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鼠伤寒沙门菌未知功能蛋白YchJ的抗逆功能研究: 2025年; 目的为了解ychJ基因及其编码蛋白YchJ对鼠伤寒沙门菌抗逆能力的影响。方法基于ExPASy ProtParam tool和Clustal Omega对YchJ蛋白性质及氨基酸序列保守性等生物信息学进行分析和预测。采用CRISPRCas9法构建鼠伤寒沙门菌ATCC14028s的ychJ基因敲除株△ychJ,并通过DNA扩增技术进行鉴定。分别对野生株和敲除株进行抗逆功能试验,通过结晶紫半定量法和刚果红染色法确定YchJ对沙门菌生物膜形成的影响;采用生长曲线测定法和菌落计数法确定YchJ对沙门菌抗生素耐受能力的影响;利用半固体平板移动法检测YchJ对沙门菌运动能力的影响。结果YchJ是一种稳定的亲水性蛋白,其氨基酸序列相对保守,ychJ基因敲除株构建成功。与野生株的RDAR表型(红色、干燥和粗糙)相比,该敲除株表现为SAW表型(光滑、白色、湿润)。经结晶紫染色后,野生株的A_(570)/A_(600)值为0.8345±0.1016,显著高于ychJ敲除株的0.2633±0.05051。在抗生素耐受性实验中,低浓度氨芊青霉素或诺氟沙星压力下,ychJ敲除株的生存能力显著降低,仅为野生型的10%-60%。在半固体平板实验中,ychJ敲除株的扩散直径达到(5.00±0.10)cm,显著大于野生株的(1.933±0.1155)cm,表明ychJ敲除株表现出更强的移动能力。结论未知功能蛋白YchJ的缺失会影响鼠伤寒沙门菌的运动能力、生物膜形成能力和抗生素耐受能力,为沙门菌及其他胞内寄生菌YchJ功能的确定提供理论基础。; 袁西露李丽谢荣现程龙云李冰清王玮玮; 关键词：鼠伤寒沙门菌生物膜形成

鼠伤寒沙门菌YbiB蛋白的表达纯化及结构解析: 2025年; 目的通过蛋白表达纯化、晶体X射线衍射技术解析鼠伤寒沙门菌YbiB蛋白的结构,为进一步探索YbiB蛋白参与的生物学过程及功能研究提供结构基础。方法分子克隆ybiB基因,插人pGL01表达载体,构建ybiBpGL01重组质粒。诱导并纯化目标蛋白后进行晶体培养。通过上海光源SSRF光束线站收集YbiB蛋白晶体衍射数据,解析鼠伤寒沙门菌YbiB蛋白的三维结构信息。按照PDB官网的要求逐步填充YbiB蛋白的相关信息和结构参数。分析鼠伤寒沙门菌YbiB蛋白的结构特点并推测其功能。结果成功构建了融合表达质粒ybiB-pGL01并转化到BL21感受态细胞中;IPTG诱导表达YbiB蛋白,纯化后蛋白浓度为0.45mg/mL;在0.1mol/L Sodium acetate trihydrate pH 4.5,3.0mol/L Sodium chloride条件下,晶体呈长方体状;晶体衍射分辨率为2.34A;解析出鼠伤寒沙门菌YbiB的蛋白晶体结构并上传PDB数据库,PDB号为7Y3P;鼠伤寒沙门菌YbiB呈头对头的二聚体结构,且单体结构折叠成磷酸核糖基转移酶Ⅲ型家族蛋白的双叶状结构,与大肠埃希菌YbiB在结构上极其相似,有着相似的表面静电势能分布;鼠伤寒沙门菌YbiB和大肠埃希菌YbiB两个蛋白的PRPP或磷酸结合位点(天冬酰胺N89和酪氨酸Y88)、DNA结合位点(精氨酸R172和组氨酸H115)都高度保守。结论鼠伤寒沙门菌YbiB蛋白在原核表达体系中稳定表达,纯化后的蛋白也可用于晶体培养。YbiB蛋白结构成功解析并上传至PDB数据库。结构分析表明,鼠伤寒沙门菌YbiB与大肠埃希菌YbiB可能有着相似的DNA结合机制。; 翟莉李冰清贾海红; 关键词：鼠伤寒沙门菌蛋白纯化

