公共文化服务平台

搜索到178篇“ 乙酰氨基葡糖苷酶“的相关文章

用中国仓鼠卵巢细胞构建内切-β-N-乙酰氨基葡糖苷酶筛选系统: 2019年; 糖苷水解酶85家族的内切-β-N-乙酰氨基葡糖苷酶具有糖基转移酶活性,利用该类酶,可以合成特定结构N-糖链修饰的糖基化复合物。为构建糖基转移酶筛选系统,将N-乙酰氨基葡萄糖转移酶的跨膜定位区域与绿色荧光蛋白融合表达,成功把带有天冬酰胺连接糖基化位点的单体增强绿色荧光蛋白定位到中国仓鼠卵巢细胞的高尔基体中。流式细胞仪分析显示,融合了定位区域后,绿色荧光蛋白仍可以发出荧光,且在引入糖基化位点后,细胞荧光强度约降低10倍。经衣霉素处理,细胞糖基化被抑制,同时荧光强度减弱。此细胞株荧光强度对于糖基化水平的依赖性表明其在糖基转移酶的进化筛选方面的应用潜力。; 薛威喜多岛敏彦高晓冬; 关键词：绿色荧光蛋白 N-糖基化

布氏锥虫来源内切-β-N-乙酰氨基葡糖苷酶的异源表达和活性鉴定: 2018年; 内切-β-N-乙酰氨基葡萄糖苷内切酶(Endo-β-N-acetylglucosaminidase,ENGase)是一类可以水解N-糖链中核心壳二糖之间β-1,4-糖苷键的糖苷内切酶,其中糖苷水解酶85家族(glycoside hydrolasefamilies 85,GH85)的ENGase除了水解活性之外还具有转糖基活性,能够以切除后再将均一的寡糖链转移到N-糖蛋白的β-N-乙酰氨基葡萄糖(N-acetylglucosamine,GlcNAc)上的方式,改造医药糖蛋白的N-糖基化修饰。通过数据库检索,在布氏锥虫(Trypanosoma brucei)的基因组中找到了GH85家族ENGase的同源序列,并命名为Endo-Tb基因,对其克隆后在带有Nus融合蛋白的原核(E.coli)表达载体上成功表达并纯化。检测到融合蛋白Nus-Endo Tb能够水解高甘露糖型和双天线的复合型糖链,但不能作用于三天线的复合型糖链。同时Nus-Endo Tb可以水解核糖核酸酶B和人类转铁蛋白上的N糖链。当用唾液酸糖肽(SGP)作为糖基供体,MU-GlcNAc作为糖基受体时,通过荧光基质底物四甲基伞形酮(MU)检测到Nus-Endo Tb具有转糖基活性。; 崔娟喜多岛敏彦王宁中西秀树高晓冬; 关键词：布氏锥虫

Ogataea minuta来源的内切-β-N-乙酰氨基葡糖苷酶的异源表达和纯化: 2018年; 在大肠杆菌中表达有活性的Ogataea minuta来源的内切β-N-乙酰氨基葡糖苷酶(EndoOm),利用p ET系统过量表达Endo-Om。在优化宿主菌及培养条件后,镍柱纯化目的蛋白质,并检测纯化后的Endo-Om对荧光标志的寡糖链的水解活性。经IPTG诱导后,目的蛋白质可以很好地表达,但大部分存在包涵体中。通过培养条件优化,16℃在Overnight ExpressTMInstant LB培养基(默克)中培养,实现了Endo-Om在大肠杆菌中的可溶性表达和纯化,并检测到了纯酶的水解活性。在大肠杆菌中成功纯化了有活性的Endo-Om蛋白,为加速研究该酶的结构和功能奠定了基础。; 贾元苓喜多岛敏彦李子杰高晓冬中西秀树; 关键词：异源表达纯化

