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^99Tc^m标记人表皮生长因子受体2小分子靶向结合蛋白的制备及体外结合特性被引量：2: 2014年; 目的探讨^99Tc^m标记人表皮生长因子受体2（HER2）小分子靶向结合蛋白ZHER2：342的制备方法，分析其在体外与HER2的结合特洼。方法利用配体交换法进行ZHER2：342的^99Tc^m标记，分析不同质量的SnCl2和NaOH、不同反应时间对标记率的影响，探讨最佳的标记方法。用HPLC测定标记物的标记率与放化纯，并分析其体外稳定性。分析标记物在体外与HER2高表达的人卵巢癌SKOV-3细胞的结合率及滞留率，并与HER2低表达的人乳腺癌MDA—MB-231细胞进行对比。在体外用过量未标记的ZHER2：342对SKOV-3细胞HER2进行封闭后，与未封闭组进行对比，研究该分子探针与HER2结合的特异性。采用单因素方差分析及两样本t检验分析数据。结果^99Tc^m标记ZHER2：342的最佳条件为：反应体系中依次加人ZHER2：342 5μg（1g／L）、NaOH 5μg（1g／L）、SnCl2 8．8μg（1g／L）、^99Tc^mO4^-1 150μl（37MBq），轻微振荡后室温静置1h.^99Tc^m-ZHER2：342标记率为（98.10±1.73）％，放化纯〉98％；体外稳定性好，与生理盐水及新鲜人血清混合24h后放化纯均〉85％。在体外与HER2高表达的SKOV-3细胞具有较高的结合率，混合后6h最高，结合率为（995±1．02）％，且各时间点细胞结合率均明显高于HER2低表达的MDA—MB-231细胞（5．68～9．88与0．56～2．11；t=-34．50—-13．14，均P〈0．01）。此外，加入过量的未标记的ZHER2：342进行受体封闭时，^99Tc^m-ZHER2：342与SKOV-3细胞的结合率从（9．95±1．02）％降到（2．11±0．27）％（t=-13．14，P〈0．01）。结论^99Tc^m标记ZHER2：342方法简单，标记率高；标记产物体外稳定性好，在体外可与HER2高表达的人卵巢癌SKOV-3细胞特异性结合，是有潜力的HER2靶向分子影像探针。; 张敬勉赵新明王士杰任秀春王娜韩静雅贾立镯; 关键词：AFFIBODY 锝

^99Tc^m标记MDM2反义寡核苷酸对人前列腺癌细胞目的基因表达的影响被引量：3: 2014年; 目的探讨99Tcm标记的小鼠双微体扩增基因2（MDM2）mRNA的ASON和错义寡核苷酸（ASONM）对前列腺癌细胞株LNCaP目的基因表达的影响，为后续的前列腺癌基因显像奠定基础。方法人工合成一段针对MDM2mRNA的ASON和ASONM，以HYNIC为螯合剂，对ASON和ASONM进行99Tcm标记，检测标记率、放化纯、稳定性及分子杂交活性。用脂质体包裹驰TcTM-HYNIC．ASON（0、100和500nmol／L）和99Tcm-HYNIC-ASONM（500nmol／L），于LNCaP细胞中培养24h，再行RT-PCR和Westernblot实验，观察探针对MDM2、p53mRNA和相应蛋白质表达的影响。各组间计量资料比较采用单因素方差分析和g检验。结果ASON的标记率为（65．15±2．05）％（n=5），ASONM的标记率为（64．93±2．18）％（n=5），两者放化纯均达90％以上。99Tcm-HYNIC-ASON稳定性好，保留了与互补链结合的能力。0、100、500nmo]／L99Tcm-HYNIC-ASON组和500nmol／LTcmHYNIC-ASONM组MDM2mRNA含量分别为0．458±0．035、0．250±0．026、0．174±0．032、0．463±0．033。除0nmol／L99Tcm．HYNIC-ASON组与500nmol／L99Tcm-HYNIC-ASONM组间外，余差异均有统计学意义（F=33．69，q=24．32-91．45，均P〈0．01）；各组MDM2蛋白的平均密度分别为90．712±3．042、71．2184-2．915、32．775±3．062、88．121±2．710，同样除0nmol／L99Tcm．HYNIC．ASON组与500nmol／L99Tcm-HYNIC-ASONM组间外，余差异均有统计学意义（F=235．93，g：6．43～19．14，均P〈0．01）。4组p53mRNA含量分别为0．185±0．046、0．203±0．040、0．213±0．027、0．163±0．049，差异无统计学意义（F=2．18，P〉0．05）；各组p53蛋白平均密度分别为33．865±2．213、70．445±2．180、99．025±3．012、38．351±3．271，除0nmol／L99Tcm-HYNIC-ASON组与500nmol／L99Tcm-HYNIC-ASONM组间外，余差异均有统计学意义（F=53．98，g=3．32-6．74，均P〈0．01）。结论MDM2反义探针能与MDM2mRNA链上的目的序列特异结合，并抑制; 吴琼张月红付鹏田国梅赵长久; 关键词：基因表达寡核苷酸类锝

