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利用高分辨质谱法表征重组人卵泡激素二硫键的方法研究
2025年
目的 建立高分辨质谱法表征重组人卵泡激素二硫键的方法。方法 前处理方法是将卵泡激素(follicle-stimulating hormone, FSH)原液用稀释液稀释至0.5 mg·mL^(-1),分别加入枯草杆菌蛋白酶、胰蛋白酶、PNGase F酶解,最后加入1μL 10%的甲酸,停止反应。液质方法:采用ACQUITY UPLC Peptide BEH C_(18)(2.1 mm×100 mm, 1.7μm),以0.1%甲酸/水溶液(A)-0.1%甲酸/乙腈溶液(B)为流动相,梯度洗脱;质谱采集模式为ddMS2,离子源为ESI^(+),扫描范m/z 250~2 000。结果 成功鉴定出β亚基6对二硫键,分别为β:C3=β:C51;β:C17=β:C66;β:C20=β:C104;β:C28=β:C82;β:C32=β:C84;β:C87=β:C94;成功鉴定出α亚基5对二硫键,分别为α:C7=α:C31;α:C10=α:C60;α:C28=α:C82;α:C32=α:C84;α:C59=α:C87。结论 建立了重组人卵泡激素二硫键的定位方法,为该类产品二硫键连接方式的质量控制提供了新思路。
胡馨月向禹兴孙悦王绿音李懿张孝明吕萍梁成罡李晶
关键词:重组人促卵泡激素二硫键定位高分辨质谱酶解法
卵泡激素与孕卵指数在不同临床表型多囊卵巢综合征不孕患者中的差异及与排卵结局的关系
2025年
目的探讨卵泡激素(FSH)与孕卵指数(POI)在不同临床表型多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者中的差异及与排卵结局的关系。方法选取2020年9月至2023年9月于广州中医药大学第一附属医院就诊的150例年龄在20~40岁的PCOS不孕患者为PCOS不孕组,同期健康体检者140例为对照组。收集并统计所有研究对象的一般资料、激素指标、超声指标等相关临床数据。根据鹿特丹分型标准,将PCOS不孕组分为A、B、C、D四种临床表型。通过随机森林算法筛选影响因素并纳入多因素回归分析模型。采用多因素Logistics回归法、分层交互检验法、多元线性回归法、限制性立方样条模型、bootstrap法的中介效应,分析FSH与POI在不同临床表型PCOS不孕患者中排卵结局之间的关系。结果PCOS不孕组与对照组的体质量指数(BMI)、糖尿病史、高血脂史的分布,以及月经周期、卵巢体积、FSH、睾酮(T)、雌二醇(E_(2))、黄体生成素(LH)、抗苗勒氏管激素(AMH)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗(IR)、卵泡计数(AFC)、POI水平比较,差异均有统计学意义(χ^(2)=40.368~48.489、t=4.706~49.326,P<0.05)。四种临床表型中BMI的分布,以及月经周期、卵巢体积、FSH、T、E_(2)、LH、AMH、AFC、POI水平比较,差异均有统计学意义(χ^(2)=13.423、F=2.810~53.509,P<0.05);在不同临床表型PCOS不孕患者中,FSH、POI水平在B型患者中最高。随机森林算法分析显示,FSH、POI、AMH为前三位不同临床表型PCOS不孕患者排卵结局的重要影响因素。多因素Logistic回归分析显示,FSH、POI、AMH均是不同临床表型PCOS不孕患者排卵结局的独立影响因素,OR(95%CI)分别为:3.712(1.124~4.589)、2.658(1.006~2.985)、2.359(1.131~4.103),P<0.05。中介效应分析显示,POI对不同临床表型PCOS不孕患者排卵结局具有直接影响,并且FSH部分介导了POI对不同临床表型PCOS不孕患者排卵结局的影响,�
谢秋月赵小凤张湘琪盛燕雯孙晓峰
关键词:多囊卵巢综合征不孕症促卵泡激素
一种长效重组人卵泡激素的纯化方法
本发明提供了一种长效重组人卵泡激素(FSH‑CTP)的纯化方法,属于蛋白分离纯化领域。具体而言,本发明涉及一种通过染料亲和层析和疏水层析2步实现FSH‑CTP纯化的方法,并在2步层析步骤之间特定搭配去污剂病毒灭活工艺,...
严代才李宁陈云波
基于cAMP的卵泡激素体外生物学活性测定方法
本公开涉及基于cAMP的卵泡激素体外生物学活性测定方法,所述方法包括:(1)构建得到稳定表达FSHR‑荧光蛋白报告基因的效应细胞;(2)培养效应细胞,然后加入FSH蛋白样品并继续培养;(3)将细胞裂解后,根据测定的细胞...
梅彩英周立明曹锴吕洁婷王爱珂陈璐范禄同
一种重组人卵泡激素注射笔针头分离装置
本实用新型提供了一种重组人卵泡激素注射笔针头分离装置,包括筒体、第一固定机构和第二固定机构。筒体的一端为封闭端,筒体的另一端为可容针头进入的敞口端。筒体可容纳多个针头。第一固定机构位于敞口端处,第一固定机构可对针头进行...
李红朱静
一种重组人卵泡激素电荷异质性的检测方法
本发明一种重组人卵泡激素电荷异质性的检测方法,包括如下步骤:采用HPLC对重组人卵泡激素进行组分分离;色谱条件如下:色谱柱:Proteomix SAX‑NP5;流动相:以Tris缓冲液为流动相A,以含NaCl的Tri...