Ogataea minuta来源的内切-β-N-乙酰氨基葡糖苷酶的底物识别位点研究: 内切-β-N-乙酰氨基葡糖苷酶(ENGase)是一类水解N-糖蛋白中核心壳二糖之间β-1,4-糖苷键的酶类。它具有两大家族,即糖苷水解酶85家族(GH85)和糖苷水解酶18家族(GH18)。GH18,如Endo-H,具有...; 贾元苓; 关键词：异源表达蛋白质工程; 文献传递

一种α-N-乙酰氨基葡糖苷酶活性检测方法、底物和试剂: 本发明提供一种α-N-乙酰氨基葡糖苷酶（EC3.2.1.50）酶活力检测的方法，同时本发明还提供了测定α-N-乙酰氨基葡糖苷酶酶活性的底物和试剂，上述方法、底物和试剂可用于分析测定待测样本（包括人体体液或组织或细胞样本）...; 孙宏博; 文献传递

有机溶剂对棉铃虫N-乙酰氨基葡糖苷酶活力的影响被引量：6: 2005年; 以棉铃虫为材料,经 (NH4 )2SO4 分级沉淀、SephadexG 200分子筛凝胶过滤柱层析和DEAE 32离子交换柱层析分离纯化,获得棉铃虫N 乙酰氨基葡糖苷酶酶制剂.研究几种有机溶剂对棉铃虫N 乙酰氨基葡糖苷酶 (EC3. 2. 1. 14)的活力与构象的影响.结果表明:甲醇、乙醇和乙二醇对酶有先扬后抑的作用,正丙醇和丙三醇对酶有失活作用.低含量的丙酮 (体积分数为 12. 5% )对酶有可逆失活作用,随着丙酮含量的提高,其酶促反应的动力学参数也随之改变,Vmax值降低,Kmapp值不变.在 278nm波长激发下,天然酶内源荧光在 339nm处有特征的荧光发射,其强度随着丙酮含量的上升而减弱,荧光发射峰也逐渐蓝移.这表明丙酮改变了酶的构象.; 黄小红陈清西王君关雄; 关键词：葡糖苷有机溶剂丙酮氨基甲醇

链球菌gordonii FSS2 N-乙酰氨基葡糖苷酶基因的克隆和表达: 2002年; 目的 :N -乙酰氨基葡糖苷酶 (N -acetylglucosaminidase)是链球菌gordonii六种胞外糖苷酶之一。为研究该酶 ,克隆和表达该基因片段。方法 :将链球菌gordoniiFSS2染色体DNA分离提纯 ,用限制性内切酶Sau 3AI不完全酶切 ,产生长度不等的随机片段 ,琼脂糖凝胶电泳分离和回收 2 - 8kpb的随机片段 ,然后与BamHI线性化及 5’端脱磷处理的载体pUC 18连接 ,转化大肠杆菌XL1-Blue;β—半乳糖苷酶筛选系统及酶切 ,检测插入片段。根据N -乙酰氨基葡糖苷酶与特异人工底物X -GlucNac反应 ,有色物质X被释放原理 ,筛选表达克隆。结果 :共有 6×10 6个转化子 ,约 5 0 %转化子含有插入片段 ;检测到 8个N—乙酰氨基葡糖苷酶表达克隆。结论 :所构建的基因组文库具有完整性 ,该基因在大肠杆菌XL1-Blue中成功表达。; 陈一峰; 关键词：克隆链球菌基因文库口腔

