧IC间相互作用的研究,主要集中于通过电刺激、局部麻醉、或冷冻一侧IC,观察其所致的对侧...
陈蒙霞
关键词:电刺激
文献传递
新生大鼠海马神经元原代培养及膜片钳细胞记录被引量:8
2012年
目的探讨一种适用于膜片钳细胞记录的海马神经元培养方法。方法选择鼠龄在1d内的Wistar大鼠,迅速断头,取双侧海马,神经基础培养基添加B-27及L-谷氨酰胺进行神经元原代培养,培养至第10天时,使用免疫荧光技术配合神经元特异性核蛋白NeuN进行细胞鉴定;神经元的电生理特征由膜片钳细胞记录。结果该方法所培养神经元状态良好,经鉴定发现纯度可高达100%,通过膜片钳细胞法可记录到自发性动作电位及自发性兴奋性突触后电流。结论本方法操作简便、高效,所培养的海马神经元状态良好,适用于膜片钳细胞记录
徐祖才徐平张骏雷显泽徐忠祥王学峰
关键词:WISTAR海马神经元膜片钳术
膜片钳细胞记录法在研究谷氨酰胺转运蛋白分子机制中的应用被引量:3
2009年
为了研究中性氨基酸转运蛋白-谷氨酰胺转运蛋白的结构与功能,采用膜片钳细胞记录法测定谷氨酰胺转运蛋白2介导的电流.结果表明:谷氨酰胺转运蛋白诱导了底物氨基酸和Na+浓度依赖性电流,可用于测定底物氨基酸和Na+对转运蛋白的表观亲和常数Km,SNAT2野生型对丙氨酸的表观亲和常数KmA la为(200±5)×10-6mol/L,对Na+的表观亲和常数KmNa为(100±7)×10-3mol/L.谷氨酸转运蛋白转运底物氨基酸过程是生电的过程,在膜电势负值时氨基酸转运电流增大,可用于转运机制的研究.因此膜片钳细胞记录法是研究谷氨酰胺转运蛋白分子机制的有效方法.
张舟章骏孙传文
中国沙棘子叶叶肉细胞电流细胞记录的研究
2007年
实验得出适合膜片钳实验的耐盐木本植物中国沙棘子叶原生质体的游离条件,即取当天脱壳的子叶,放入渗透浓度为0.88 mol/L,pH为5.8,酶液的组分为10 g/LCellulase R-10、0.5 g/LPectolyase Y-23、1.5 g/LMacrozymeR-10、1 g/L Hemicellulase、1 g/L BSA、1 g/L PVP-40、2 mmol/L CaCl2、10 mmol/L Mes和5 mmol/L Vc的溶液中,在26℃、黑暗条件下,静置4 h。并且利用Multiclamp 700B放大器和Clampex 9.2软件,记录到了该原生质体质膜细胞内向K+通道电流(-459.137 pA及-290.527 pA)和非选择性阳离子通道的外向电流(8.036 pA)。这为沙棘属木本植物细胞的电生理特性及其耐盐性机制关系的研究奠定基础。
朱俊英闫慧高荣孚尹伟伦
关键词:中国沙棘子叶原生质体膜片钳全细胞记录
大鼠海马CAⅠ区锥体细胞的急性分离及细胞记录方法被引量:3
2006年
目的寻求一种适用于膜片钳技术(PCT)的大鼠海马CAⅠ区锥体细胞的急性分离及细胞记录方法。方法采用酶加机械分离的方法制备10~16d鼠龄的海马CAⅠ区锥体神经元。其电生理学特性测定用细胞PCT。结果所分离的85%神经元不仅形态学特征保存完好,而且保存了主要的离子通道活性。结论成功建立了一种简单、快速、可靠的适用于PCT的大鼠皮层神经元急性分离方法。
张鹏俊张宇张文平谭爱娟张策
关键词:海马锥体细胞急性分离膜片钳全细胞记录
中国沙棘子叶原生质体游离及其膜片钳细胞记录研究初报
报道了适合膜片钳实验的耐盐木本植物中国沙棘子叶原生质体的游离条件,即取当天脱壳的子叶,放入渗透势为0.88M,pH为5.8,酶液组分为1.0%cellulase R-10、0.05%Pectolyase Y-23、0.1...
