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一种直接针对的半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法与应用
本发明属于食品安全免疫检测技术领域,具体公开了一种的半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法与应用。所述半抗原具有如式(Ⅰ)所示的结构:<Image file="DEST_PATH_IMAGE002.G...
沈玉栋朱帆王弘杨金易徐振林肖治理孙远明雷红涛
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一种直接针对的半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法与应用
本发明属于食品安全免疫检测技术领域,具体公开了一种的半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法与应用。所述半抗原具有如式(Ⅰ)所示的结构:<Image file="DEST_PATH_IMAGE002.G...
沈玉栋朱帆王弘杨金易徐振林肖治理孙远明雷红涛
对NIH/3T3细胞中DNA聚合酶β的致突变作用被引量:4
2012年
背景:近年来研究发现食管癌细胞中存在DNA聚合酶β的突变。目的:观察对NIH/3T3细胞中DNA聚合酶β基因序列的影响,研究致细胞变异的机制。方法:用不同浓度(2,4,6,8μmol/L)的作用于NIH/3T3细胞,并设置对照组。用RT-PCR法从细胞总RNA中扩增出DNA聚合酶β基因cDNA序列,应用T-A克隆技术,克隆至pGEM-T载体后进行测序,分析其序列变化。结果与结论:2μmol/L处理后的细胞内DNA聚合酶β基因序列无任何变化。而4μmol/L组中DNA聚合酶β基因有1个位点发生突变,8μmol/L组和16μmol/L组中各有2个位点发生突变,此3组的突变存在相同的位点。结果证实,可导致NIH/3T3细胞中的DNA聚合酶β发生点突变,浓度越高,点突变的数量越多,且存在突变活跃位点。
朱涵樊红琨章茜
关键词:互隔交链孢酚DNA聚合酶ΒNIH/3T3细胞克隆突变
对NIH/3T3细胞的急性毒性作用被引量:3
2009年
目的研究(AOH)对小鼠胚胎成纤维细胞NIH/3T3的急性毒性作用。方法将对数生长期的NIH/3T3细胞分为10、50μmol/L AOH处理组和溶剂对照组,观察染毒细胞形态学变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法研究细胞存活率,采用彗星实验观察细胞的DNA损伤程度,利用流式细胞术(FCM)检测对细胞周期的影响。结果细胞处理后,出现明显的细胞形态学变化。MTT结果表明,10、50μmol/L AOH处理组细胞抑制率(分别为19.88%,32.47%)显著高于溶剂对照组(P<0.05)。10、50μmol/L AOH组在彗星实验中细胞拖尾率为35.87%和71.83%,尾部DNA含量为(36.18±18.6)和(51.3±21.6),显著高于溶剂对照组的拖尾率(14.78%)和尾部DNA含量(21.29±15.60)(P<0.05);10μmol/L AOH处理组对NIH/3T3细胞周期影响不明显,而50μmol/L AOH处理组引起S期增高和明显的G2/M期阻滞(P<0.05)。结论AOH可诱导NIH/3T3细胞的DNA损伤、抑制细胞增殖,并诱导G2/M期细胞阻滞。
赵继敏马俊芬赵军杨洪艳郑智敏董子明
关键词:互隔交链孢酚NIH/3T3细胞急性毒性
对NIH3T3细胞PKA-CREB信号通路的影响
2009年
目的:探讨(Alternariol,AOH)对小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3中PKA-CREB信号通路的影响.方法:20μmol/L AOH作用NIH3T3细胞1 h,或用PKA特异性抑制剂10μmol/L H89预处理1 h,再进行20μmol/L AOH刺激实验,同时设溶剂对照组.用免疫荧光和免疫细胞化学染色法检测磷酸化PKA催化亚基表达情况,用免疫细胞化学染色法检测磷酸化CREB表达水平.结果:与溶剂对照组相比,AOH诱导NIH3T3细胞中磷酸化PKA催化亚基和磷酸化CREB水平明显增加(P<0.05);用PKA特异性抑制剂H89预处理,降低了AOH激活的PKA催化亚基和CREB的磷酸化水平.结论:AOH能够激活NIH3T3细胞中PKA-CREB信号转导通路,这为探讨AOH致癌的分子机制提供依据.
马俊芬杨璇赵继敏黄幼田杨洪艳郑智敏董子明
关键词:互隔交链孢酚蛋白激酶ACAMP反应元件结合蛋白NIH3T3细胞
激活EC9706细胞DNA聚合酶β表达的信号通路初探被引量:2
2009年
目的:研究(AOH)对食管癌EC9706细胞株中DNA聚合酶β(DNApolβ)表达的影响.方法:以PKA激活剂Forskolin(40μmol/L)为阳性对照,采用免疫细胞化学,WesternBlot方法检测20μmol/LAOH作用EC9706细胞16h后polβ蛋白水平的表达.以PKA特异性抑制剂H89(10μmol/L)预处理EC9706细胞1h,再以20μmol/LAOH作用细胞16h,观察H89阻断AOH激活polβ蛋白表达的作用.结果:免疫细胞化学结果显示,与溶剂对照组和H89处理组相比较,AOH处理组,Forskolin处理组的细胞中polβ表达增高.WesternBlot结果表明,AOH处理组,Forskolin处理组polβ表达分别是溶剂对照组的2.05和3.12倍(P<0.05),而H89组仅为对照组的1.32倍.结论:AOH可以激活食管癌EC9706细胞中polβ基因表达,这可能是通过PKA信号转导通路介导的.