鼠伤寒沙门菌ArcB基因缺失株及其构建方法和应用: 本发明提供了一种提供鼠伤寒沙门菌ArcB基因缺失株及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。本发明的构建方法包括：扩增出打靶DNA；将pKD46质粒电转进SL1344感受态细胞中，再将打靶DNA电转入含有pKD46质粒的...; 刘永生方玉鹏张晓晴郭紫薇刘存磊

鼠伤寒沙门菌诱导巨噬细胞RAW264.7铜死亡机制研究: 2025年; 目的讨论病原菌感染后诱导巨噬细胞发生铜死亡的现象并分析该细胞反应对细菌胞内生存影响,探索细胞铜死亡的机制及其对鼠伤寒沙门菌胞内生存和致病性的影响。方法鼠伤寒沙门菌入侵、加铜离子载体伊利司莫(Elesclomol,ES)和氯化铜24 h后,收集细胞并设置未处理细胞对照组、ES对照组、WT感染组,用电感耦合等离子质谱检测细胞内铜离子浓度变化;细胞内铜染色后,使用共聚焦显微镜观察铜离子的分布情况;细胞入侵48 h后,设置未处理细胞对照组、细胞中和感染的细胞中加入不同浓度铜离子(1μmol/L、2.5μmol/L、5μmol/L),采用乳酸脱氢酶法检测了添加铜离子前后感染细胞死亡率的差异;细胞入侵24 h后,免疫荧光和Western blot方法检测铜死亡关键指标硫辛酰化修饰的DLAT蛋白寡聚体产生及分布情况。结果感染和加入药物干预的RAW264.7细胞内的铜元素的含量无差异,细胞内铜元素含量分别为NC组0.06533±0.008327,ES组0.1580±0.002646,WT组为0.07367±0.007572;共聚焦显微镜显示感染后细胞内铜离子分布形态发生变化,铜离子聚集成点状;细胞感染48 h后,Cell组细胞死亡率为19.60±9.758,Cell+1μmol/L CuCl_(2)组细胞死亡率为17.27±7.130,Cell+2.5μmol/L CuCl_(2)组细胞死亡率为40.13±5.650,Cell+5μmol/L CuCl_(2)组细胞死亡率为65.50±1.241,WT+1μmol/L CuCl_(2)组细胞死亡率为65.44±1.329,WT+2.5μmol/L CuCl_(2)组细胞死亡率为80.56±4.543,WT+5μmol/L CuCl_(2)组细胞死亡率为76.42±1.316,鼠伤寒沙门菌入侵后细胞死亡率随培养基添加铜离子浓度增加而增高;共聚焦显微镜和Western blot显示鼠伤寒沙门菌入侵后铜死亡关键蛋白丙酮酸脱氢酶DLAT亚基发生寡聚化形成多聚体。结论感染后RAW264.7细胞启动铜死亡,抑制鼠伤寒沙门菌胞内生存,为铜死亡的机制研究提供了理论研究基础。; 李丽袁西露程龙云谢荣现祝姚姚李冰清宋楠楠; 关键词：鼠伤寒沙门菌铜离子

一种检测鸡伤寒沙门菌的引物探针组合、试剂盒与应用: 本发明提供了一种检测鸡伤寒沙门菌的引物探针组合、试剂盒与应用，属于生物检测技术领域。该引物探针组合中，引物的上游引物序列如SEQ ID NO.1所示；所述引物的下游引物序列如SEQ ID NO.2所示；所述探针的序列如S...; 苏海昀叶文珺王俊禹海杰赵海云赵毅李楚楚吕晨雨张婧超傅远茜

