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阿奇霉素及丙氧鸟苷雾化吸入治疗小儿支气管肺炎疗效及炎症因子影响被引量：1: 2023年; 目的探讨阿奇霉素及丙氧鸟苷雾化吸入治疗方法对支气管肺炎患儿的临床疗效以及对炎症因子水平的影响。方法选取2021年8月-2022年8月山东省烟台市北海医院收治的支气管肺炎患儿84例作为研究对象,根据抛币法将患儿随机分为对照组和研究组,每组42例。对照组接受丙氧鸟苷雾化吸入治疗,研究组接受阿奇霉素联合丙氧鸟苷雾化吸入治疗,比较两组临床症状消失时间、住院时间、治疗总有效率、炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)]水平、肺功能[用力肺活量(FVC)、第一秒用力呼气量(FEV_(1))、FEV_(1)/FVC]。结果研究组患儿咳嗽缓解时间、发热消失时间、气促消失时间以及住院时间均短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组患儿治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组TNF-α、IL-1β水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组TNF-α、IL-1β水平均降低,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组FVC、FEV_(1)、FEV_(1)/FVC水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组FVC、FEV_(1)、FEV_(1)/FVC水平均升高,且研究组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论支气管肺炎患儿通过阿奇霉素与丙氧鸟苷雾化吸入联合治疗,疗效确切,可明显缩短临床症状改善时间,减轻机体炎性反应,改善肺功能,值得临床使用。; 孙百弟; 关键词：阿奇霉素丙氧鸟苷小儿支气管肺炎疗效炎症因子

巨细胞病毒嵌合癌胚抗原介导单纯疱疹病毒胸苷激酶联合丙氧鸟苷自杀基因体系靶向性治疗结肠癌的效果被引量：1: 2015年; 目的观察巨细胞病毒(CMV)嵌合以癌胚抗原为启动子,以腺病毒为载体的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因重组构建体Ad-CMV-CEA-HSV/TK联合丙氧鸟苷(GCV)体内抗结肠癌的疗效。方法构建人结肠癌裸鼠移植瘤模型,按不同浓度梯度Ad-CMV-CEA-HSV/TK(1.0×109/kg、5.0×109/kg、10.0×109/kg)经尾静脉注射带瘤小鼠后,腹腔注射相同浓度GCV(50 mg/kg),并设空白对照组及不同浓度的Ad-CEA-HSV/TK/GCV对照(1.0×109/kg、5.0×109/kg、10.0×109/kg),共设A^G 7组,每组各10只小鼠。观察肿瘤体积、重量、肿瘤体积-时间曲线、肿瘤抑制率及生存期。结果 Ad-CMV-CEA-HSV/TK/GCV及Ad-CEA-HSV/TK/GCV对人结肠癌裸鼠移植瘤生长均具有抑制作用,对移植瘤的体积及重量抑制呈作用物浓度依赖性;且Ad-CMV-CEA-HSV/TK/GCV抑制能力较Ad-CEAHSV/TK/GCV显著,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Ad-CMV-CEA-HSV/TK/GCV体系对结肠癌具有明确的实验性治疗作用,为人结肠癌及结肠癌远处转移灶的Ⅰ期临床治疗试验提供科学实验依据,具有广阔的临床应用前景。; 王成兴曾山崎杨平张通魏建昌陈华翠曹杰; 关键词：结肠癌巨细胞病毒癌胚抗原

构建靶向性载脂蛋白E修饰脂质体介导的HSVtk/丙氧鸟苷系统被引量：1: 2015年; 背景:自杀基因系统无选择性,不仅能杀伤癌细胞,对正常细胞也有同样作用,所以构建靶向性基因治疗载体成为迫切需要解决的问题。目的:评价载脂蛋白E修饰脂质体(apo E-lipoplexes)介导TK/丙氧鸟苷自杀基因质粒转染对Li-7肝癌细胞的杀伤效果。方法:apo E-lipoplexes包裹p AFP-TK-IRES2-EGFP真核表达质粒转染Li-7细胞,筛选HSVtk稳定表达细胞克隆(Li-7-tk),荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白表达,Western blotting检测HSVtk基因表达,MTT法评价HSVtk/丙氧鸟苷系统对Li-7肝癌细胞的杀伤作用。结果与结论:自杀基因质粒转染Li-7细胞经筛选得到稳定克隆(Li-7-tk),HSVtk/丙氧鸟苷系统作用于Li-7细胞后,细胞凋亡明显增加(P<0.01)。在甲胎蛋白阳性的Li-7肝癌细胞中,自杀基因载体稳定表达并有效杀灭癌细胞。; 张悦红高然朋于保锋王惠珍张栋弓韬郭睿王海龙程牛亮解军牛凯秦琴徐钧; 关键词：脂质体甲胎蛋白肝癌细胞增强型绿色荧光蛋白