赵继敏李沛杨洪艳黄幼田江亚南赵明耀郑智敏董子明
关键词:DNA聚合酶Β互隔交链孢酚蛋白激酶A信号转导通路
通过PKA-CREB信号通路激活NIH3T3细胞中DNA聚合酶β表达被引量:3
2009年
目的:探讨(AOH)诱导小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3中DNA聚合酶β(DNA polβ)表达增高的分子信号通路。方法:①15μmol/L AOH作用NIH3T3细胞16 h,利用Western blotting方法检测细胞中DNA polβ的表达,并利用磷酸化CREB抗体检测AOH作用后NIH3T3细胞中CREB信号分子是否被激活。②利用PKA-CREB信号通路特异性抑制剂H89预处理NIH3T3细胞1 h,再加入AOH作用,分别检测磷酸化CREB和DNA polβ表达的变化。结果:①与溶剂对照组相比,AOH诱导NIH3T3细胞中DNA polβ表达明显增高,而且磷酸化CREB蛋白含量也明显增加,差异均显著。②用PKA特异性抑制剂H89预处理,可部分抑制NIH3T3细胞中CREB蛋白的磷酸化,并且降低了AOH引起的NIH3T3细胞中DNA polβ的表达增加。结论:PKA-CREB信号通路在AOH诱导的NIH3T3细胞中DNA polβ表达起重要作用。
赵继敏路静刘康栋王瑾瑾杨洪艳黄幼田董子明
关键词:DNA聚合酶ΒCAMP反应元件结合蛋白NIH3T3细胞
增加NIH3T3细胞中DNA聚合酶β表达被引量:3
2008年
目的研究(AOH)对小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3中DNA聚合酶β(DNAPOLβ)表达的影响。方法采用半定量RT-PCR、细胞免疫化学和Western blot方法检测细胞中DNAPOLβmRNA和蛋白的表达。结果与对照组相比,AOH可以引起NIH3T3细胞中DNAPOLβ基因的mRNA水平和蛋白水平表达增高(并呈一定的剂量效应关系)(P<0.05)。结论AOH可以引起NIH3T3细胞中DNAPOLβ基因表达增高,可能有助于细胞应对AOH引起的DNA损伤。
赵继敏金戈李沛赵明耀杨洪艳郑智敏董子明
关键词:DNA聚合酶Β互隔交链孢酚NIH3T3细胞
对NIH3T3细胞中DNA聚合酶β基因的致突变作用
目的:在于观察对NIH3T3细胞中DNA聚合酶β基因突变的影响,探讨致癌可能的机制,并为进一步研究polβ的生物学功能和特性研究提供实验依据。   方法:将本研究室冻存的NIH3T3细胞复苏后培...
朱涵
关键词:互隔交链孢酚DNA聚合酶ΒNIH3T3细胞基因突变
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致DNA聚合酶β基因突变的实验研究被引量:2
2005年
目的观察对NIH/3T3细胞中DNA聚合酶β(DNApolβ)基因突变的影响,研究致癌可能的机制。方法NIH/3T3细胞分为两组:①各正常细胞组;②AOH组,AOH浓度为8μmol·L-1。用RTPCR方法从细胞全RNA中扩增出DNA聚合酶β基因cDNA序列,应用TA克隆技术,克隆至pGEMTeasy载体后进行测序,分析序列变化。结果测序后发现正常组DNA聚合酶β基因序列无任何变化,AOH组中228位点发生TC突变(导致39号氨基酸由Tyr变为His),319位点也有TC突变(导致69号氨基酸由IIe变为Thr)。结论AOH可导致NIH/3T3细胞中的DNA聚合酶β发生点突变,推测AOH的致癌作用可能与引发细胞中DNA聚合酶β基因突变有关。
朱涵何炜赵国强王书春
关键词:DNA聚合酶Β基因突变交链孢酚NIH/3T3细胞细胞组

相关作者

赵继敏
作品数:131被引量:186H指数:6
供职机构:郑州大学
研究主题:食管癌 DNA聚合酶Β 抗肿瘤药物 鳞状细胞 鳞癌细胞
朱涵
作品数:33被引量:60H指数:5
供职机构:郑州大学
研究主题:DNA聚合酶Β 互隔交链孢酚 视网膜色素上皮细胞 视网膜变性疾病 重组慢病毒
董子明
作品数:381被引量:966H指数:14
供职机构:郑州大学
研究主题:DNA聚合酶Β 食管癌 树突状细胞 食管肿瘤 基因突变
杨洪艳
作品数:104被引量:275H指数:7
供职机构:郑州大学基础医学院病理生理学系
研究主题:树突状细胞 DNA聚合酶Β 食管癌 小鼠 食管肿瘤
郑智敏
作品数:79被引量:293H指数:13
供职机构:郑州大学基础医学院
研究主题:树突状细胞 小鼠 DNA聚合酶Β 骨髓肿瘤 马氏钳蝎