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一种体外诱导IPS细胞分化生真皮纤维细胞的方法及应用
本发明属于细胞工程技术领域,具体涉及一种体外诱导IPS细胞分化生真皮纤维细胞的方法及应用。所述的方法为想培养基中添加特定的细胞分化剂A‑D和消化酶。其中,所述的细胞分化剂A包括Ⅱ型胶原酶、胎牛血清、青霉素和链霉素;...
陈风辉
纳秒脉冲电场刺激促进真皮纤维细胞骨的实验研究
2023年
目的 探究超短纳秒脉冲电场(Nanosecond Pulsed Electric Field,nsPEF)是否能够促进纤维细胞细胞的表型转化。方法 用0、5 kV/cm的场强刺激纤维细胞,观察其在普通培养基和三向分化诱导培养基中生长情况,蛋白印迹测定细胞内调控生长及分化Hippo通路下游信号分子水平,并通过体内注射细胞-凝胶复合体进行裸鼠体内骨实验。结果 5kV/cm nsPEF促进了纤维细胞的增殖,并促进了骨、软骨分化,但对脂分化影响不显著。低能量脉冲电场刺激抑制了Hippo通路下游各信号分子磷酸化水平,促进了裸鼠体内骨,灰度分析显示,YAP1及LATS1的磷酸化蛋白与非磷酸化蛋白比值在5 kV/cm的脉冲电场刺激后明显降低,提示HIPPO信号通路受到抑制(P<0.05)。结论 低强度nsPEF刺激有效促进了纤维细胞的增殖和表型转化,并在裸鼠模型上证实了可行性和有效性。
来经天王泽伟董延钊姚成俊周海英Ahmad Alhaskawi李鹏飞涂田陈永刚Sahar Ahmed Abdalbary卢荟
关键词:成骨细胞人真皮成纤维细胞
视蛋白3调控真皮纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白生被引量:2
2023年
目的研究视蛋白3在正常真皮纤维细胞中对Ⅰ型胶原蛋白生的影响及其可能的机制。方法取小儿包皮真皮纤维细胞分离、培养、传代,至3~5代,用荧光定量PCR、蛋白免疫印迹分别检测视蛋白1~5的表达,细胞免疫荧光检测视蛋白3及Ⅰ型胶原蛋白表达及定位。设计针对视蛋白3的小干扰RNA,利用脂质体转染入正常真皮纤维细胞,分别用荧光定量PCR、蛋白免疫印迹检验视蛋白3抑制效率。功下调视蛋白3后,用荧光定量PCR、免疫印迹法、酶联免疫吸附测定及细胞免疫荧光检测Ⅰ型胶原蛋白表达变化;通过CCK-8及EDU检测细胞增殖活力,流式细胞仪检测细胞周期,Transwell检测细胞迁移能力;通过蛋白免疫印迹法检测PI3K、AKT及磷酸化蛋白p-PI3K、p-AKT的表达情况。最后抑制通道蛋白AKT的磷酸化,通过蛋白免疫印迹法检测Ⅰ型胶原蛋白表达变化。结果视蛋白1~5均在正常真皮纤维细胞中表达,其中视蛋白3基因及蛋白表达水平较其他视蛋白表达高,差异有统计学意义(P<0.05)。下调正常真皮纤维细胞中视蛋白3后,细胞及分泌Ⅰ型胶原蛋白水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);细胞增殖、迁移能力减弱,差异有统计学意义(P<0.05);细胞周期中S期比例明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);磷酸化蛋白p-PI3K、p-AKT的蛋白表达水平被明显抑制;抑制通路蛋白AKT的活化后,细胞Ⅰ型胶原蛋白水平降低。结论视蛋白3参与调控正常真皮纤维细胞中Ⅰ型胶原蛋白的合,可能是创伤愈合、纤维化相关疾病及医疗美容潜在的治疗靶点。
牟慧玲曾雯董仙汪宇张伟冯江龙兰应华罗欢欢叶藤陆洪光
关键词:成纤维细胞
过表达TGF-β1调控脐带间充质干细胞的自噬与真皮纤维细胞的互作研究
【目的】干细胞与再生医学的研究体现了重大的临床应用价值,给皮肤大面积深度烧伤患者的救治带来了希望。然而,由于烧伤后创面环境存在很多不利于干细胞发挥创面修复功能的条件,为当前亟待解决的问题之一。转化生长因子(Transf...
