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FOXC1人表皮干细胞向汗腺细胞分化的影响: 2024年; 目的探究叉头框C1(FOXC1)对人表皮干细胞向汗腺细胞分化的影响及可能机制。方法收集2021年1月至2022年6月行包皮环切术7例的患者正常包皮组织,分离培养得到表皮干细胞,采用慢病毒介导FOXC1基因进行转染,并为过表达组、干扰组和对照组,RT-PCR及Western blot检测细胞FOXC1 mRNA及蛋白表达,MTT实验及吉姆萨染色检测细胞增殖水平、克隆形成率,ELISA检测培养基中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9表达,激光共聚焦显微镜检测Ca^(2+)荧光强度,Western blot检测细胞角蛋白(CK19)、CK18、癌胚抗原(CEA)、β1整合素(ITGB1)表达。结果与对照组比较,过表达组细胞中FOXC1 mRNA及蛋白相对表达量、细胞增殖水平、细胞克隆形成率、Ca^(2+)荧光强度、MMP-2、MMP-9、表皮干细胞标记物CK18、CEA蛋白表达量升高(P<0.05),ITGB1、CK19蛋白表达量降低(P<0.05);与对照组比较,干扰组中FOXC1 mRNA及蛋白相对表达量、细胞增殖水平、细胞克隆形成率、Ca^(2+)荧光强度、MMP-2、MMP-9、表皮干细胞标记物CK18、CEA蛋白表达量降低(P<0.05),ITGB1、CK19蛋白表达量升高(P<0.05)。结论FOXC1可促进表皮干细胞向汗腺细胞分化的表型改变,其作用可能与其能促进表皮干细胞增殖及上调Ca^(2+)、MMP-2、MMP-9表达有关。; 赵亚平刘坤坤高玮高慧谢淼; 关键词：表皮干细胞汗腺细胞

人表皮干细胞的分离培养方法及装置: 本发明公开一种人表皮干细胞的分离培养方法及装置，涉及干细胞培养技术领域。本发明分离培养方法包括材料选取、预处理、表皮修剪过滤、酶消化吹打、过滤离心、单细胞悬液制备、恒温孵育培养，采集小儿包皮后，清洗消毒去除皮下组织，与现...; 陈志超赵振民张心灵李义

人表皮干细胞的分离培养方法及装置: 本发明公开一种人表皮干细胞的分离培养方法及装置，涉及干细胞培养技术领域。本发明分离培养方法包括材料选取、预处理、表皮修剪过滤、酶消化吹打、过滤离心、单细胞悬液制备、恒温孵育培养，采集小儿包皮后，清洗消毒去除皮下组织，与现...; 陈志超赵振民张心灵李义

复合人表皮干细胞的猪脱细胞真皮基质对裸鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响被引量：2: 2022年; 目的探讨复合人表皮干细胞(ESC)的猪脱细胞真皮基质(ADM)对裸鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响。方法采用实验研究方法。采用数码相机拍照观察猪ADM形态,采用苏木精-伊红(HE)染色观测猪ADM中细胞残留,采用扫描电子显微镜观察猪ADM表面结构,采用红外光谱仪分析猪ADM二级结构,采用动态光散射粒度分析仪分析猪ADM粒径,采用纳米粒度电位仪分析猪ADM电位。采用倒置荧光显微镜观察猪ADM在培养基中放置30 min、1 d、5 d的形态(样本数为2);采用随机数字表法(分组方法下同)将猪ADM分为5 min组、10 min组、20 min组、30 min组、60 min组、120 min组,常温静置相应时间,称量法计算吸水量(样本数为3);将Swiss小鼠胚胎成纤维细胞(Fb)分为仅有培养基的空白对照组和另加入相应终质量浓度的ADM浸提液的50.0 g/L ADM浸提液组、37.5 g/L ADM浸提液组、25.0 g/L ADM浸提液组、12.5 g/L ADM浸提液组、6.5 g/L ADM浸提液组,分别于培养24、48、72 h,采用细胞计数试剂盒8法检测细胞增殖率并进行细胞毒性分级(样本数为5);将1只6周龄雄性SD大鼠红细胞分为生理盐水组、超纯水组及添加相应终质量浓度猪ADM浸提液的5 mg/mL ADM浸提液组、10 mg/mL ADM浸提液组、15 mg/mL ADM浸提液组,于反应3 h,采用酶标仪检测血红蛋白的吸光度值代表猪ADM血液相容性(样本数为3)。从陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院泌尿外科2020年7月收治的1名6岁健康男童包皮环切术后废弃包皮中分离培养ESC并采用流式细胞术鉴定。混合培养法构建复合ESC的猪ADM(以下简称ESC/ADM)颗粒,培养3 d后采用HE染色和激光扫描共聚焦显微镜观察ESC/ADM复合效果。将36只7~8周龄雄性无胸腺裸鼠分成单纯磷酸盐缓冲液(PBS)组、单纯ADM组、单纯ESC组、ESC/ADM组,每组9只,并建立全层皮肤缺损创面模型,伤后即刻,创面均一次性采用相应试剂处理。分别于伤后1、7、1; 赵小红郭熠城陈泓豪李雪王颖倪文强邢孟秋张锐余时沧潘银根詹日兴罗高兴; 关键词：干细胞研究表皮干细胞复合基质