^99Tc^m标记RGD环肽二聚体人神经胶质瘤显像及重组人血管内皮细胞抑制素对其影响的实验研究被引量：3: 2013年; 目的研究新型含RGD的环肽二聚体探针^99Tc^m-HYNIC-2聚乙二醇（PEG）4-Dimer{Dimer：E-[C（RGDfK）：]}作为整合素αv β3受体显像剂的可行性，并观察重组人血管内皮细胞抑制素注射液（恩度）对标记探针在荷瘤裸鼠体内生物学分布及1显像的影响。方法选取整合素αv β3受体表达阳性的人神经胶质瘤细胞株U87MG，免疫荧光检测U87MG经恩度处理后的整合素αv β3受体表达情况。制备^99Tc^mHYNIC．2PEG4-Dimer。建立荷U87MG神经胶质瘤裸鼠模型，并按简单随机法将其分为2组，恩度组给予200μl（1rag）恩度，对照组给予同等体积的生理盐水，6h后注射^99Tc^m-HYNIC．2PEG4-Dimer，评价探针在2组荷瘤裸鼠体内的生物学分布。另取荷瘤裸鼠16只，分为恩度处理组和生理盐水组，分别按体质量给予20mg／kg恩度和同等体积的生理盐水，给药后行1显像。采用两样本t检验对实验数据进行统计分析。结果^99Tc^m-HYNIC．2PEG4-Dimer的放化纯大于95％。U87MG细胞高表达整合素αv β3受体，经恩度处理后整合素αv β3受体表达逐渐减低，恩度质量浓度为400μg／ml时，表达程度最低。荷瘤裸鼠注射^99Tc^m-HYNIC-2PEG4-Dimer后90min，肿瘤组织有较高摄取，给予恩度后肿瘤摄取减低，恩度组和对照组肿瘤摄取分别为（1．50±0．08）％ID／g和（6．27±0．33）％ID／g（t=40．23，P〈0．05）；1显像示2组T／NT比值分别为1．02±0．11和2．58±0．36（t=10．25，P〈0．05）；免疫组织化学检查结果显示2组整合素αv β3受体阳性表达率分别为（33．1±2．7）％与（81．5±3．2）％（t=32．60，P〈0．05）。结论^99Tc^m-HYNIC-2PEG-4Dimer可用于整合素αv β3受体阳性肿瘤的显像，并可用于监测恩度疗效，有望用于筛选恩度治疗病例。; 孙永红苏新辉贾兵王凡陈贵兵吴华; 关键词：神经胶质瘤精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸放射性核素显像血管生成抑制剂

^99Tc^m标记RGD环肽在荷肺腺癌裸鼠中的显像研究被引量：3: 2011年; 目的制备^99Tc^m标记的含RGD序列的^99Tc^m-联肼尼克酰胺（HYNIC）-c（RGDfK）环肽单体，评价其在整合素表达阳性的肺腺癌严重联合免疫缺陷（SCID）小鼠肿瘤模型中的生物学分布，并进行显像研究。方法（1）以HYNIC为双功能螯合剂，以三羟甲基甘氨酸（tricine）和乙二胺二乙酸为协同配体，采用二步法制备^99Tc^m标记HYNIC—c（RGDfK），进行细胞结合实验，测定标记物生物学活性；（2）将荷A549肺腺癌模型小鼠分为7组[第7组作为竞争性抑制组，注射显像剂前0．5h先注射HYNIC-c（CRDGfk）100μg]，每组5只，经尾静脉注射7．4MBq的^99Tc^m-HYNIC-c（RGDfK），于注射后0．5，1，2，4，8，12h处死，计算荷A549肺腺癌小鼠模型各脏器％ID／g，同时采用ROI技术研究^99Tc^m-HYNIC—c（RGDfK）在小鼠体内的生物学分布，计算不同时间点的T／NT比值（NT选取肌肉）；（3）取6只荷瘤裸鼠，其中3只为竞争性抑制组，经尾静脉注射7．4MBq的^99Tc^m-HYNIC—c（RGDfK），于注射后0．5，1，2，4，8，12h进行静态1显像。结果^99Tc^m-HYNIC—c（RGDfK）的标记率〉90％，放化纯〉95％。^99Tc^m-HYNIC—c（RGDfK）与A549肺腺癌细胞特异性结合率最高为36．14％，体内分布实验显示^99Tc^m-HYNIC—c（RGDfK）在肾的摄取率始终高于20％ID／g，注射后0．5h肿瘤％ID／g为10．52±1．48，8h为17．26±2．81，12h为8．93±0．90，竞争性抑制组注射后0．5h为2．29±0．85。通过ROI技术测得T／NT在8h达6．87。注射后1h肿瘤可显影，4～8h显影更清晰。结论^99Tc^m标记HYNIC—c（RGDfK）易于制备，具有良好的靶向性。; 锁耀宇杨卫东马晓伟梁晓燕马温惠汪静; 关键词：锝同位素标记放射性核素显像