人类端粒酶反转录酶-肿瘤抑素联合人类端粒酶反转录酶-胸苷激酶/丙氧鸟苷系统对肝癌HepG2细胞的作用被引量：1: 2014年; 目的观察人类端粒酶反转录酶-胸苷激酶/丙氧鸟苷（phTERT-TK/GCV）联合人类端粒酶反转录酶-肿瘤抑素（phTERT-tumstatin）对肝癌细胞HepG2凋亡以及肝癌相关基因甲胎蛋白（AFP）、RhoC的mRNA及蛋白表达情况的影响.方法细胞分为未转染组、转染空质粒hTERT-EGFP组（空质粒组）、转染phTERT-tumstatin组（TM组）、转染phTERT-TK后加50 μg/ml GCV组（TK/GCV组）、共转染phTERT-tumstatin和phTERT-TK后加50μg/ml GCV组（MK组）.荧光显微镜观察转染肝癌细胞HepG2和肝细胞L-02中EGFP与MCHERRY的表达;采用实时荧光定量PCR与Western blot检测各组AFP与RhoC在mRNA及蛋白水平表达的变化,流式细胞术检测各组转染后HepG2凋亡状况.结果 phTERT-tumstatin、phTERT-TK/GCV转染后两基因在肝癌细胞HepG2特异性表达;TK/GCV组、TM组及MK组AFPmRNA相对表达量分别为0.76±0.09、0.62±0.09、0.49±0.07,RhoC mRNA相对表达量分别为0.80±0.04、0.40±0.02、0.54±0.03,与空质粒组（0.94±0.04、0.94±0.02）比较差异均有统计学意义（P＜0.05）,且MK组较TK/GCV组、TM组AFP、RhoC mRNA相对表达差别显著.TK/GCV组、TM组、MK组、空质粒组和未转染组的AFP蛋白相对表达水平分别为0.97±0.02、0.83±0.02、0.69±0.01、1.19±0.03、1.15±0.05,RhoC蛋白相对表达水平分别为1.17±0.01、0.99±0.02、0.77±0.02、1.32±0.05、1.29±0.30（均P＜ 0.01）.phTERT-tumstatin、phTERT-TK/GCV共同转染HepG2细胞的凋亡率较二者单独转染组显著升高,二者单独及共转染组凋亡率较转染空质粒组及未转染组差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 phTERT-TK/GCV及phTERT-tumstatin对肝癌细胞HepG2有显著促凋亡的作用,二者联合作用更强.; 王静邓志华; 关键词：单纯疱疹病毒胸苷激酶肿瘤抑素肝肿瘤 HTERT启动子