朱俊英闫慧尹伟伦高荣孚
关键词:中国沙棘原生质体膜片钳全细胞记录
细胞记录急性分离海马锥体神经元电压门控通道电流(英文)被引量:3
2006年
背景:海马是涉及学习、记忆的重要脑区,已有研究者描述了急性分离海马神经元的方法。但这些方法需要多种酶联合使用、分离过程复杂。目的:建立一种适用于膜片钳研究,简单、快速地分离海马神经元的方法。设计:动物实验观察。单位:西安交通大学医学院生理与病理生理学系。材料:实验于2004-03/10在西安交通大学医学院医学实验中心完成。实验动物选用出生10~15d的Sprague-Dawley大鼠,性别不限。方法:急性分离海马神经元;应用细胞记录模式记录延迟整流钾电流以及电压门控钙电流。主要观察指标:观察急性分离海马神经元的形态;记录海马神经元延迟整流钾电流、电压门控钙电流。结果:①倒置显微镜观察急性分离的神经元具有光滑、透亮的表面,胞体呈锥体性,有一个较长的顶树突和几个基树突。②分离过程未破坏其电生理特性,钳制电压-90mV,给予时程200ms,阶跃10mV,由-70~+20mV去极化脉冲刺激激活钙电流得到电压门控钙电流。钳制电压-80mV,给予-50mV时程50ms去极化预刺激失活瞬时外向钾电流,再给予时程200ms,阶跃10mV,由-60mV至+50mV去极化脉冲刺激激活钾电流,得到延迟整流钾电流。结论:本方法分离的神经元,适合应用膜片钳技术进行离子通道研究。
蔡青朱忠良樊小力白转丽贾宁李霞
关键词:膜片钳术海马钙通道
南方鲇延脑组织切片膜片钳技术及脑片神经元的细胞记录
鱼类离体脑组织切片标本制备困难,活性难以维持,这成为了鱼类神经生物学深入研究的障碍。本研究使用了耐缺氧的南方鲇SilurusmeridwnalisChen作为实验材料,参考哺乳动物的脑片制备方案,通过有针对性的改良,建立...
梁剑弦
关键词:南方鲇脑片膜片钳全细胞记录
文献传递
培养的大脑皮层、海马及交感神经细胞钠、钾和钙离子通道的细胞记录技术被引量:9
2005年
目的 :建立新生大鼠大脑皮层、海马细胞及交感神经元细胞的培养方法及其钠、钾和钙通道的膜片钳细胞记录技术。方法 :取出生 1~ 3d的大鼠大脑皮层、海马及交感神经节 ,用胰蛋白酶 (0 .12 5 % )消化组织并分离出神经细胞 ,种植在涂有多聚赖氨酸的 35mm培养皿中 ,用高糖的DMEM培养液培养 ,一周后 ,镜下可见神经细胞壁光滑、完整 ,周围有明亮的光润 ,在高倍倒置显微镜下可见到完整的细胞核及均匀的胞浆 ,细胞间形成良好的突触连接 ,可用于细胞膜片钳记录。结果 :用胰蛋白酶消化分离培养的神经细胞 ,功能状态良好 ,在膜片钳细胞记录中 ,易形成细胞记录电极间的高阻抗封接 ,可分别记录到INa、IA、IK 和ICa。结论 :在神经系统电生理学研究中 ,此方法可应用于中枢神经系统不同脑区培养以及钠、钾和钙通道电流的记录
崔文玉张颖丽殷晓峰汪海
关键词:海马交感神经元钾电流钠电流钙电流
酶分离猪冠脉平滑肌细胞钙激活钾通道细胞记录电学特性研究被引量:14
2003年
目的 :观察急性酶分离猪冠脉平滑肌细胞钙激活K+ 电流 (IKCa)特性及摸索可行的记录方法。方法 :采用常规膜片钳细胞记录技术。结果 :分离的猪冠脉平滑肌细胞 (来自 15只猪的 4 7个细胞 ,膜电容 32 .3±8.8pF)上的主要K+ 电流为IKCa,此电流具电压依赖性和胞内游离Ca2 + 依赖性。IKCa选择性阻断剂Charybdotoxin(ChTX ,12 5~ 2 5 0× 10 - 9mol.L- 1 )可使外向电流降低 6 8± 8% (n =5 )。 10~ 2 0× 10 - 3mol.L- 1 TEA可阻断 74± 5 % (n =7)的外向电流。结论 :猪冠脉平滑肌细胞细胞K+ 电流主要成分为IKCa,它与其它组织细胞报道的情况类似而又有独自的特点。我们的数据为猪冠脉平滑肌细胞K+ 电流特性的认识提供了第一手资料 。
杨艳曾晓荣刘智飞周文李妙龄胡平裴杰
关键词:钙激活钾电流蝎毒

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阴正勤
作品数:559被引量:837H指数:13
供职机构:第三军医大学西南医院
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作品数:55被引量:183H指数:8
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研究主题:视皮层 EVANS大鼠 LONG 视网膜神经节细胞 电生理学
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研究主题:视皮层 视皮层神经元 伏膈核 形态学 全细胞记录
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研究主题:视皮层 全细胞记录 膜片钳 伏膈核 神经元
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