人表皮干细胞诱导为角膜上皮细胞的方法: 本发明提供了一种人表皮干细胞的体外诱导向角膜上皮样细胞分化的方法，其中使用了特定的角膜促进肽，能够显著提高角膜上皮细胞的分化效率。; 杨骏余兵生; 文献传递

利用转基因技术提高人表皮干细胞诱导为角膜上皮细胞效率的方法: 本发明提供了一种利用转基因技术提高人表皮干细胞诱导为角膜上皮细胞效率的方法。其包括将EEFSEC过表达载体构建成功，并转入干细胞。EEFSEC过表达载体能安全、有效地对干细胞进行EEFSEC基因修饰，不仅能够增加干细胞的...; 王皓毅孔焕育杜小明杨骏余兵生; 文献传递

转录组水平探讨人富血小板血浆调控人表皮干细胞促创面再上皮化的机制被引量：9: 2020年; 目的分析人富血小板血浆(PRP)调控人表皮干细胞(ESC)的靶基因。方法(1)收集陆军军医大学第一附属医院行泌尿外科手术的6例男性患者术后弃用的包皮组织,患者年龄为5~25岁,既往身体健康,无泌尿系统感染,采用快速贴壁法培养人ESC并进行形态学观察及鉴定。收集解放军南部战区总医院1名29岁女性健康志愿者静脉血40 mL,采用二次离心法提取PRP。(2)将培养成功的原代人ESC按照随机数字表法分为对照组和PRP处理组,每组3孔。对照组细胞不行特殊处理;PRP处理组待细胞贴壁12 h,在培养基中加入PRP,使其最终体积分数为2.5%。提取RNA应用RNA测序技术进行2组人ESC转录组测序和数据分析,以错误发现率<0.05、差异倍数≥4为标准应用Dr.Tom数据挖掘系统筛选差异表达基因,对获得的差异表达基因进行基因本体论(GO)富集分析找出显著富集的GO条目。再用京都基因和基因组(KEGG)信号通路注释分析进一步寻找差异表达基因可能参与的生物学过程或者代谢通路。最后,选取与再上皮化过程相关且差异表达明显的基因,利用实时荧光定量反转录PCR验证基因的差异表达情况。对数据行独立样本t检验。结果(1)培养细胞呈克隆样生长,形态为铺路石样,CD49f阳性率达95.132%、CD71阳性率为0.006%,证明ESC原代培养成功。(2)质控数据分析显示,选取样本质量较好,序列比对百分比较高,满足测序要求。(3)测序数据显示,2组间共有449个差异表达基因,其中上调基因354个、下调基因95个,进一步聚类分析确定2组间有18个显著上调基因和5个显著下调基因。GO富集分析以及KEGG信号通路注释分析表明,显著差异表达基因主要富集在表皮构建和角化过程,同时可能与白细胞介素17信号通路相关。(4)选取了与再上皮化过程相关且差异表达明显的角蛋白19、角蛋白10以及S100A7基因进行验证。实时荧光定量反转录PCR显示,�; 许鹏程贺伟峰程飚; 关键词：富血小板血浆人表皮干细胞

RCCS模拟微重力对人表皮干细胞生长特性和代谢组学影响的研究: 目的：随着载人航天技术的迅猛发展，航天员在太空中驻留的时间将不断延长，伴随而来的意外创伤风险亦随之增加。应激损伤和创伤是航天员在航天飞行任务中的主要威胁之一，最常见的创伤为皮肤软组织损伤。研究发现，皮肤创伤的修复过程中有...; 李彬彬; 关键词：航天医学皮肤软组织损伤人表皮干细胞代谢组学; 文献传递

利用人表皮干细胞和成纤维细胞3D打印皮肤组织的初步研究: 3D打印皮肤组织表皮层的种子细胞常用人角质形成细胞系和分离自皮肤组织的角质形成细胞。人角质形成细胞系为转化细胞，其性状和基因表达与正常的角质形成细胞有差异;分离自皮肤组织的角质形成细胞则扩增次数有限。表皮干细胞(Epid...; 苏浩; 关键词：皮肤组织表皮干细胞成纤维细胞; 文献传递

人表皮干细胞诱导为角膜上皮细胞的方法: 本发明提供了一种人表皮干细胞的体外诱导向角膜上皮样细胞分化的方法，其中使用了特定的角膜促进肽，能够显著提高角膜上皮细胞的分化效率。; 杨骏余兵生

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