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一种使用免疫印迹技术半定量分析人关节软骨细胞分泌蛋白质表达水平的方法: 本发明公开了一种使用免疫印迹技术半定量分析人关节软骨细胞分泌蛋白质表达水平的方法。本发明所述方法包括如下步骤：1)制备含分泌蛋白培养液；2)采集含分泌蛋白培养液的样本；3)对样本进行透析脱盐处理；4)浓缩制备含分泌蛋白培...; 丁磊毛嘉敏王全明

研究生实验教学中细胞转染技术结合斑点免疫印迹技术的实验探索: 2024年; 在研究生组织及细胞培养实验教学中,细胞转染技术是一个重要的组成部分,以往实验方案使用携带荧光蛋白GFP基因的质粒转染细胞后,可使用荧光显微镜进行观察定性分析转染是否成功并粗略计算转染效率,但对于没有荧光标记的细胞转染结果分析检测方法在教学上尚有欠缺。本实验针对这个问题,在检测方法中加入斑点免疫印迹技术,并对实验方案及分析方法进行了探索,以便于学生掌握更全面的细胞生物学分析技术。; 黄凌云张健翔刘进窦非张晓嫣; 关键词：转染

变性梅毒重组抗原免疫印迹技术的建立及其在鉴别梅毒血清学假阳性实验的应用被引量：4: 2023年; 目的为了评估临床梅毒抗体筛查中出现假阳性实验结果的真实性,建立了变性梅毒重组抗原免疫印迹技术,并应用于对临床非高危人群梅毒抗体筛查阳性血清进行验证确认,分析出现假阳性的可能性。方法采用梅毒TP47,TP45,TP17和TP15重组抗原,将变性后的抗原与非变性的抗原配对包被在硝酸纤维膜载体上,建立梅毒免疫印迹抗体谱检测方法。收集临床经电化学发光免疫分析仪及配套试剂检测的梅毒螺旋体抗体假阳性的非性病高危人群门诊和住院患者血清样本56例、临床确认梅毒患者血清样本25例和健康体检人员样本30例进行方法学验证。并用该方法对1例特殊的“梅毒患者”进行了鉴别。结果根据建立的变性与非变性抗原配对梅毒免疫印迹抗体谱检测结果判定模式,56例临床梅毒螺旋体抗体筛查假阳性样本,对四种变性重组抗原均不发生反应,无阳性条带。但是对二种以上非变性抗原发生弱阳性反应,出现阳性条带;25例梅毒患者对照样本,对四种非变性和变性重组抗原均有反应,出现强阳性条带;30例健康体检人员样本,对四种非变性和变性重组抗原均无反应。梅毒螺旋体特异性抗体阳性特殊“梅毒患者”血清样本,对四种变性重组抗原均为阴性反应,但对四种非变性重组抗原出现阳性反应。患者样本经血清免疫固定电泳分析,结合临床资料诊断为IgGλ型单克隆免疫球蛋白血症。结论变性梅毒重组抗原免疫印迹抗体谱检测,可有效鉴别临床梅毒抗体假阳性样本。但是,对于梅毒患者的确认一定要将检验结果结合患者的流行病学史、临床表现等进行诊断。; 彭振亚张银辉陈安宁肖桂初靳晶邹钢陆学东; 关键词：梅毒梅毒螺旋体重组抗原免疫印迹技术

传统蛋白免疫印迹技术常见异常结果及影响因素探究被引量：1: 2023年; 蛋白免疫印迹技术(western blotting,WB)是检测蛋白质经济、有效的方法,已广泛应用于分子相关的领域,但其影响因素多、操作复杂,常出现异常结果。本研究使用传统蛋白免疫印迹技术法检测(Sprague-Damley,SD)大鼠肝脏、脾脏组织某些蛋白质的表达,分析探讨常见异常结果及处理方法,为实验室和其他实验者提供参考。; 洪铸夏倩聂昌王龙杜春艳; 关键词：抗体 SDS-PAGE

蛋白质免疫印迹技术在水产品中的应用被引量：3: 2021年; 蛋白质免疫印迹技术作为一门新兴的方法,在蛋白质组学研究中得到广泛应用。该技术可对待测样品中目的蛋白质进行定性和半定量分析,为探究水产品中蛋白质组成及变化规律带来了新的途径。本文在重点介绍蛋白质免疫印迹技术原理及特点的基础上,系统地总结了近年来该技术在水产品加工、贮藏、品质鉴别及质量安全方面的应用研究进展,对目的蛋白质选择的局限性、水产品研究尚未覆盖、蛋白质受环境改变等问题进行了探讨,就此展望了丰富数据库、多组学方法联合分析等发展前景,以期为蛋白质免疫印迹技术在水产品品质与质量安全相关研究和应用提供参考与借鉴。; 杨明畅马俪珍李来好杨贤庆杨贤庆魏涯陈胜军李春生魏涯; 关键词：水产品蛋白质组学