鼠伤寒沙门菌greA/B基因缺失株的构建及生物学特性: 2025年; 沙门菌作为一种常见的人畜共患病原体,可导致多种食源性疾病,其中鼠伤寒沙门菌(SalmonellaTyphimurium,STM)是关键血清型之一,其研究与防控对公共卫生具有重要意义。【目的】探究greA和greB基因对鼠伤寒沙门菌生物学特性和致病性的影响。【方法】运用Red同源重组技术构建greA和greB基因缺失株及其回补株,并对其生长特性、生物被膜形成能力、对Caco-2细胞的黏附及侵袭能力进行检测;利用小鼠模型评估了greA和greB基因缺失对STM致病性的影响。【结果】成功构建了突变株STM LT2ΔgreA和STM LT2ΔgreB;与野生株相比,greA和gre B基因的缺失均不影响其生长速度,但导致STM的生物被膜形成能力、黏附力、侵袭力均有所下降;greA和greB缺失降低了STM对小鼠肝、脾的定殖力,并使得STM的LD50分别上升了39.81倍和2.5倍。【结论】greA和greB基因的缺失均可降低鼠伤寒沙门菌的致病性,本研究结果为进一步揭示沙门菌的致病机理提供了理论基础。; 叶景芬陈世雄武绍碧杨婉潘永廖怡雯罗雪罗雪; 关键词：鼠伤寒沙门菌生物特性

120例鼠伤寒沙门菌感染患儿的临床特征及耐药模式分析: 2025年; 目的了解鼠伤寒沙门菌感染患儿的临床特征及耐药模式,为鼠伤寒沙门菌感染的临床防治提供参考依据。方法选取2021年1月-2023年12月在达州市中西医结合医院肠道门诊就诊的120例鼠伤寒沙门菌感染患儿,进行肠道细菌分离鉴定和临床特征分析,采用K-B纸片扩散法行药敏性分析。结果120例鼠伤寒沙门菌感染患儿中,2021-2023年分别为49例(40.83%)、39例(32.50%)、32例(26.27%);男性占61.67%(74/120),年龄以<1岁患儿为主(33.33%),70.83%(85/120)为散居儿童;93.33%(112/120)患儿入院时伴高热,90.83%(109/120)大便有黏液、血,40.00%(48/120)患儿有呕吐症状;大便常规显示白细胞异常、红细胞异常、脓细胞、白细胞计数增高、C反应蛋白增高分别占95.00%(114/120)、87.60%(106/120)、58.20%(71/120)、61.79%(76/120)、64.52%(80/120)。120例鼠伤寒沙门菌感染患儿的性别、年龄及职业分布差异均有统计学意义(χ^(2)=13.067、48.360、115.425,P均<0.05),但不同年间鼠伤寒沙门菌感染患儿的性别、年龄及职业分布差异无统计学意义(χ^(2)=0.014、0.582、3.716,P均>0.05)。耐药模式上,儿童鼠伤寒沙门菌感染对四环素、氨苄西林、氯霉素耐药率分别为81.67%(98/120)、79.17%(95/120)、51.67%(62/120);对头孢曲松、头孢他啶、头孢哌酮舒巴坦耐药率相对较低,分别为0.83%(1/120)、1.67%(2/120)、4.17%(5/120);ACSSuT耐药表型、ACSSu TAuCx耐药表型、≥3种耐药率分别为35.83%(43/120)、2.50%(3/120)、29.17%(35/120)。结论医院儿童鼠伤寒沙门菌感染呈逐年下降趋势,以男性、年龄<1岁、散居儿童为高发群体,对头孢曲松、头孢他啶、头孢哌酮舒巴坦敏感,值得临床重视。; 张燕娓程阔菊; 关键词：鼠伤寒沙门菌头孢曲松头孢他啶头孢哌酮舒巴坦