中性粒细胞/淋巴细胞比值与2型糖尿病患者肾小管损伤的相关性研究被引量：7: 2022年; 目的探讨中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)与2型糖尿病(T2DM)患者肾小管损伤的关系。方法选取T2DM患者258例,测定中性粒细胞、淋巴细胞绝对值,计算NLR;采用免疫透射比浊法测定24 h尿微量白蛋白(24 h UMA);测定肾小管标志物β2-微球蛋白(β2-MG)、β-半乳糖苷酶(GAL)、视黄醇结合蛋白(RBP)、N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG),以上4种标志物均正常者视为肾小管功能正常,任意1种或以上标志物超过上限视为肾小管功能受损。根据肾小管功能是否受损将患者分为正常组142例,受损组116例,比较2组间NLR水平差异。根据存在任意1种、2种、3种肾小管标志物异常将肾小管功能受损组进行分组,比较各亚组间NLR水平差异。另外,分析NLR与β2-MG、GAL、RBP、NAG的相关性。采用二分类Logistic回归分析T2DM患者肾小管损伤的影响因素。结果受损组NLR水平高于正常组(P<0.05)。随着肾小管标志物异常种类增多、肾小管损伤程度加重,NLR水平逐渐升高(P<0.05)。NLR与β2-MG、GAL、RBP、24 h UMA具有正相关性(r分别为0.191、0.152、0.131及0.158,P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,较高水平NLR、24 h UMA是T2DM患者肾小管损伤的危险因素,而较高水平的HDL-C为其保护因素。结论NLR与T2DM患者肾小管损伤关系密切,可以反映肾小管损伤程度。; 姜莹莹王靖宇孔岩王颖程静丽王珊珊单春艳; 关键词：糖尿病肾病 Β2微球蛋白视黄醇结合蛋白质类乙酰氨基葡糖苷酶肾小管损伤

尿NAG、血清β-TP水平与糖尿病早期肾病的相关性: 2016年; 目的：探讨2型糖尿病（T2DM）患者尿N-乙酰-β-d-氨基葡萄糖苷酶（NAG）、血清β痕量蛋白（β-TP）水平与糖尿病肾病的相关性。方法：选择2012年1月-2015年3月在邯郸市人民医院内科及河北工程大学附属医院内分泌科住院的T2DM患者130例,根据24h尿白蛋白排泄（UAE）水平,患者被分为尿蛋白正常组（55例）,微量蛋白尿组（40例）和大量蛋白尿组（35例）。另选50例同期健康体检者作为健康对照组。测定比较各组尿液NAG含量及血清β-TP水平,并分析其相关性。结果：与健康对照组比较,T2DM患者尿液NAG[（3.4±2.0）U/L比（11.9±3.2）U/L]及血清β-TP水平[（0.53±0.12）mg/L比（0.85±0.24）mg/L]均显著升高（P均〈0.01）;与尿蛋白正常组比较,微量蛋白尿组和大量蛋白尿组尿液NAG[（5.9±3.6）U/L比（9.0±3.9）U/L比（21.0±7.2）U/L]和血清β-TP[（0.64±0.10）mg/L比（0.83±0.23）mg/L比（1.12±0.39）mg/L]水平显著升高,且大量蛋白尿组的显著高于微量蛋白尿组的（P均〈0.05）。直线相关分析显示,T2DM患者尿液NAG水平与血清β-TP水平呈显著正相关（r=0.756,P=0.029）。结论：尿液NAG含量及血清β-TP水平可反映糖尿病早期肾病的病情,对其早期诊断及疗效判断具有较好的临床应用价值。; 张寒刘克宇; 关键词：乙酰氨基葡糖苷酶肾疾病

自制尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶与尿微量白蛋白两项复合室内质量控制物质量评价: 2013年; 目的研制出1种包含尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)和尿微量白蛋白(UMA)2项复合室内质量控制物,并初步评价其质量。方法收集临床肾病患者新鲜尿液,经过一定的处理,研制出1种包含尿NAG和UMA 2个项目的复合室内质量控制物;并对研制的质量控制物进行不同保存温度下的稳定性和瓶间均一性检测。结果在各保存温度下,尿NAG的稳定天数:4℃12 d,-20℃>300 d,-80℃>365 d;UMA的稳定天数:4℃27 d,-20℃>300 d,-80℃>365 d;各个保存阶段测得瓶间均一性良好。结论本次研制的尿NAG和UMA 2项复合室内质量控制物在合适的保存条件下,具备较好的稳定性与瓶间均一性,符合临床使用要求。; 袁咏梅刘和录何亚王利军余素燕许瑞娜陈宝娜; 关键词：乙酰氨基葡糖苷酶白蛋白类

加载更多 ∨

相关作者

用户反馈

相关作者

用户登录

用户反馈