张晨颖
关键词:人脐带间充质干细胞自噬转化生长因子Β-1成纤维细胞
Nrf2信号通路调控自噬对UVA诱导真皮纤维细胞凋亡的作用被引量:1
2023年
目的探讨Nrf2信号通路介导的细胞自噬在UVA诱导皮肤纤维细胞凋亡过程中的作用。方法体外培养正常皮肤纤维细胞,分为对照组、UVA组、自噬诱导剂雷帕霉素(rapamycin,RAPA)组、自噬抑制3-甲基嘌呤(3-methyladenine,3-MA)组、核因子E2相关因子2(Nrf2)抑制剂(ML385)组及干涉(siRNA)组;各实验组经8 J/cm^(2)的UVA照射;采用流式细胞术检测纤维细胞凋亡;CCK-8检测细胞活性变化;Western blot检测细胞自噬及凋亡关键分子、p62及Nrf2蛋白表达水平。结果经8 J/cm^(2)的UVA照射后纤维细胞凋亡比例增加、胞内自噬水平显著升高;自噬抑制剂3-MA处理后可显著促进UVA照射引起的纤维细胞凋亡;而自噬促进剂RAPA处理细胞后,细胞凋亡率较UVA组相比显著降低(P<0.01);与对照组相比,UVA照射后胞核Nrf2表达显著增高;ML385阻断Nrf2入核及使用siRNA干涉Nrf2表达后,自噬关键蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ降低(P<0.01),p62表达显著减少(P<0.01),凋亡相关蛋白Cleaved Caspase3表达增加(P<0.01)。结论UVA照射可通过Nrf2及下游p62信号通路上调细胞自噬水平,抑制UVA诱导纤维细胞凋亡。
毛汉潇刘汝兰谭自敏谭小琦熊霞何渊民
关键词:UVA成纤维细胞细胞自噬
橙皮素对UVA诱导的真皮纤维细胞光损伤的保护作用及机制研究
背景皮肤是体最大的器官,在抵御紫外线中起着重要的屏障作用。目前研究认为,皮肤光损伤主要机制包括皮肤急性炎症、氧化应激、DNA损伤、细胞外基质的降解等。橙皮素是一种天然黄酮类化合物,广泛存在于自然界多种植物中,在植物抵御...
卢志禹
关键词:长波紫外线橙皮素成纤维细胞光损伤
IL-1β通过调节Stathmin/FAK通路促进真皮纤维细胞迁移的作用及机制被引量:2
2023年
目的探讨Stathmin在白细胞介素-1β(IL-1β)调节真皮纤维细胞迁移中的作用及机制。方法使用IL-1β(10 ng/mL)处理细胞24 h模拟体外早期炎症反应,利用小干扰RNA干预Stathmin和FAK表达,通过细胞划痕试验观察细胞迁移,Western blot检测FAK和Stathmin蛋白表达情况。结果与对照组相比,IL-1β处理组细胞迁移明显增加,Stathmin和FAK蛋白表达明显增加;当下调Stathmin或FAK表达后,细胞迁移明显受抑;并且,下调Stathmin表达后,FAK蛋白表达明显降低。结论IL-1β可能通过调节Stathmin/FAK通路促进炎症早期真皮纤维细胞迁移。
何咏磬李凌霏岑蕊言邓雨萌杨桂红雷霞
关键词:IL-1ΒSTATHMINFAK成纤维细胞迁移
IL-1β通过调节stathmin/FAK通路促进真皮纤维细胞迁移的作用及机制
研究背景:  创面愈合最主要的目标是修复受损屏障,恢复组织结构和功能完整性,从而维持内环境稳态。其过程大致可以分为三个阶段:炎症阶段、增殖阶段和组织重塑阶段。皮肤创面的早期炎症反应可以激活中性粒细胞、巨噬细胞,并分泌各种...
何咏磬
关键词:白细胞介素-1ΒSTATHMIN蛋白粘着斑激酶成纤维细胞
细梗蔷薇愈伤组织提取物在真皮纤维细胞及3D表皮模型上的护肤功效探究被引量:1
2023年
通过植物组织培养技术得到细梗蔷薇(Rosa graciliflora)愈伤组织,利用纯水超声提取和真空冷冻干燥工艺获得细梗蔷薇愈伤组织提取物(RCE),然后对RCE进行分检测和体外护肤功效评估。结果表明,RCE含有氨基酸、维生素、有机酸和多酚等多种活性分。体外护肤检测结果表明,RCE对真皮纤维细胞有一定的增殖作用,0.01%和0.05%RCE能促进真皮纤维细胞分泌Ⅰ型胶原蛋白,与空白对照对比,其Ⅰ型胶原蛋白分别提高83%和79%,作用效果和阳性对照维生素C相似。此外,在重建的3D表皮模型上,0.01%RCE能够显著促进细胞增殖活性标记物Ki67、皮肤屏障功能标志物丝聚蛋白(Filaggrin)及外膜蛋白(Involucrin)的表达,相比空白对照,其阳性率分别提高308%,853%和349%,具有显著差异性。研究发现RCE具有潜在的延缓皮肤衰老和提高皮肤屏障功能的作用,有望作为一种绿色原料添加在化妆品中使用。
李惠玲周春霞章漳
关键词:愈伤组织皮肤屏障成纤维细胞
一种次氯酸探针CPP诱导真皮纤维细胞向血管内皮细胞分化的机制研究
崔小玲

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王春波
作品数:291被引量:1,004H指数:18
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作品数:876被引量:5,222H指数:33
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研究主题:细胞因子表达 丹皮酚 真皮成纤维细胞 TNF-Α诱导 人真皮成纤维细胞
韩盈
作品数:16被引量:66H指数:5
供职机构:第二军医大学附属长海医院
研究主题:丹皮酚 经皮给药 微乳凝胶 微乳 细胞因子表达