搜索到415篇“ 乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA“的相关文章
- 乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA被引量：1
- 2014年
- HBV共价闭合环状脱氧核糖核酸（cccDNA）是嗜肝 DNA病毒基因组的复制中间体，是嗜肝 DNA 病毒部分基因的mRNA和前基因组 RNA的合成模板，在 HBV感染初期即能检测到，且长期存在于细胞核中。其在 HBV 复制过程中起着关键的作用，它的长期存在也是乙型病毒性肝炎慢性化的主要原因之一。HBV cccDNA肝细胞中持续感染及抗病毒治疗复发之间的关系受到广泛的关注与肯定，现就 HBV cccDNA 常用检测方法及其临床意义作一综述。
- 周龙佘会元王晓英
- 关键词：共价闭合环状DNA乙型肝炎病毒CCCDNA病毒基因组乙型病毒性肝炎脱氧核糖核酸
- 乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA清除的研究进展
- 2023年
- 乙型肝炎是感染乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)引起肝脏慢性炎症性改变为主要特征的一类传染病。长期慢性感染将导致肝纤维化、肝硬化、肝癌等终末期肝病的发生,严重危害人民群众的健康。慢性乙型肝炎病毒感染依然是全球公共卫生健康问题之一。目前临床上使用的抗病毒治疗方案难以实现对乙型肝炎病毒的彻底清除,其根源在于被感染肝细胞核内持续存在具有稳定结构的共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA)。本文对乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA清除的研究进展进行综述,旨在寻找清除cccDNA的途径及办法从而达到乙型肝炎病毒的彻底清除。
- 李成莫雪牛文霞李明明付丽娟
- 关键词：乙型肝炎病毒基因
- 基于PCR-CRISPR-cas13a检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA的试剂盒
- 本发明公开了基于PCR‑CRISPR‑cas13a检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA的试剂盒。本发明提供了一种用于检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA的试剂盒，含有Cas13a蛋白和crRNA，或者二者形成的复合体；所述c...
- 任锋张向颖李浩周育森田原金荣华段钟平陈德喜李伟华
- 基于规律成簇的间隔短回文重复序列及其相关蛋白技术检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA方法的建立被引量：1
- 2022年
- 目的建立一种基于规律成簇的间隔短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR/Cas13a)的乙型肝炎病毒(HBV)共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)检测方法。方法提取2017年6月至2020年10月于首都医科大学附属北京佑安医院就诊的4例乙型肝炎患者肝脏总DNA后,使用HindⅢ内切酶和质粒安全性ATP依赖DNA酶(PSAD)分别进行酶切;根据松弛环状DNA(rcDNA)和cccDNA的结构差异,设计特异性扩增HBV cccDNA的引物,对酶切后的产物进行滚环扩增(RCA)和PCR扩增;并筛选crRNA,建立基于CRISPR/Cas13a技术的HBV cccDNA检测新方法。结果利用α-1-抗胰蛋白酶(A1AT)和HBV表面抗原(HBsAg)引物对双重酶切后的产物进行扩增,验证产物中HBV基因组的存在;利用HBV cccDNA和HBV rcDNA引物对PSDA酶切后的产物扩增,验证了产物中只存在HBV cccDNA;利用RCA后的阳性样本作为模板梯度稀释,然后进行PCR扩增转录后使用CRISPR/Cas13a检测,计算出检测下限为10拷贝/μl。结论本研究建立了RCA-PCR-CRISPR-Cas13a的新型检测方法,可对HBV cccDNA进行高灵敏度和高特异性检测,为乙型肝炎患者抗病毒治疗评估、治疗终点的确定以及调整治疗方案提供了有效的监测手段。
- 王俊文田原范子豪徐玲高耀曹亚玲潘桢桢张向颖宋岩任锋
- 关键词：肝炎病毒乙型共价闭合环状DNA荧光定量聚合酶链反应
- 乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA形成机制的研究进展被引量：4
- 2021年