蛋白质免疫印迹技术在大学生创新实验中的应用被引量：1: 2021年; 在生物功能研究过程中,通常需要从混合蛋白中区分、检测目标靶蛋白,而蛋白免疫印迹技术能较好的实现该目的.蛋白免疲印迹技术是一种先择性地结合被分离混合物中特异蛋白的分析技术,具有灵敏度高、特异性强、分辨率高、分析容量大,可对蛋白进行定性、定量分析,检测蛋白的时空表达变化情况,被广泛应用于蛋白定性实验技术中.为在大学生创新实验中推广该技术,本教学实验以贵州大学本科生为对象,课程的主要内容包括了解蛋白印迹法的原理、目标蛋白载体的构建、蛋白可溶性表达、PAGE胶制作,以及蛋白质免疫印迹试验.该教学可提高学生对蛋白免疫印迹技术原理和实验操作技能的认识和掌握,同时训练学生在科研中的能力.; 陈立杰杜巧丽陈美晴谢鑫; 关键词：蛋白免疫印迹实验教学

基于量化斑点免疫印迹技术建立结外NK/T细胞淋巴瘤预后评估模型: 目的探讨结外NK/T细胞淋巴瘤的临床与病理学特征及患者预后特点,进一步提高对该肿瘤的认识,为组建结外NK/T细胞淋巴瘤患者预后评估模型提供理论基础。方法回顾分析烟台毓璜顶医院及南通大学附属医院在2008年1月至2020年...; 吴仕收; 关键词：NK/T细胞淋巴瘤免疫组化突变型P53 预后 NK/T细胞淋巴瘤预后模型

蛋白质免疫印迹技术在本科实验教学中的应用被引量：8: 2020年; 蛋白质免疫印迹技术是生命科学研究领域的常用技术手段,尝试将其改造成适于本科教学实践的实验内容,即在基础性分子生物学实验的基础上开设"免疫印迹法检测目的基因在原核细胞中的表达"这一综合性实验。根据学生的理论和操作水平以及本科实验教学特点,对实验内容和实验方法进行了优化,并采取研讨式分组教学模式,使学生能够深入、全面、系统地理解和掌握蛋白质免疫印迹技术,提高了实验教学质量,并有助于培养学生的科学思维、科学素养以及综合实践能力。; 李欣赵玉红石建党赵立青李小菊张伟英; 关键词：分子生物学实验教学

双向电泳结合免疫印迹技术分析蜉蝣变应原被引量：2: 2017年; 目的用双向电泳和免疫印迹技术(Western blot)对蜉蝣提取液蛋白质组分进行分析,寻找蜉蝣主要致敏蛋白质。方法提取蜉蝣总蛋白,应用双向电泳结合免疫印迹技术,获得相应的电泳图谱和免疫印迹图谱,免疫印迹一抗为蜉蝣过敏患者血清,二抗为鼠抗人IgE抗体。结果蜉蝣蛋白质提取液经双向电泳后,考马斯亮蓝染色,电泳图谱显示约805个主要蛋白点。相对分子质量约为20 000~130 000;等电点主要集中在4.0~9.5。免疫印迹结果显示,阳性患者组与对照组的差异蛋白点数约为27个。结论双向电泳联合免疫印迹技术对蜉蝣提取液蛋白质组分分析具有实用价值,并可进一步用于变应原致敏组分的研究。; 刘硕蔡笃程李春林孟光龙绮谢伟伟; 关键词：蜉蝣变应原双向电泳免疫印迹

应用双向电泳和免疫印迹技术分析软叶针葵花粉变应原被引量：3: 2016年; 目的：采用双向电泳和免疫印迹技术对软叶针葵花粉提取液蛋白质组分进行分析,寻找软叶针葵花粉的主要变应原。方法：提取软叶针葵花粉变应原,应用双向电泳（2-DE）结合免疫印迹技术,获得相应的电泳图谱和免疫印迹图谱。结果：软叶针葵花粉蛋白提取液经双向电泳后,用考马斯亮蓝染色,得到的电泳图显示约有601个主要蛋白斑点。分子量（Mr）分布约20～130kD;等电点（pI）主要集中在4.0～8.0。免疫印迹分析结果显示,阳性组与对照组的差异蛋白点数约为19个。结论：双向电泳联合免疫印迹技术对软叶针葵花粉提取液蛋白质组分分析,可寻找到其主要变应原,并可进一步用于变应原致敏组分的研究。; 刘硕孟光郑琳麟李春林谢伟伟龙绮; 关键词：变应原双向电泳免疫印迹

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