Scopadulciol对胸腺激酶依赖的丙氧鸟苷阻断膀胱癌进展的增效作用被引量：2: 2013年; 目的观察Scopadulciol（SDC）在人端粒酶逆转录酶（hTERT）启动子调控腺病毒介导的单纯疱疹病毒胸腺激酶基因/丙氧鸟苷（HSV-tk/GCV）自杀基因系统对裸鼠膀胱癌的体内杀伤作用中的增效作用.方法首先建立人膀胱癌裸鼠皮下移植瘤模型,当肿瘤生长至直径约为6mm或体积为100 mm3时,随机分为4组,每组4只.A组为Ad-hTERT-HSV/tk＋ GCV＋ SDC组：于第1、5、10天每只裸鼠肿瘤内注射Ad-hTERT-HSV/tk（1×109 pfu）0.1 ml,第2天开始腹腔注射GCV（2.0 mg/d）×15 d和SDC（1 mg/d）×15 d.B组为Ad-hTERT-HSV/tk＋ GCV组：注射Ad-hTERT-HSV/tk、GCV同A组.C组为Ad-hTERT-HSV/tk＋ SDC组：注射Ad-hTERT-HSV/tk、SDC同A组.D组为对照组：裸鼠肿瘤内及腹腔内仅注射磷酸盐缓冲液（PBS）.自注射药物开始,每7d用圆规和游标卡尺测量肿瘤大小,计算肿瘤的体积,描绘肿瘤的生长曲线,共观察6周.另作4组治疗同上,2周后停止治疗,记录各组裸鼠的存活期,以观察对照组和治疗组存活期的改变.结果单纯Ad-hTERT-tk/SDC（C组）及对照组（D组）对肿瘤生长无抑制或促进作用；而经过Ad-hTERT-tk/GCV治疗的B组裸鼠,显示出对肿瘤有抑制作用,其体积低于C、D组（P＜0.01）,Ad-hTERT-HSV/tk/GCV＋ SDC治疗的A组抑制肿瘤作用更为明显,比较B组有明显的增强作用,与B组比较差异有统计学意义（P＜0.01）,与C、D两组比较差异有统计学意义（P＜0.01）.B、C、D各组荷瘤裸鼠的平均存活期分别为（54.0±3.2）、（50.2±3.0）和（49.7±3.7）d,而A组荷瘤裸鼠平均存活期延长至（73.0±5.6）d,与其余各照组比较差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 Scopadulciol对胸腺激酶依赖的GCV阻断膀胱癌进展有一定的增效作用,将Scopadulciol与我们构建的具有肿瘤特异性的重组腺病毒Ad-hTERT-HSV-tk以及GCV联合应用于人膀胱癌裸鼠皮下移植瘤模型的治疗,具有明显增效作用.; 瞿长宝蔡文清王圆圆王亚轩王东彬杨书文黎玮齐进春; 关键词：膀胱癌基因治疗重组腺病毒端粒酶逆转录酶

野甘草醇对胸腺激酶依赖的丙氧鸟苷阻断膀胱癌进展的增效作用被引量：2: 2013年; 目的观察野甘草醇（SDC）在人端粒酶逆转录酶（hTERT）启动子调控腺病毒介导的单纯疱疹病毒胸腺激酶基因/丙氧鸟苷（HSV-TK/GCV）自杀基因系统对人膀胱癌细胞的体外杀伤中的增效作用.方法测定胸苷激酶（TK）活性,应用高效液相色谱（HPLC）法测定三磷酸丙氧鸟苷（GCV-TP）在肿瘤细胞中的浓度,按转染倍数（MOI）=100加入Ad-hTERT-HSV-TK,24 h后分别加入5％血清培养液含GCV（200、100、50、10、5、l、0 mg/L）,含SDC（0、0.04或0.20 μmol/L）,应用于膀胱癌253J细胞,观察对膀胱癌细胞的杀伤作用.旁杀伤效应观察：将Ad-hTERT-HSV-TK按MOI=100转染253J细胞,24 h后将转染后的253J细胞和未转染的253J细胞以不同比例混合培养,共分11组（1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、2∶1、2∶3、3∶1、3∶2、3∶4、4∶1、4∶3）,在11组253J肿瘤细胞培养液中分别加入GCV使其浓度为100μmoL/L或浓度为100 μmol/L的GCV联合应用SDC 0.04μmoL/L,噻唑蓝（MTT）测定细胞存活率,观察旁杀伤作用.结果 SDC对转染Ad-hTERT-HSV-TK的膀胱癌253J细胞的TK酶活性影响不明显.应用高效液相色谱法分析,以单加GCV组的GCV-TP浓度记作100％.加入0.04 μmol/L SDC后,GCV-TP浓度变化差异无统计学意义（P＞0.05）；加入5倍治疗剂量0.20 μmol/L SDC后,GCV-TP浓度提高到（105.0±5.0）％,差异有统计学意义（P＜0.05）.进一步细胞实验证实,SDC对Ad-hTERT-HSV-TK/GCV系统杀伤膀胱癌253J细胞具有增效作用,旁杀伤作用增强明显.结论 SDC对胸腺激酶依赖的GCV阻断膀胱癌进展有一定增效作用,将天然药物SDC与构建的具有肿瘤特异性的重组腺病毒Ad-hTERT-HSV-TK/GCV系统联合应用,可以达到减毒增效的目的.; 瞿长宝蔡文清王圆圆王亚轩王东彬杨书文黎玮齐进春; 关键词：膀胱肿瘤基因治疗端粒酶逆转录酶重组腺病毒

