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ENO1单链抗体嵌合抗体的构建
目的本实验构建ENO1单链抗体原核与真核载体及嵌合抗体真核载体,通过在BL21及Expi293FTM细胞中进行表达,获得特异性的ENO1单链抗体嵌合抗体。方法1.以实验室前期保存pFast Bac-Dual-E...
陈圆圆
关键词:宫颈癌单链抗体人-鼠嵌合抗体蛋白表达
用于定量检测抗gp210抗体-嵌合抗体的构建
原发性胆汁性胆管炎(PBC)是一种慢性的胆汁淤积性自身免疫性肝病,可发展为肝硬化和肝功能衰竭。抗线粒体抗体(AMA)和抗核抗体(ANA)是PBC临床检测的主要特异性自身抗体,AMA不具备评估PBC患者的预后价值,而抗gp...
李虎
关键词:人-鼠嵌合抗体
HSV-IgM-嵌合抗体制备及稳定细胞株构建工艺开发被引量:1
2023年
为实现体外大规模制备单纯疱疹病毒HSV-IgM(HSV1,HSV2)嵌合抗体,本研究通过RNA连接酶介导的cDNA末端快速扩增(RNA ligase-mediated rapid amplification of cDNA ends,RLM-RACE)技术获取其对应杂交瘤细胞基因序列,构建嵌合抗体至真核表达载体,在CHO-S细胞中稳定表达所需目的蛋白。同时优化稳定细胞株筛选工艺,对细胞池构建阶段和单克隆筛选阶段的加压条件进行摸索与探究,最后目的抗体采用蛋白L亲和纯化法进行纯化并进行生物活性检测;最终成功制备899 kDa和909 kDa的稳定高表达重组IgM抗体(HSV1,HSV2)细胞株。结果表明,最适筛选压力为20P200M(一轮加压)和50P1000M(二轮加压);使用加压培养基进行单克隆筛选抗体表达量较高,HSV1-IgM和HSV2-IgM单克隆最终表达量分别为1620 mg/L和623 mg/L。本研究为HSV1和HSV2的IgM系列重组抗体质控品开发以及体外高表达分泌IgM亚型抗体提供理论与实践基础。
崔亚敏田晓平孙静静王志强赵巧辉李桂林
抗伪狂犬病病毒gD蛋白--嵌合抗体c5G7的构建及生物学功能研究
伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是由伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)感染引起的多种家畜和野生动物以发热、奇痒(猪除外)以及脑脊髓炎为主要特征的传染病,对国内外养猪业危害巨大。2017...
邓跃
关键词:伪狂犬病病毒人-鼠嵌合抗体卵巢细胞生物学功能
一种131I标记的抗CD80-嵌合抗体及其制备方法
本发明涉及一种<Sup>131</Sup>I标记的抗CD80嵌合抗体及其制备方法。所述标记抗体按照以下方法制备:(1)使用30μg Iodogen碘标管,加入20μL的0.04M PB+0.1M NaCl溶液,继续...
翟士军邵印麟张玉娜
B7-1-嵌合抗体对小慢性移植物抗宿主病(cGVHD)狼疮样肾炎的免疫干预效应被引量:3
2017年
目的探讨在诱导c GVHD小狼疮样肾炎模型并通过各项指标鉴定其造模成功的基础上,运用自行研制的B7-1-嵌合抗体阻断B7/CD28共刺激信号通路对小狼疮样肾炎模型病理损伤的逆转效应。方法将6~8周龄雌性(C57BL/6×BALB/c)BCF1小随机分为4组,模型组于0、3、7和11 d经眼眶静脉注射100μL雌性亲代BALB/c小脾脏细胞107/只。抗体干预组在造模后第1、3、5、8、15、30及60天分别经眼眶静脉注射100μL B7-1-嵌合抗体(克隆号2B11)200μg/只,环磷酰胺(CTX)干预组在末次注射淋巴细胞后第1、3、5、8、15天分别腹腔注射100μL CTX 2.5 mg/只。按照上述时间点分析小抗ds DNA抗体、ANA及尿蛋白含量,12周时处死小观察肾脏组织HE染色、免疫复合物(IC)沉积等情况。结果模型组100%小出现蛋白尿,尿蛋白含量为++^++++,抗体干预组12周时仅有30%的小出现蛋白尿,尿蛋白含量为+^++;12周时与模型组相比,抗体干预组小血清抗ds DNA抗体阳性率由50%降至0;抗体干预组ANA阳性率由90%降至40%,且荧光面积与荧光亮度均下降;HE染色镜下观察,抗体干预组肾小球囊腔大小较为均一,炎性细胞浸润减少;直接免疫荧光法可见抗体干预组肾小球血管襻IC沉积减少。结论 B7-1-嵌合抗体可通过阻断或削弱B7/CD28共刺激信号通路,减少自身抗体和IC生成,逆转狼疮肾炎的病理损伤,提示该自行研制的B7-1-嵌合抗体对狼疮肾炎具有潜在的防治作用。
朱莹王婧沈立军王志遥颜天铭王玉玉邱玉华
关键词:免疫干预CGVHD
抗埃博拉病毒核蛋白NP-嵌合抗体的研究
