搜索到811篇“ Β-木糖苷酶“的相关文章
- 宏基因组来源嗜热β-木糖苷酶XlyY411的酶学性质研究
- 2025年
- 从云南省元江县热水塘温泉的宏基因组中挖掘到编码糖苷水解酶39家族(GH39)的β-木糖苷酶基因xlyY411.将该基因在Escherichia coli BL21进行异源表达,通过亲和层析获得较纯的重组酶XlyY411.该酶的最适温度为85℃,90℃时的t_(1/2)为6.2 h.最适pH为5.0,4℃时,在pH=5~9之间有较好的pH耐受性XlyY411在添加10%的β-巯基乙醇或吐温的应用体系中,相对酶活保持在75%以上,表明其对表面活性剂有较好的耐受性.在20%的甲醇、乙醇或异丙醇体系中,相对酶活大于50%,表明其对有机溶剂有较好的耐受性.在2 mmol/L的木糖浓度下相对酶活为51.6%,表现出较好的产物耐受性.酶促动力学研究表明,XlyY411的K_(M)为(7.19±0.89)mmol,v_(max)为4753.68 mmol/(mg·min),k_(cat)为223.91 s,k_(cat)/K_(M)为31.14 s^(-1)·mmol^(-1).分子对接分析表明XlyY411与已报道的GH39家族β-木糖苷酶具有相似的催化机制.
- 李源栋刘秀明高莉唐曼雯蒋举兴陈兴胡瑞林杜刚段焰青
- 关键词：异源表达酶学性质温度稳定性
- 黄芪甲苷β-木糖苷酶突变体及其编码基因、重组载体、重组菌株、酶制剂和应用
- 本发明属于酶工程和生物技术领域，公开了一种黄芪甲苷β‑木糖苷酶突变体及其编码基因、重组载体、重组菌株、酶制剂和应用。所述突变体的氨基酸序列是由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的第23位、第699位、第712位中的至...
- 郑媛元刘宇薛锋徐晴
- 低温活性提高的β-木糖苷酶突变体D259G及其应用
- 本发明公开了一种低温活性提高的β‑木糖苷酶突变体D259G及其应用，涉及基因工程技术领域，该突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码该突变体的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。突变体D259G的最...
- 周峻沛张蕊黄遵锡曹丽娟林明月唐湘华吴倩
- 热稳定性提高的β-木糖苷酶突变体D485G及其应用
- 本发明公开了一种热稳定性提高的β‑木糖苷酶突变体D485G及其应用，涉及基因工程技术领域，该突变体D485G的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的突变体D485G的最适pH为4.5，最适温度为50℃。与氨...
- 周峻沛张蕊黄遵锡曹丽娟林明月唐湘华吴倩
- 酸耐受性提高的β-木糖苷酶突变体D395G及其应用
- 本发明公开了一种酸耐受性提高的β‑木糖苷酶突变体D395G及其应用，涉及基因工程技术领域。该突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码该突变体的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。该突变体D395G的...
- 周峻沛张蕊黄遵锡曹丽娟林明月唐湘华吴倩
- 热不稳定的β-木糖苷酶突变体E179GD182G及其应用
- 本发明公开了一种热不稳定的β‑木糖苷酶突变体E179GD182G及其应用，涉及基因工程技术领域，该突变体E179GD182G的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的突变体E179GD182G最适pH为4.5...
- 周峻沛张蕊黄遵锡曹丽娟林明月唐湘华吴倩
- 热耐受性降低的β-木糖苷酶突变体K130GK137G及其应用
- 本发明公开了一种热耐受性降低的β‑木糖苷酶突变体K130GK137G及其应用，涉及基因工程技术领域，该突变体K130GK137G的氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示。本发明提供的突变体K130GK137G最适pH为4....
- 周峻沛张蕊黄遵锡曹丽娟林明月唐湘华吴倩
- 嗜盐适冷及pH适应性改良的β-木糖苷酶突变体D41G及其应用
- 本发明公开了一种嗜盐适冷及pH适应性改良的β‑木糖苷酶突变体D41G及其应用，涉及基因工程技术领域。该突变体D41G的氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示。该突变体D41G的最适pH为5.0，最适温度为30℃，其活性可以...
- 周峻沛张蕊黄遵锡曹丽娟林明月唐湘华吴倩
- 黑曲霉β-木糖苷酶An-xyl的重组表达与木糖耐受性表征被引量：2
- 2023年
- 木糖苷酶催化低聚木糖水解在木质纤维素降解中起重要作用,但该酶活性易被产物木糖抑制,严重限制了其应用。基于分子对接,本文研究了茶梗发酵培养基差异表达显著的黑曲霉(Aspergillus niger)β-木糖苷酶An-xyl与木糖的亲和性,并对其进行克隆表达和性质表征,进一步探讨了该酶与纤维素酶对茶梗中木质纤维素的降解作用。分子对接结果表明,An-xyl与木糖的亲和性低于木糖耐受性较差的米曲霉β-木糖苷酶xyl A。重组表达的An-xyl木糖抑制常数Ki值为433.2 mmol/L,与同为GH3家族的β-木糖苷酶相比木糖耐受性较高。以p NPX为底物时,K_(m)和V_(max)分别为3.6 mmol/L和10000μmol/(min·mL)。An-xyl最适温度65℃,最适pH 4.0,65℃处理300 min能保持约61%的酶活力,在pH2.0-8.0的范围内处理24h后酶活力仍能维持80%左右。添加An-xyl与纤维素酶共同水解茶梗,反应2h和4h产生还原糖含量比单独使用纤维素酶水解分别提高了19.3%和38.6%。本研究表明,通过差异表达挖掘的An-xyl具有高木糖耐受性和较好的催化活性和稳定性,可协同作用水解茶梗类木质纤维素,丰富了具有高木糖耐受性β-木糖苷酶的资源,为其应用提供了实验依据。
- 李乐彭程于坤朋唐艺玲林燕玲李利君倪辉倪辉
- 关键词：黑曲霉Β-木糖苷酶木质纤维素
- 连接肽对β-木糖苷酶HJ14GH43热适应性的影响
- 2023年
- 为揭示连接肽对β-木糖苷酶热适应性的影响机制,本文通过替换β-木糖苷酶HJ14GH43的连接肽序列获得突变子Mut LK10,利用大肠杆菌BL21(DE3)对其进行重组异源表达。表达后对Mut LK10纯酶进行酶学特性和蛋白质结构分析。结果表明:突变酶Mut LK10的最适温度为20℃,相比野生酶HJ14GH43降低5℃。突变酶Mut LK10在20℃和10℃下处理60 min后分别保持约28%和69%的相对酶活,而野生酶HJ14GH43在20℃和10℃下处理60 min后分别保持约70%和88%的相对酶活。突变酶的最适温度和热稳定性与野生酶相比均降低。野生酶和突变酶的连接肽是位于蛋白质表面的一段无规则卷曲区域。蛋白质结构分析表明:突变后该区域内的负电势面积增大,由此带来的是该区域内亲水性的增加。结论:增大连接肽中的酸性氨基酸比例,使β-木糖苷酶通过增加表面负电势面积来竞争水合作用,从而增加酶与溶剂的相互作用并最终使酶能适应低温环境。本研究结果可为β-木糖苷酶及其它类型酶的热适应性改性研究提供参考。
- 曹丽娟李娜刘钰张蕊黄遵锡黄遵锡
- 关键词：Β-木糖苷酶连接肽