刘金涛俞峻红唐德芳张强
具有提高的稳定性的哺乳动物卵泡激素组合物
本发明涉及性腺激素领域。具体而言,本发明提供了一种改进的包含重组人卵泡激素和氯甲酚的组合物。这种改进的组合物在高温下具有提高的稳定性,并且可用于治疗不育症,特别是在人患者中。
S·戈莱茨L·施特克尔
一种犬牛融合重组卵泡激素的制备方法及应用
本发明公开了一种犬牛融合重组卵泡激素的制备方法及应用,涉及重组蛋白技术和兽药领域。本发明通过将犬和牛的卵泡激素部分蛋白序列通过接头连接,形成单个融合多肽。所述卵泡激素的氨基酸序列如SEQ IDNo.1所示。设计的融...
李涛 李利 杨亮 王燕 王永升
重组人卵泡激素(芳乐舒■)6.5年的三期随访研究
2024年
目的对重组人卵泡激素(芳乐舒■)三期临床研究进行随访,评估患者的累积妊娠率、累积活产率和新生儿结局指标。方法对芳乐舒■中国三期临床研究(NCT03506243/CTR20150341,2015年5月15日至2016年6月27日)进行随访至2022年12月31日。本研究分为芳乐舒■组和果纳芬■组,按照年龄分为20~30岁、31~35岁和36~39岁三个亚组。对患者的累积妊娠率、累积活产率、移植胚胎数、每获胚活产数、每获卵活产数、鲜胚移植和冻胚移植的临床妊娠率、鲜胚移植和冻胚移植的活产率、新生儿表征(双胎妊娠率、体质量、性别、出生缺陷率)等指标进行评估和分析。结果共446例患者纳入分析,其中芳乐舒■组336例,果纳芬■组110例,随访时间为6.5年。芳乐舒■组和果纳芬■组的累积妊娠率、累积活产率差异均无统计学意义(均P>0.05)。各年龄亚组两组间累积妊娠率和累积活产率差异均无统计学意义(均P>0.05),36~39岁亚组中芳乐舒■组累积妊娠率[60.0%(12/20)]、累积活产率[55.0%(11/20)]相比于果纳芬■组[28.6%(2/7),14.3%(1/7)]有增高趋势,但差异均无统计学意义(均P>0.05)。芳乐舒■组和果纳芬■组的双胎妊娠率、每获胚活产数、每获卵活产数、新生儿性别、新生儿体质量、出生缺陷率差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论芳乐舒■在控制性超排卵中的安全性、有效性与果纳芬■相似。相比于果纳芬■,芳乐舒■在高龄人群中的累积妊娠率和累积活产率有增高趋势,但差异无统计学意义。
卜志勤胡琳莉张松英吕杰强全松黄元华钱卫平孙莹璞
关键词:控制性超促排卵重组人促卵泡激素高龄
DMB衍生-高效液相色谱法测定重组人卵泡激素中的唾液酸含量
2024年
目的建立采用4,5-亚甲二氧基-1,2-苯二胺二盐酸盐(DMB)衍生-高效液相色谱-荧光检测器(HPLCFLD)法(DMB衍生法)同时测定重组人卵泡激素(rhFSH)中2种唾液酸组分N-羟乙酰神经氨酸(Neu5Gc)和N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac)含量的方法。方法将DMB衍生法与邻苯二胺衍生-高效液相色谱法(邻苯二胺衍生法)进行对比研究,对DMB衍生法中的水解条件进行优化并确定最终方法为rhFSH原液经酸水解后,采用DMB进行衍生,经Agilent ZORBAX 300SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,采用荧光检测器检测。结果与邻苯二胺衍生法相比,DMB衍生法能够实现Neu5Gc与Neu5Ac相关杂质的有效分离。该方法Neu5Gc和Neu5Ac分别在0.5~5.0μg·mL^(-1)(r=0.9999)和25~250μg·mL^(-1)(r=0.9998)浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系;Neu5Gc和Neu5Ac的检测限分别为11.07、10.30 ng·mL^(-1),定量限分别为33.21、20.60 ng·mL^(-1),两者回收率分别为(99.63±1.33)%(n=9)和(100.62±1.58)%(n=9),RSD分别为1.3%(n=9)和1.5%(n=9)。结论该方法专属性强、灵敏度高、精密度和准确度良好,可用于准确测定rhFSH中唾液酸Neu5Gc和Neu5Ac的含量。
王绿音李懿孙悦胡馨月张慧李晶梁成罡
关键词:重组人促卵泡激素荧光检测器N-乙酰神经氨酸唾液酸

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梁成罡
作品数:157被引量:270H指数:8
供职机构:中国食品药品检定研究院
研究主题:生物学活性 重组人促卵泡激素 重组人生长激素 反相高效液相色谱法 重组人甲状旁腺激素
李晶
作品数:159被引量:143H指数:6
供职机构:中国食品药品检定研究院
研究主题:太阳能 有机朗肯循环 生物学活性 朗肯循环 重组人生长激素
李湛军
作品数:72被引量:202H指数:9
供职机构:中国食品药品检定研究院
研究主题:海狗油 生物测定 灌胃 生物活性 中国药典
杨化新
作品数:158被引量:616H指数:12
供职机构:中国食品药品检定研究院
研究主题:药品检验 重组人生长激素 药品 精密度 高效液相色谱
石玉瑚
作品数:72被引量:230H指数:11
供职机构:南京工业大学
研究主题:白地霉 高温中性蛋白酶 促卵泡激素 双水相萃取 菌种