^99Tc^m标记亲肿瘤三肽的实验研究被引量：4: 2011年; 目的进行99Tcm-精氨酸-谷氨酸-丝氨酸（RES）的亲肿瘤实验研究.方法采用标准Fmoc固相合成法合成RES,在不同的试剂和温度（100 ℃或室温）条件下,以氯化亚锡为还原剂进行RES的99Tcm标记,优化标记条件.进行荷A549肺癌裸鼠99Tcm-RES显像并测定%ID/g,研究99TcmRES在荷瘤裸鼠体内的分布.比较兔炎性反应和肿瘤模型显像结果.结果（1）酒石酸钠及氢氧化钠为缓冲剂,氯化亚锡为还原剂,100 ℃水浴10 min,RES放化纯最高达到85%;99Tcm-RES性能稳定,室温下放置6 h,放化纯仍达75%.（2）注射后0.5 h,99Tcm-RES多分布于心、肝、肾等血供丰富脏器,2 h血液的放射性（0.36%ID/g）降幅明显,仅相当于0.5 h（2.35%ID/g）的1/7;心、肝、肺的放射性降幅稍慢,但明显快于肿瘤;注射后0.5 h肿瘤放射性摄取为2.32%ID/g,6 h为1.54%ID/g,6 h后仍有超过60%的放射性滞留.99Tcm-RES注射后6 h肿瘤/血、肿瘤/心、肿瘤/肝、肿瘤/肺、肿瘤/脾和肿瘤/骨骼肌放射性比值分别为5.31,1.88,1.57,3.58,4.16和5.92.（3）荷瘤鼠显像发现肿瘤部位明显浓聚99Tcm-RES,而201Tl、99Tcm-MIBI在肿瘤部位未见明显浓聚.（4）兔炎性反应和肿瘤模型显像示肿瘤部位放射性明显浓聚,而炎性反应部位放射性无明显浓聚,注药后6 h肿瘤/炎性反应部位放射性比值为3.12.结论用放射性组合化学文库筛选出的小分子RES是一种与肿瘤高亲和力的多肽,有望成为一种肿瘤显像剂.; 谢文晖蔡小佳刘慈懿曾骏张莉华雷贝黄钢; 关键词：肽类锝肿瘤炎性反应放射性核素显像

^99Tc^m标记VEGFR-3高亲和融合多肽在荷人卵巢癌裸鼠体内的分布和显像研究被引量：3: 2009年; 目的研究99Tcm标记VEGFR-3高亲和融合肽(phage-SHSWHWLPNLRHYAS)在荷人卵巢癌裸鼠体内分布和放射免疫定位显像。方法用NHS-MAG3为双功能鳌合剂,固相法合成多肽。99Tcm预亚锡直接标记法进行标记,纸层析法测定标记率。经尾静脉注射于荷瘤鼠体内,取不同时相进行SPECT显像,测定标记物在体内的分布情况并进行分析。结果融合多肽的99Tcm标记率为95.27%,放射化学纯度为96%,放射性浓度24.6MBq/ml。经鼠尾静脉注射后1h,植瘤部位开始出现放射性浓集,肾脏、肝脏及膀胱组织也可见显像;注射后3h肿瘤显像最清晰,每克组织注射百分剂量率(%ID/g)为(30.20±6.89)。其余大部分脏器的T/NT值均达最高,最高为肌肉(13.13);注射后4h肿瘤部位显像逐渐消退。对照组裸鼠的肿瘤部位始终未见显像。结论筛选获得的VEGFR-3高亲和融合肽能够靶向荷瘤鼠体内肿瘤组织,实现肿瘤的靶向受体显像。; 王玲梁志清侍立峰杨明福刘广元; 关键词：VEGFR-3 ^99TC^M 荷瘤鼠受体显像