腺病毒载体介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶／丙氧鸟苷系统抑制晶状体后囊膜混浊的研究: 2011年; 背景晶状体后囊膜混浊（PCO）目前尚无有效的防治途径。目的研究腺病毒载体介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSV-tk）／丙氧鸟苷（GCV）系统对PCO的抑制作用。方法选取新西兰白兔12只，用电脑随机选号法随机分为BSS＋BSS组、BSS＋GCV组、HSV-tk＋BSS组及HSV-tk＋GCV组，每组3只。兔眼行晶状体超声乳化摘出术，术中依据分组情况分别在晶状体囊袋中注入0．1mlBSS或携带有HSV-tk基因的腺病毒载体，术后12h分别在BSS＋BSS组和HSV-tk＋BSS组兔眼前房注入0．1mlBSS，BSS＋GCV组及HSV-tk＋GCV组以同样的方法注入GCV，每日1次，共3次。术后裂隙灯下观察眼前节情况，PCO分级按照Couderc的方法。术后4周摘除兔眼，采用Miyake-Apple法观察PCO情况，显微镜下取出晶状体囊袋后以电子天平称出整个囊袋湿质量，并行晶状体囊袋的组织学检查。结果术后1～3d各组均可见角膜轻度水肿与房水混浊，2周内基本恢复正常。术后4周，HSV-tk＋GCV组PCO明显轻于其他3组，差异均有统计学意义（H=2．647、H=2．939、H=2．884，P〈O．05），而BSS＋BSS组、BSS＋GCV组、HSV-tk＋BSS组组间的差异均无统计学意义（H=0．631、H=0．924、H=0．589，P〉0．05）。Miyake-Apple法观察显示，HSV-tk＋GCV组PCO面积与密度小于其他3组，晶状体囊袋湿质量也明显轻于其他3组，差异均有统计学意义（q=9．93、q=10．15、q=10．07，P〈O．05），BSS＋BSS组、BSS＋GCV组、HSV-tk＋BSS组组间差异均无统计学意义（q=0．22、q=0．07、q=015，P〉0．05）。囊袋组织学检查提示HSV-tk＋GCV组可见少量赤道部晶状体上皮细胞（LECs）增生并向后囊膜迁移，在囊袋外周形成稀薄的soemmering环，在中央部无细胞和皮质，或仅形成单细胞层纤维膜。BSS＋BSS组、BSS＋GCV组、HSV—tk＋BSS组可见大量赤道部LECs增生和迁移，在囊袋外周部soemmering环稠厚，在中央部形成多细胞; 邱海雁翁景宁; 关键词：腺病毒载体胸苷激酶丙氧鸟苷晶状体后囊膜混浊

Ad-hTERTp-单纯疱疹病毒胸苷激酶／丙氧鸟苷系统联合奥沙利铂对人类肝癌细胞的影响被引量：3: 2011年; 目的研究腺病毒介导的Ad—hTERTp一单纯疱疹病毒胸苷激酶／丙氧鸟苷（Ad-hTERTp—HSV—TK／GCV）自杀基因系统联合奥沙利铂对人类肝癌细胞HepG2的体外杀伤作用。方法将带有hTERT启动子驱动HSV—TK基因的重组复制缺陷型腺病毒Ad-hTERTp-HSV-TK作为载体。感染复数（MOI）为100转染HepG2细胞，观察不同浓度的Ad-hTERTp—HSV-TK／GCV、奥沙利铂及二者联合对HepG2细胞生长的影响。用锥虫蓝活细胞拒染法、四甲基偶氮唑盐比色（MTF）法检测各干预组肝癌细胞生长的抑制率。结果3组HepG2细胞的生长均不同程度被抑制，且随药物浓度的增加抑制作用显著增强。Ad—hTERTp—HSV。TK／GCV联合奥沙利铂组抑制率最高（86．63％），与Ad—hTERTp—HSV．TK／GCV组抑制率（72．12％）及奥沙利铂组抑制率（59．41％）相比差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论Ad—hTRTq：Tp—HSV—TK／GCV联合奥沙利铂可显著增强对HepG2细胞的杀伤作用，增加靶向性的同时可以降低药物浓度，对临床用药有指导意义。; 刘京龙邓志华郭素雅张瑾; 关键词：肝肿瘤基因疗法药物疗法