- 乙型肝炎病毒(HBV)慢性感染是我国慢性病毒性肝炎、肝硬化及相关肝癌的主要致病因素,我国77%的肝硬化和84%的肝细胞癌(HCC)与之有关[1]。抗病毒治疗可明显减缓慢性乙型肝炎(CHB)的疾病进展,使我国近年来HBV相关肝硬化和肝纤维化的死亡率有所下降,但HBV相关肝癌的死亡率并未有明显改变[2]。已有足够的证据表明,慢性乙型肝炎的临床治愈可以进一步减少肝癌的发生。因此,慢性乙型肝炎患者的临床治愈已成为医生和患者的共同诉求。
- 毛天皓刘天旭鲁凤民
- 关键词：慢性病毒性肝炎临床治愈疾病进展慢性感染
- 两种抽提乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA方法的效果比较被引量：1
- 2021年
- 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)作为一种嗜肝DNA病毒,在感染肝细胞后会在细胞核中形成病毒转录复制的模板和基因储存库——共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA),其持续存在是乙型肝炎慢性化和难以治愈的核心,也是此研究领域内的重点。从细胞样品中稳定抽提获取cccDNA对于保证cccDNA检测的准确性至关重要。Hirt法是一种抽提真核细胞染色体外DNA的方法,被用于HBV cccDNA的抽提,但存在操作复杂和耗时长等问题。为简化操作,有研究对Hirt法进行改良,结合硅胶膜离心柱来抽提染色体外DNA,但尚不清楚该法用于HBV cccDNA抽提与传统Hirt法的效果差异。本研究基于HBV cccDNA细胞转染系统、HBV复制细胞系及感染系统,以DNA印迹(Southern blot)和定量聚合酶链式反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)作为检测评价手段,平行比较了传统Hirt-酚/氯仿法与改良Hirt-过柱法抽提HBV cccDNA的效果。结果表明,两种方法具有相当的抽提效率和抽提特异性,而改良Hirt-过柱法耗时更短,提示在进行细胞HBV cccDNA抽提时可选择改良Hirt-过柱法以提高实验效率。
- 胡孔颖金宇焘叶建宇宰文静王洋李雨檬陈捷亮
- 关键词：乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA抽提方法
- 一种利用数字PCR定量检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA的方法
- 本发明公开一种利用数字PCR(ddPCR)定量检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA(cccDNA)的方法，采用T5核酸外切酶处理待测样本；设计特异性扩增cccDNA的引物对和探针，所述引物对序列如SEQ ID NO.:1和...
- 胡源王卓陈彦猛
- 文献传递
- 基于微滴数字PCR技术建立乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA检测方法
- 背景和目的肝脏中共价闭合环状DNA(cccDNA)的存在是乙型肝炎病毒(HBV)持续感染的主要原因。cccDNA目前的检测方法存在灵敏度和特异性方面的不足,亟需建立一种便于操作同时兼具高灵敏和高特异性的cccDNA检测方...
- 陈思思田原徐玲范子豪曹亚玲张向颖段钟平刘梅任锋
- 乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA(cccDNA)检测和清除的研究进展被引量：3
- 2019年
- 慢性乙型肝炎是世界性的一个公共卫生问题,现在治疗药物不能完全清除肝细胞核中的乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA),它的存在导致了病毒的持续感染,所以很难彻底治愈。目前对cccDNA的研究越来越受到重视,只有对其进行全面的了解,才能更好地寻找治愈乙型肝炎病毒感染的方法。现对乙型肝炎病毒cccDNA的结构和调节机制,以及检测和清除的研究进展进行综述。
- 田原任锋
- 关键词：乙型肝炎病毒CCCDNA
- 基于PCR-CRISPR-cas13a检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA的试剂盒
- 本发明公开了基于PCR‑CRISPR‑cas13a检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA的试剂盒。本发明提供了一种用于检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA的试剂盒，含有Cas13a蛋白和crRNA，或者二者形成的复合体；所述c...
- 任锋张向颖李浩周育森田原金荣华段钟平陈德喜李伟华
- 文献传递