^99Tc^m标记反义肽核酸探针的制备及其荷瘤裸鼠体内分布被引量：5: 2008年; 目的探讨^99Tc^m标记反义肽核酸（PNA）探针的新方法及其在生物体内的分布。方法合成12mer且5′端含有四肽G-（D）-A-G-G的c-myc mRNA反义、无义PNA片段，利用G-（D）-A-G-G形成的N4结构为螯合基团进行^99Tc^m标记，用聚酰胺薄膜层析法和高效液相色谱仪法（HPLC）测定其标记率和标记物的稳定性，并行人结肠癌荷瘤裸鼠体内分布[每克组织百分注射剂量率（％ID／g）]及显像研究。采用SAS6．22软件对数据进行分析。结果反义、无义PNA片段合成物的纯度〉95％。^99Tc^m标记c-myc mRNA反义、无义PNA的标记率〉95％，标记物室温放置18h测定其标记率仍可达95％以上。c-myc mRNA反义、无义PNA片段4-8℃下放置3个月标记率仍〉95％。HPLC测定标记物呈单峰。^99Tc^m标记c-myc mRNA反义PNA主要分布在荷瘤鼠肾、脾、肿瘤、肠道、肝组织中，^99Tc^m标记c-myc mRNA无义PNA在荷瘤鼠血液、脾、肾、肝及肺组织中分布较多；注射后4h两者在荷瘤鼠肿瘤组织中的分布差异有统计学意义[（1．11±0．12）％ID／g和（0．14±0．02）％ID／g；t=14．75，P〈0．01]。^99Tc^m标记c-myc mRNA反义PNA在小鼠体内肿瘤／肌肉、肿瘤／肺的摄取比值较高，肿瘤显像明显。结论用^99Tc^m标记c-myc mRNA反义、无义PNA的方法简单，标记率高，标记物稳定，前者有望成为一种新型肿瘤显像剂。; 赵新明张召奇王建方张敬勉王颖晨; 关键词：核酸探针锝同位素标记结肠肿瘤

^99Tc^m标记抗VEGF多肽ATWLPPR及其在正常小鼠体内生物学分布: 2008年; 血管内皮生长因子（VEGF）及其受体在肿瘤血管生成过程中发挥关键作用，已成为肿瘤诊断与治疗中一个新的靶向目标。丙氨酸-苏氨酸-色氨酸-亮氨酸-亮氨酸-精氨酸（Ala—Thr-Trp—Leu—Pro—Pro—Arg，ATWLPPR）是从随机噬菌体随机七肽库构建的合成肽库中筛选出来的小肽，; 孙琳兰晓莉高再荣张永学常伟; 关键词：^99TC^M标记体内生物学分布正常小鼠 VEGF 多肽肿瘤血管生成

^99Tc^m标记突触结合蛋白I-C2A片段无创性检测急性静脉血栓被引量：4: 2008年; 突触结合蛋白I-C2A片段(SytI-C2A)具有与活化血小板膜表面的磷脂酰丝氨酸(PS)特异结合的能力。本研究通过动物实验初步探讨99Tcm标记突触结合蛋白I-C2A片段(99Tcm-SytI-C2A)作为显像剂用于进行急性静脉血栓显像的可行性。选择比格犬5只,通过导管将双股螺旋金属丝送入一侧后肢股静脉,制成急性股静脉血栓模型;然后静脉注射99Tcm-SytI-C2A185MBq,注射后1h、2h和3h分别进行显像,用勾画"感兴趣"区的方法计算血栓部位与对侧后肢的对称部位以及血栓/本底的放射性比值。取出血栓、后肢肌肉和血液等标本,体外测定%ID·g-1值。结果表明,注射后1h、2h和3h,血栓部位与对侧后肢对称部位的放射性比值分别为3.01±0.30、3.22±0.21和3.37±0.57;与同侧下肢放射性本底的比值分别为3.10±0.39、3.32±0.31和3.50±0.45。体外检测结果显示出股静脉血栓的单位质量放射性摄取量是血液的2.40±0.35倍,是后肢肌肉的68.90±45.30倍。99Tcm-SytI-C2A能用于无创性地早期检测静脉血栓,有望成为较理想的新型血栓显像剂。; 方纬季顺东王峰阮长耿王自正王自正; 关键词：血栓形成核素显像突触结合蛋白

^99Tc^m标记趋化肽类似物的制备: 2004年; 利用固相法合成趋化肽类似物fMLFK,并采用双功能螯合剂(HYNIC)技术合成了99Tcm标记的趋化肽类似物99Tcm-HYNIC-fMLFK,测定了标记物的标记率和放化纯度,考察了配合物的稳定性.结果表明,合成fMLFK的产率大于80%,纯度大于97%;质谱法测得的相对分子质量与理论值相符;99Tcm标记后,配合物的放化纯度大于95%,在24 h内放化纯度无明显降低.; 岳井银王芹冯学民韩佩珍穆传杰; 关键词：炎症显像剂白细胞固相合成锝99 核医学

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