2021-2023年陕西省西安市非伤寒沙门菌分子分型和耐药基因携带情况分析: 2025年; 目的分析2021—2023年陕西省西安市非伤寒沙门菌的分子分型和耐药基因携带情况,了解其种群结构和耐药基因分布,为制定针对性的沙门菌防控策略提供科学依据。方法利用MGISEQ-200测序平台对非伤寒沙门菌进行全基因组测序,拼接完成后利用EntroBase提供的核心基因组多位点序列分型(cgMLST)的方案构建全基因组等位基因最小生成树,利用ResFinder 4.2.0软件进行耐药基因鉴定。结果96株非伤寒沙门菌共分为17个HCC50型别,其中HCC50_1~HCC50_4为主要流行型别。9株HCC50_3型沙门菌均为2021年所分离,等位基因差异数均<10个,参考流行病学资料,可能有共同来源。HCC50_1型别内部,2个单克隆子型别HCC5_1和HCC5_2在2022和2023年均有检出,显示这2个单克隆株在本地流行。HCC50_2和HCC50_4可以分为25个HCC5型别,呈散发。耐药基因方面,96株非伤寒沙门菌β-内酰胺类耐药基因bla TEM-1、氨基糖苷类耐药基因aph(3'')-Ib和aph(6)-Id总携带率均为80.21%(77/96),四环素类耐药基因tet(A)、tet(B)和tet(M)总携带率为69.79%(67/96),磺胺类抗生素耐药基因sul2基因总携带率为73.96%(71/96)。结论全基因组cgMLST分型分辨率高,可以多层次地描述沙门菌种群结构,鉴定散在暴发克隆,是流行病学溯源的重要工具。西安市非伤寒沙门菌存在优势流行克隆群,且普遍携带多种耐药基因,表现出多重耐药趋势,应加强耐药监测和管理。; 李浩栾阳夏茹意赵贺; 关键词：非伤寒沙门菌分子分型耐药基因

2022-2023年成都市0~6岁儿童侵袭性非伤寒沙门菌肠炎的临床和药敏特征: 2025年; 目的了解成都市儿童侵袭性非伤寒沙门菌(non-typhoidal Salmonella,NTS)肠炎的临床特征和耐药情况,为临床合理用药和经验治疗提供参考。方法回顾性分析2022年1月—2023年12月四川省成都市粪便标本细菌培养出NTS的130例侵袭性细菌性肠炎患儿的临床资料,以及NTS的药敏试验结果。结果NTS感染主要集中在4~9月份(113例,86.9%),8月份为高峰期(36例,27.7%)。婴幼儿(月龄<36个月)占86.2%(112/130),主要症状为腹泻(130例,100%)、发热(123例,94.6%)和血便(112例,86.2%)。130株NTS对头孢曲松和头孢噻肟的敏感率分别为64.6%和63.8%。对哌拉西林他唑巴坦、呋喃妥因(硝基呋喃类)的敏感率均>90.0%。多重耐药菌株检出率为48.5%(63/130);38例(29.2%)患儿使用第三代头孢菌素的临床疗效与药敏结果不一致。结论成都地区0~6岁儿童侵袭性NTS肠炎患病高峰在8月份,婴幼儿为高发人群。NTS耐药情况比较严峻,哌拉西林他唑巴坦可能是治疗儿童多重耐药NTS感染的有效选择,硝基呋喃类抗菌药物可能有望用于治疗多重耐药NTS感染。; 杨玲蓉周春婷郭静吴雨露熊复; 关键词：肠炎沙门菌药敏儿童

34例小儿鼠伤寒沙门菌感染防治分析探讨: 2024年; 分析小儿鼠伤寒沙门菌感染防治方法,旨在为相关人员的研究工作提供参考资料。方法选择2021.1.5~2023.12.5本院儿科收治的34例已经确诊为鼠伤寒沙门菌感染小儿患者为研究样本。患者入院后,对其开展对症治疗。在此基础上,为病患开展以哌拉西林钠他唑巴坦钠、头孢曲松为主要方案的临床治疗。分析结果。结果患者疾病治疗总有效率为 88.24%,和干预前相比,干预后患者的血清白蛋白值更低,P<0.05;干预后患者的血清内PCT以及hsCRP值明显更低,P<0.05;和干预前相比,干预后患者的WBC、中性粒细胞、血小板更低,P<0.05;患者接受疾病治疗期间内,未出现不良反应。患者对于疾病治疗耐受;患者对于多种抗生素表现出耐药。阿米卡星敏感率最高,为96.8%;极少数菌株表现出耐药性,耐药率仅为4.2%。复方新诺明的耐药率高达58.1%;氨苄西林/舒巴坦的耐药率为25.8%,中敏率则为32.3%;环丙沙星和氯霉素耐药率分别为19.4%和45.2%。结论对于小儿鼠伤寒沙门菌感染患者,应用以哌拉西林钠他唑巴坦钠、头孢曲松为主的方案治疗疾病能取得满意成效。该法安全性强,有效性高,值得进一步推广。; 钟伟明李红森张天貌欧汉贞谢佳美; 关键词：小儿患者鼠伤寒沙门菌感染

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