高强度聚焦超声联合单纯疱疹病毒胸苷激酶/丙氧鸟苷自杀基因治疗对VX2荷瘤兔免疫力的影响: 2011年; 目的探讨高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound,HIUF)联合单纯疱疹病毒胸苷激酶/丙氧鸟苷(HSV-tk/GCV)治疗对VX2荷瘤兔的肿瘤免疫耐受和特异性抗肿瘤免疫的影响。方法将40只实验兔按随机数字表法分为对照组、肿瘤组、HIFU组和联合治疗组,每组10只,其中HIFU组给予HIFU单独治疗,联合组给予HIFU和HSV-tk/GCV联合治疗。于治疗后第13天流式细胞术检测各组兔外周血CD4+CD25+Treg(Treg)细胞的数量变化情况,ELISA法检测外周血血浆IL-10,TGF-β的浓度,MTT法检测兔脾淋巴细胞对VX2肿瘤细胞的体外杀伤活性。结果肿瘤组外周血Treg细胞数量[(8.30±0.69)%]、IL-10水平[(67.82±4.52)pg/ml]和TGF-β水平[(6.55±0.45)μg/ml]相对于对照组[(5.30±0.45)%、(54.58±3.53)pg/ml、(5.51±0.27)μg/ml]均显著升高(P<0.01);HIFU组Treg细胞数量[(7.00±0.56)%]、IL-10水平[(60.32±4.70)pg/ml]、TGF-β水平[(6.22±0.19)μg/ml]明显低于肿瘤组(P<0.01,P<0.05);联合治疗组Treg细胞数量[(6.40±0.72)%]和TGF-β水平[(5.86±0.31)μg/ml]低于HIFU组(P<0.05),而IL-10水平[(58.79±4.42)pg/ml]变化则无统计学意义(P>0.05)。杀伤实验显示HIFU组和联合治疗组脾淋巴细胞对VX2肿瘤细胞的杀伤活性分别为(31.62±3.09)%、(29.48±2.68)%,明显高于对照组[(13.94±2.45)%]和肿瘤组[(12.00±2.96)%](P<0.01),但联合治疗组和HIFU组的比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HIFU联合HSV-tk/GCV治疗后,宿主肿瘤免疫耐受情况得到改善,特异性抗肿瘤免疫力增强。; 徐越周世骥艾志国陈勇李生伟刘长安; 关键词：HIFU HSV-TK/GCV TREG 肿瘤免疫

^(188)Re标记丙氧鸟苷白蛋白纳米微球的制备被引量：2: 2009年; 目的制备188Re标记丙氧鸟苷(GCV)白蛋白纳米微球(188Re-GCV-BSA-NP)。方法通过蛋白交联固化的方法制备GCV-BSA-NP,并测定GCV-BSA-NP的体外释药特性;采用预锡化直接标记法对GCV-BSA-NP进行188Re标记,同时观察188Re-GCV-BSA-NP体外稳定性。结果GCV-BSA-NP为大小不等的规则性微球,微球直径不等,但多集中在250~290nm。GCV-BSA-NP总的标记率>90%,放化纯>95%,放射性比活度1.85×105MBq/μmol。标记物放置于37℃的PBS(pH7.4)溶液中,在24h时放化纯为95%。结论预锡化直接标记法简便快速,能够得到较高的标记物放化纯度,稳定性好,GCV-BSA-NP具有明显的缓释功能。; 詹惠英唐秋莎汤月萍陈道桢; 关键词：^188RE 丙氧鸟苷牛血清白蛋白

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