2016年
埃博拉病毒感染致死率最高可达90%,属烈性传染病,检测诊断对于疫情控制就显得异常重要。目前我国实验室通过实时定量荧光PCR检测埃博拉病毒核酸进行确诊,但耗时相对较长,对检测的员和仪器要求较高。ELISA法检测血清是病原学诊断的主要指标,该种检测方法简单易操作,能够有效判断患者是否感染埃博拉以及感染程度,可用于流行病学调查,血清学指标的检测可以作为核酸检测的有力补充。由于埃博拉出血热在我国境内尚无病例出现,尤其需要储备血清学检测阳性质控物。通过基因工程抗体技术构建并表达抗埃博拉病毒核蛋白NP-嵌合抗体,为埃博拉出血热血清学检测做源阳性对照储备。采用RT-PCR技术,从分泌抗埃博拉核蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株中分离克隆抗体轻重链可变区基因,对其进行序列分析。根据序列分析的结果,设计特异性引物将抗体可变区基因VH、VL分别克隆至携带有抗体轻重链恒定区基因的真核表达载体HL51-14,瞬时转染293T细胞,表达并纯化获得嵌合IgG抗体,随后对其进行了免疫学检测和功能鉴定。结果表明正确构建抗埃博拉病毒核蛋白嵌合抗体真核表达载体,成功表达并纯化获得两株嵌合单抗。
周荣苹孙丽娜刘洋芜为李川梁米芳仇佩虹
关键词:杂交瘤细胞
抗埃博拉病毒核蛋白NP-嵌合抗体以及抗原结合表位的研究
埃博拉出血热(Ebola hemorrhagic fever)是一种由埃博拉病毒(Ebola virus)引起的急性病毒性传染病,是一种致死率很高的兽共患病。主要通过患者的血液和排泄物传播,临床主要表现为急性起病,发热...
周荣苹
关键词:杂交瘤细胞免疫学特性
B7-1-嵌合抗体对Pristane诱导的小狼疮样肾炎模型的免疫干预效应及分子机制的研究
B7-1(又称CD80)分子是一种共刺激分子,主要表达于抗原提呈细胞(antigen presenting cell,APC)表面,其受体为T淋巴细胞表面CD28家族分子,二者结合后可介导 T细胞活化、增殖与分化,从而发...
沈辉
关键词:狼疮样肾炎B7-1分子嵌合抗体免疫干预
B7-1-嵌合抗体对小狼疮样肾炎模型的免疫干预效应被引量:4
2015年
目的:在运用化学法建立小狼疮样肾炎模型并对其进行生物学鉴定的基础上,探讨B7-1-嵌合抗体阻断B7/D28信号通路对小狼疮样肾炎模型病理损伤的逆转效应。方法:取6周龄雌性C57BL/6J小,予一次性腹腔注射Pristane 0.5ml/只,每月定期检测小的尿蛋白、ANA及肾脏病理学改变。取尿蛋白含量达到++,ANA荧光强度达到++的小随机分为3组,每组5只。抗体干预组用B7-1-嵌合抗体经眼眶静脉序贯给药,阳性对照组注射免疫抑制剂CTX,阴性对照组注射同型Ig G。每月定期检测尿蛋白及ANA,干预至3个月时,处死小,取肾脏进行H&E染色分析,免疫复合物(IC)检测及透射电镜观察。结果:Pristane诱导至4个月时,80%的小尿蛋白含量达到+^+++,血清ANA荧光强度为++^+++,出现尿蛋白及ANA的小,其肾小球炎性细胞侵润,肾小管上皮样细胞可见水肿样变性、血管充血明显,纤维组织增生。抗体干预后,尿蛋白逐渐由++^+++降为±^++,ANA由++^+++降为+^++。与阴性对照组比较具有统计学差异(P<0.01)。肾脏HE染色分析的结果显示,抗体干预组肾小球炎性细胞侵润及肾小管充血等表现均得到明显改善。免疫荧光染色可见抗体干预组抗原抗体复合物(IC)的荧光强度明显减弱。经透射电镜观察,抗体干预组与阴性对照组相比,肾小球的电子致密物沉积减少,基底膜厚度趋于均匀。结论:B7-1抗体通过抑制B7-1/CD28信号通路下调机体的免疫应答,减少自身抗体的产生,对自身免疫造成的病理损伤具有逆转作用。
沈辉朱玉强孔永王婧朱华亭於葛华蔡磊朱莹王志瑶邱玉华
关键词:B7-1人-鼠嵌合抗体降植烷狼疮样肾炎抗核抗体

相关作者

王琰
作品数:163被引量:556H指数:14
供职机构:中国人民解放军
研究主题:噬菌体抗体库 抗体 单链抗体 噬菌体抗体 抗体库
王硕
作品数:24被引量:18H指数:3
供职机构:华中科技大学同济医学院
研究主题:人-鼠嵌合抗体 CD71 卵泡发育及排卵 卵泡发育 小鼠
邱玉华
作品数:125被引量:391H指数:11
供职机构:苏州大学
研究主题:单克隆抗体 CD28 嵌合抗体 共刺激分子 B7-1
叶庆
作品数:73被引量:208H指数:8
供职机构:华中科技大学同济医学院
研究主题:人-鼠嵌合抗体 脑出血 单链抗体 CD71 血管新生
瞿秋霞
作品数:46被引量:59H指数:5
供职机构:苏州大学附属第一医院
研究主题:CD40 PD-L1 人-鼠嵌合抗体 肿瘤微环境 嵌合抗体